一种含姜黄素的治疗癌症的纳米药物及其制备方法和应用与流程

本发明属于生物纳米制剂与肿瘤学应用，具体涉及一种含姜黄素的治疗癌症的纳米药物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、多酚类化合物姜黄素(curcumin，简称cur)是从姜黄中提取的多酚类化合物，具有良好的抗癌潜力。姜黄素可调节凋亡因子、生长因子以及炎症蛋白的表达，具有抗癌和消炎活性，可单独使用或与其他抗癌药物联合用于癌症治疗。然而，姜黄素的临床应用受限于其低抗肿瘤活性等显著的问题。因此，亟需开发其新的制剂来克服上述问题，以求获得更好的治疗效果。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种含姜黄素的治疗癌症的纳米药物及其制备方法和应用。本发明所述纳米药物高效且安全，具有较高的抗肿瘤活性和良好的生物安全性，为攻克癌症这一重大疾病提供了新的思路和策略。

2、本发明提供了一种含姜黄素的治疗癌症的纳米药物，所述纳米药物包括姜黄素和表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡，或所述纳米药物包括姜黄素和经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡。

3、优选的是，所述肿瘤抗原结合多肽修饰包括rgd多肽修饰。

4、优选的是，所述rgd多肽修饰使用rgd-cp05融合肽进行，所述rgd-cp05融合肽的氨基酸序列如seq id no.1所示。

5、优选的是，所述纳米药物中，姜黄素和表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡简单混合；或将姜黄素载入表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡内；或姜黄素和经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡简单混合；或将姜黄素载入经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡内。

6、优选的是，用于细胞外囊泡生产的细胞包括间充质干细胞、骨髓干细胞、胚胎干细胞、脐带干细胞、诱导多能干细胞、肿瘤细胞、肿瘤干细胞、免疫细胞或成纤维细胞中的任一种。

7、优选的是，所述纳米药物的剂型包括纳米制剂；所述纳米制剂中，细胞外囊泡的粒径分布为60～120nm。

8、本发明还提供了经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡作为靶向递送抗癌药物的纳米递送平台，在制备抗肿瘤纳米药物中的应用；所述抗癌药物包括姜黄素。

9、优选的是，当将姜黄素载入表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡内时，所述纳米药物的制备方法包括以下步骤：

10、将表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡与姜黄素混合，置于冰上进行超声处理，得到ev-t-cur；

11、当将姜黄素载入经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡内，所述纳米药物的制备方法包括以下步骤：

12、将经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡与姜黄素混合，置于冰上进行超声处理，得到rgd@ev-t-cur。

13、优选的是，经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡的制备方法包括以下步骤：

14、合成肿瘤抗原结合多肽，将肿瘤抗原结合多肽和表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡混和，孵育，超速离心，取沉淀，得到rgd@ev-t。

15、优选的是，所述超声处理的条件包括：超声10～60s，暂停10～60s，循环次数5～12次；温度15～30℃，超声功率设置为10～30％。

16、本发明提供了一种含姜黄素的治疗癌症的纳米药物。本发明所述纳米药物包括姜黄素和表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡，或所述纳米药物包括姜黄素和经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡。药物组分可以简单混合联用，也可以制备成复合载入药物。通过联用姜黄素增敏癌细胞的trail响应，可克服普遍的癌细胞trail抵抗性。具体的，cur与ev-t或rgd@ev-t联用，能够产生极强的协同效应，获得显著高于单药的抗癌活性。且与cur联用时，rgd@ev-t显示出比ev-t更高的癌细胞生长抑制率，表明rgd修饰显著增强了ev-t的抗癌活性。并且，cur与ev-t或rgd@ev-t联用对正常细胞无影响，本发明复合药物联用的方案具有良好的安全性。

