LAMC2拮抗剂在癌症诊断和治疗中的用途

本公开属于生物，具体涉及lamc2拮抗剂在癌症诊断和治疗中的用途。

背景技术：

1、肝内胆管细胞癌(intrahepatic cholangiocarcinoma，icca)是致死率极高的恶性肿瘤，五年生存率仅为5％-10％。icca作为第二大常见的原发性肝癌(约占10％-20％)，近年来其发生率一直有所上升。针对早期icca患者，肿瘤切除术和肝移植是较为有效的治疗选择，然而术后转移率高。同时由于icca患者早期无明显症状，多数患者在诊断时已为晚期，无法手术切除，对于该部分患者，标准一线治疗为吉西他滨联合顺铂化疗，然而该方案仅能为患者提供极小的生存获益。近年来，随着高通量测序技术的飞速发展，已发现一些在icca发生发展中的关键致癌基因，如突变的idh1、idh2、arid1a，和基因融合突变的fgfr2等。然而在临床试验中，单独使用靶向这些致癌基因或致癌信号通路的抑制剂或将其与icca系统化疗联合使用，结果却不尽如人意，并未显著延长患者生存时间。

2、基于此，亟需筛选在icca发生发展中关键的致癌基因以及其在icca中作为潜在药物靶点的可能性。

技术实现思路

1、为了解决现有技术中存在的问题，本公开的目的在于提供一种lamc2拮抗剂在癌症诊断和治疗中的用途。

2、为了实现上述目的，本公开采用以下具体方案：

3、在一方面，本公开提供了一种lamc2拮抗剂，其中，所述lamc2拮抗剂特异性靶向seq id no.1所示的核苷酸序列或特异性结合seq id no.2所示的氨基酸序列，并具有以下任一种功能：

4、(1)抑制lamc2基因表达；

5、(2)使lamc2基因缺失或沉默；

6、(3)敲除lamc2基因；

7、(4)拮抗lamc2蛋白。

8、在另一方面，本公开提供了一种前述lamc2拮抗剂在制备用于癌症治疗的药物或试剂盒中的用途。

9、在另一方面，本公开提供了一种前述lamc2拮抗剂在制备用于癌症恶性程度诊断的药物或试剂盒中的用途。

10、在另一方面，本公开提供了一种前述lamc2拮抗剂在制备用于癌症预后诊断的药物或试剂盒中的用途。

11、在肝脏中，icca和hcc均为发生在肝实质内的恶性肿瘤，都表现为肝内肿块病变，当通过影像学发现肝内病变肿块而影像学特征不明确，且患者为afp阴性和存在肝硬化的情况下，需要鉴别该肿瘤为afp阴性hcc、亦或icca，这也是临床诊断上的一个难题。下一步需要肝脏活检进行进一步病理诊断，而活检时因为活检组织位置的局限性、肿块大小的局限性，进一步的鉴别诊断依然存在困难。

12、当前多组学测序和揭示icca基因分子图谱的研究中，存在一定的局限性。首先是多数研究中临床队列患者数量的局限性；其次是对于icca肿瘤组织阴性对照选择的局限性，目前大部分文献选择将癌旁组织(肝脏组织)作为测序分析的阴性对照，而非icca肿瘤真正意义上的阴性对照即正常胆管组织。这些可能会在一定程度上干扰一些参与icca发生发展的重要基因或重要蛋白的发现。

13、因此发明人希望去深入比较icca与胆管细胞、同时比较icca与肝细胞和hcc，籍此筛选发现在icca中特异高表达的基因；在这些基因中进一步挖掘在icca肿瘤发生发展中发挥重要功能的驱动基因，在此基础上探索其作为潜在靶向对象的可能性。

14、lamc2的高表达与其在icca患者肿瘤组织中的基因扩增关系密切，约26％的icca患者lamc2基因存在扩增(拷贝数≥4)。功能实验表明，在两个原位icca小鼠模型中，敲减lamc2显著阻断icca肿瘤的发生和进展；在体外实验中，敲减lamc2显著抑制icca细胞的增殖能力和克隆形成能力。因此，lamc2是icca发生发展中的一个重要的致癌基因，也是一个潜在的icca治疗位点。

