一种发光杆菌及其复合微生物制剂制备方法与应用与流程

本发明涉及一种发光杆菌及其复合微生物制剂制备方法与应用。

背景技术：

1、水产养殖过程中，饵料残留和水生物排泄物会对养殖水体造成污染，特别是形成氨氮和亚硝酸盐氮。高浓度的氨氮和亚硝酸盐氮致使养殖动物疾病暴发,养殖产品质量和产量下降。此外，未经处理的养殖尾水直接排放至天然水体中大量排放会导致受纳水体水质恶化。进而产生一系列的负面影响。如何快速高效降低和控制水体中亚硝酸盐的含量成为热点问题。

2、生物脱氮以其安全、无污染、高效、经济等特点被认为是去除水体中亚硝酸盐氮的有效途径之一。现如今，许多养殖厂利用微生物制剂进行调控水体质量。因此，制备一种不危害养殖生物健康、使用方法简单、见效快、效果持久的调理水产养殖水环境用微生物制剂具有重大意义。

技术实现思路

1、本发明的目的之一是提供一株新型发光杆菌，筛选于红树林30cm深层土壤，16s测序与其相似度最高的菌种为photobacterium ganghwense，相似度为97.4％，是属于发光杆菌属的一株新种。能够在海水养殖水中高效脱氮。菌株于2023年12月29日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为：gdmcc 64226，保藏单位地址：中国广东，广东省微生物菌种保藏中心。

2、该新型发光杆菌命名为photobacterium sp.fg-1。在ma培养基上28℃培养24h，菌落呈淡黄色、表面光滑、边缘规则。菌落个体呈杆状，无芽孢。

3、生理生化：新型发光杆菌(photobacterium sp.fg-1)生长盐度为0.5～7％，最适为2％；生长ph为6～8，最适为6；生长温度为10～42℃，最适为25～28℃，氧化酶(+)、接触酶(+)。

4、api 50ch结果显示，能水解吐温40、淀粉和糖原；不能水解纤维素、甘露醇(+)、d-核糖(+)、d-葡萄糖(+)、d-果糖(+)。

5、api zym结果显示，碱性磷酸酶(+)、酯酶(c4)(+)、酯酶脂肪酶(c8)(+)、脂肪酶(c14)(+)、亮氨酸芳基酰胺酶(+)、缬氨酸芳基酰胺酶(+)、α-葡萄糖苷酶(+)、酸性磷酸酶(+)。

6、api 20ne结果显示,亚硝酸盐还原(+)、吲哚试验(+)、d-葡萄糖发酵(+)、精氨酸二水解酶(+)、脲酶(+)、β-葡萄糖苷酶(+)、明胶水解(+)、n-乙酰葡(+)，能利用d-葡萄糖、萄糖胺、d-麦芽糖、葡萄糖酸钾、苹果酸、柠檬酸三钠。

7、本发明的另一目的是提供一种调理水产养殖水环境用复合微生物制剂，包含新型发光杆菌。该复合微生物制剂能够有效降低养殖水体中的无机氮含量。所述复合微生物制剂，包括复合菌种发酵液和复合载体。

8、所述复合菌种包括蜡样芽胞杆菌、贝莱斯芽孢杆菌、海运海杆状菌、枯草芽孢杆菌以及新型发光杆菌photobacterium sp.fg-1。

9、进一步的，所述的混合发酵液包括蜡样芽孢杆菌发酵液、贝莱斯芽孢杆菌发酵液、海运海杆状菌发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液、发光杆菌发酵液。其质量比为(1～3)：(1～2)：(2～5)：(1～3)：(3～5)。

10、除了发光杆菌之外，其余菌株均可以通过商业途径购买到。

11、进一步的，所述蜡样芽孢杆菌活菌数为2.1×109cfu/ml。

12、进一步的，所述贝莱斯芽孢杆菌活菌数为1.6×109cfu/ml。

13、进一步的，所述海运海杆状菌活菌数为8.3×108cfu/ml。

14、进一步的，所述枯草芽孢杆菌活菌数为2.3×109cfu/ml。

15、进一步的，所述发光杆菌活菌数为1.7×109cfu/ml。

16、制备时，将所述的复合菌种发酵液与载体按一定比例使用电动搅拌器混匀，在混匀的同时缓慢添加糖蜜和酵母粉。干燥、粉碎制得复合微生物制剂。所述的干燥的温度为25～30℃，干燥后的复合菌剂的含水量为3％～7％。