17、当姜黄素以载入的方式存在于表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡或经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡中时，本发明获得的是一种新型的复合纳米药物。纳米粒子来自于细胞，具体为细胞外囊泡，cur有较高的ev包封率，可解决姜黄素难溶性的问题。本发明先制备表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡ev-t，再通过cp05锚定肽介导将肿瘤靶向多肽rgd结合到ev-t膜表面，获得rgd修饰的ev-t，即rgd@ev-t(在本发明对ev-t进行工程化修饰，使其携带膜表面结合的rgd，获得肿瘤靶向修饰的ev-t，即rgd@ev-t，能够显著增强ev-t的肿瘤靶向性)，然后载入cur，制备靶向修饰的、复合载送trail和cur的新型靶向的姜黄素纳米药物rgd@ev-t-cur。省略肿瘤靶向多肽rgd修饰的过程，获得复合载送trail和cur的新型靶向的姜黄素纳米药物ev-t-cur。经由ev共载递送的cur和trail具有高度的协同作用，能高效特异性地广谱杀死各种癌细胞，rgd修饰进一步显著增强了ev-t-cur的肿瘤靶向性，在细胞模型和动物肿瘤模型中均显示了高效的抗肿瘤活性，并且具备良好的安全性。本发明创造了一种高效安全的新型的肿瘤靶向的姜黄素纳米制剂，具有开发为广谱靶向抗癌纳米药物的良好潜力。

技术特征：

1.一种含姜黄素的治疗癌症的纳米药物，其特征在于，所述纳米药物包括姜黄素和表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡，或所述纳米药物包括姜黄素和经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡。

2.根据权利要求1所述的纳米药物，其特征在于，所述肿瘤抗原结合多肽修饰包括rgd多肽修饰。

3.根据权利要求2所述的纳米药物，其特征在于，所述rgd多肽修饰使用rgd-cp05融合肽进行，所述rgd-cp05融合肽的氨基酸序列如seq id no.1所示。

4.根据权利要求1所述的纳米药物，其特征在于，所述纳米药物中，姜黄素和表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡简单混合；或将姜黄素载入表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡内；或姜黄素和经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡简单混合；或将姜黄素载入经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡内。

5.根据权利要求1、2或4所述的纳米药物，其特征在于，用于细胞外囊泡生产的细胞包括间充质干细胞、骨髓干细胞、胚胎干细胞、脐带干细胞、诱导多能干细胞、肿瘤细胞、肿瘤干细胞、免疫细胞或成纤维细胞中的任一种。

6.根据权利要求1所述的纳米药物，其特征在于，所述纳米药物中，细胞外囊泡的粒径分布为60～120nm。

7.经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡作为靶向递送抗癌药物的纳米递送平台，在制备抗肿瘤纳米药物中的应用；所述抗癌药物包括姜黄素。

8.权利要求1～6任一项所述纳米药物的制备方法，其特征在于，当将姜黄素载入表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡内时，所述纳米药物的制备方法包括以下步骤：

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白trail的细胞外囊泡的制备方法包括以下步骤：

10.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述超声处理的条件包括：超声10～60s，暂停10～60s，循环次数5～12次；温度15～30℃，超声功率设置为10～30％。

技术总结本发明属于生物纳米制剂与肿瘤学应用技术领域，涉及一种含姜黄素的治疗癌症的纳米药物及其制备方法和应用。本发明所述纳米药物包括姜黄素和表达抗癌蛋白TRAIL的细胞外囊泡，或所述纳米药物包括姜黄素和经肿瘤抗原结合多肽修饰的表达抗癌蛋白TRAIL的细胞外囊泡。姜黄素载入上述细胞外囊泡联用，能够产生极强的协同效应，多肽修饰能够显著增强EV‑T的抗癌活性；将姜黄素载入上述细胞外囊泡获得的复合纳米药物，可解决姜黄素难溶性的问题，进一步提升抗癌效果。技术研发人员：黄启林,黄启彬,李琴受保护的技术使用者：四川康克俞生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/6/11