15、本公开至少具有以下有益效果：

16、1.申请人发现lamc2是icca发生发展中的一个重要的致癌基因，也是一个潜在的icca治疗位点。

17、2.申请人发现沉默和敲减lamc2均显著抑制icca细胞的增殖和迁移能力，并设计了一系列效果较好的sirna和shrna。

18、3.申请人发现敲减lamc2显著抑制小鼠icca肿瘤的恶性程度。

19、4.申请人发现lamc2可用于癌症患者的预后预测，其中，高表达lamc2的icca患者预后更差，总体生存期更短。

技术特征：

1.一种lamc2拮抗剂，其中，所述lamc2拮抗剂特异性靶向seq id no.1所示的核苷酸序列或特异性结合seq id no.2所示的氨基酸序列，并具有以下任一种功能：

2.根据权利要求1所述的lamc2拮抗剂，其中，所述lamc2拮抗剂选自shrna、sirna、mirna、dsrna、strna、小分子化合物、适配体、或抗体或其抗原结合片段；

3.根据权利要求1或2所述的lamc2拮抗剂，其中，lamc2拮抗剂为sirna，所述sirna包含正义链和反义链，其长度为15-30个碱基对，反义链包含与编码lamc2的mrna互补的互补区域；

4.根据权利要求3所述的lamc2拮抗剂，其中，所述正义链和反义链进一步被修饰，所述修饰选自：2’-甲氧基乙基修饰、2'-甲氧基修饰、2'-脱氧-2'-氟修饰、硫代磷酸酯基修饰、腺苷-2’磷酸修饰、尿苷-2’磷酸修饰、鸟苷-2’磷酸修饰、鸟苷-二醇核酸修饰、腺苷-二醇核酸修饰、n-(2,3-二羟基丙基)-3,5-二(三氟甲基)苯甲酰胺修饰或5’-磷酸酯模拟物修饰中的一种或多种。

5.根据权利要求1或2所述的lamc2拮抗剂，其中，lamc2拮抗剂为shrna，其核苷酸序列选自下述正义链和反义链的组合：

6.根据权利要求1-5任一项所述的lamc2拮抗剂，其中，所述lamc2拮抗剂可以抑制肿瘤细胞的增殖和迁移。

7.权利要求1-5任一项所述的lamc2拮抗剂在制备用于癌症治疗的药物或试剂盒中的用途。

8.权利要求1-5任一项所述的lamc2拮抗剂在制备用于癌症恶性程度诊断的药物或试剂盒中的用途。

9.权利要求1-5任一项所述的lamc2拮抗剂在制备用于癌症预后诊断的药物或试剂盒中的用途。

10.根据权利要求7-9任一项所述的用途，其中，所述癌症为脑星形胶质母细胞瘤、咽头癌、肾上腺肿瘤、aids-相关癌症、星形细胞瘤、膀胱癌、骨癌、脑和脊髓癌、乳腺癌、颈动脉体瘤、宫颈癌、脊索瘤、肾癌、透明细胞癌、结肠癌、结肠直肠癌、肝内胆管细胞癌、室管膜细胞瘤、尤文肿瘤、骨纤维发育不全、骨纤维性发育不良、胆囊或胆管癌、胃癌、恶性畸胎癌、卵巢胚胎性肿瘤，病毒性肝炎、肝硬化妊娠滋养细胞病、生殖细胞瘤、头颈癌、胰岛细胞瘤、白血病、肝细胞癌、肝内胆管细胞癌、淋巴瘤、肺癌、成神经管细胞瘤、胆道细胞癌、脑膜瘤、多发性内分泌瘤病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、成神经细胞瘤、神经内分泌肿瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳头状甲状腺癌、甲状旁腺瘤、外周神经鞘瘤、垂体肿瘤、前列腺癌、黑色素瘤、横纹肌样瘤、皮肤癌、鳞状细胞癌、睾丸癌、胸腺癌、甲状腺转移性癌或子宫癌细胞中的一种或多种；

技术总结本公开涉及LAMC2拮抗剂在癌症诊断和治疗中的用途。具体地，本公开涉及一种LAMC2拮抗剂，其中，所述LAMC2拮抗剂特异性靶向SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或特异性结合SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，并具有以下任一种功能：(1)抑制LAMC2基因表达；(2)使LAMC2基因缺失或沉默；(3)敲除LAMC2基因；(4)拮抗LAMC2蛋白。本公开的LAMC2作为iCCA发生发展中的一个重要的致癌驱动基因，为iCCA治疗提供了重要理论基础和潜在的治疗靶点。本公开提供的siRNA和shRNA均能有效降低LAMC2表达，并显著抑制细胞的增殖能力、克隆形成能力和迁移能力，同时抑制小鼠iCCA肿瘤的恶性程度。技术研发人员：姬峻芳,张剑娟受保护的技术使用者：浙江大学技术研发日：技术公布日：2024/6/18