17、进一步的，所述的复合菌种发酵液和所述的载体的质量比为(2.5～3.5)：(4.5～5.5)。

18、进一步的，所述的载体包括椰蓉、地瓜干粉、土豆渣、红薯渣、木薯渣、高岭土、玉米芯粉、稻壳粉、麸皮粉一种或几种。

19、本发明中的复合微生物制剂可以在养殖尾水处理和原位养殖处理应用。

20、本发明中的复合微生物制剂能够明显的清除水体中的氨氮亚硝酸盐氮。将本发明中的复合微生物制剂直接投放或将该复合微生物制剂与海水混合后泼洒于养殖水体或养殖尾水中均可。

技术特征：

1.一株新型发光杆菌，其在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为：gdmcc 64226。

2.一种复合微生物制剂，其特征在于，包括权利要求1所述的新型发光杆菌。

3.一种复合微生物制剂，其特征在于，原料包括蜡样芽孢杆菌、贝莱斯芽孢杆菌、海运海杆状菌、枯草芽孢杆菌和权利要求1所述的新型发光杆菌，各菌发酵液的活菌含量分别为1×108cfu/ml～1×1010cfu/ml。

4.根据权利要求3所述的复合微生物制剂，其特征在于：所述贝莱斯芽孢杆菌活菌数为(1～5)×109cfu/ml；海运海杆状菌活菌数为(5～9)×108cfu/ml；枯草芽孢杆菌活菌数为(1～5)×109cfu/ml；发光杆菌活菌数为(1～5)×109cfu/ml。

5.根据权利要求2至4任一项所述的复合微生物制剂，其特征在于：还包括载体，复合菌种发酵液和所述的载体的质量比为(2.5～3.5)：(4.5～5.5)。

6.根据权利要求5所述的复合微生物制剂，其特征在于：载体包括椰蓉、地瓜干粉、土豆渣、红薯渣、木薯渣、玉米芯粉、稻壳粉、麸皮粉和高岭土的一种或几种。

7.根据权利要求5所述的复合微生物制剂，其特征在于：还包括营养剂糖蜜和酵母粉，所述的营养剂占所述的复合微生物制剂总质量的4～6％，糖蜜和酵母粉的质量比为(1～10)：(1～10)。

8.根据权利要求7所述的复合微生物制剂的制备方法，包括如下步骤，将所述的复合菌种发酵液与载体按比例使用电动搅拌器混匀，在混匀的同时缓慢添加糖蜜和酵母粉；干燥、粉碎制得复合微生物制剂；所述的干燥的温度为25～30℃，干燥后的复合菌剂的含水量为3％～7％。

9.根据权利要求2～7任一项所述的复合微生物制剂在养殖尾水处理和原位水的水处理中的应用。

10.根据权利要求9所述的复合微生物制剂的应用，其特征在于：所处理的养殖环境为海水养殖或者半海水养殖。

技术总结本发明公开了一种发光杆菌及其复合微生物制剂制备方法与应用，本发明的复合微生物制剂的原料包括复合菌种发酵液和载体，其中复合菌种发酵液由质量比为(1～3)：(1～2)：(2～5)：(1～3)：(3～5)蜡样芽孢杆菌发酵液、贝莱斯芽孢杆菌发酵液、海运海杆状菌发酵液液、枯草芽孢杆菌发酵液、发光杆菌发酵液组成。本发明中载体包括椰蓉、地瓜干粉、土豆渣、红薯渣、木薯渣、玉米芯粉、稻壳粉、麸皮粉和高岭土的一种或几种。复合菌种发酵液和载体形成的复合微生物制剂，有较高的生物活性和适应性，能够高效降低水体中的氨氮和亚硝酸盐氮的含量。技术研发人员：单大鹏,姜万里受保护的技术使用者：自然资源部第三海洋研究所技术研发日：技术公布日：2024/6/18