一株解淀粉芽孢杆菌、促生防病菌剂和应用

本发明属于微生物，具体涉及一株解淀粉芽孢杆菌、促生防病菌剂和应用。

背景技术：

1、葡萄种植过程中的高发病害诸如葡萄白腐病、灰霉病、黑曲病、霜霉病和酸腐病等，严重影响了葡萄的生长，降低了葡萄的产量。例如白腐病，白腐病又称“冰雹病”，是我国葡萄生产中重要的果实病害之一，在我国各葡萄产区均有发生，该病每年造成葡萄果实产量减少20～30％。葡萄白腐病的防控措施主要包括选育抗性品种、农田生态控制、物理防治、化学防治和生物防治等，其中化学防治是目前主要的防治方法。据统计，近五年我国批准登记防治葡萄白腐病的杀菌剂共86个，主要成分是福美双、代森锰锌，其次是嘧菌酯、戊唑醇等，均为化学药剂，并未出现微生物成分制剂。在绿色农业的发展前景下，兼顾环境友好和可持续抑制病原菌的生物防治技术成为植保领域的研究热点。如现有技术cn103243044a-一种解淀粉芽孢杆菌及其应用公开了解淀粉芽孢杆菌yj01对酿酒葡萄灰霉病病原菌具有抑制作用；再如现有技术cn106520607a-一株解淀粉芽孢杆菌及其在抑制葡萄霜霉病菌中的应用中公开了解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)对葡萄霜霉病菌具有抑制作用；再如现有技术cn115873760a-一株解淀粉芽孢杆菌及其生防菌剂和应用中公开了解淀粉芽孢杆菌qbb1对葡萄蔓枯病、葡萄白绢病、葡萄灰霉病、葡萄白腐病和葡萄炭疽病具有防治效果。因此，挖掘绿色高效防治葡萄病害的微生物资源具有重要意义，利用微生态制剂防治葡萄白腐病及其他病害具有广阔的开发前景。但是现有技术中缺乏同时具有促生和防治多种病害的解淀粉芽孢杆菌的报道。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一株解淀粉芽孢杆菌、促生防病菌剂和应用，本发明提供的解淀粉芽孢杆菌p20具有显著的防病促生效果。

2、为了解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：

3、本发明提供了一株解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)p20，保藏编号为cgmcc no.28999。

4、本发明提供了一种促生防病菌剂，包括上述技术方案所述的解淀粉芽孢杆菌p20。

5、优选的，所述促生防病菌剂中解淀粉芽孢杆菌p20的有效活菌数为≥1×107cfu/g。

6、优选的，所述解淀粉芽孢杆菌p20的应用形式包括发酵液。

7、本发明提供了一种培养液的制备方法，所述培养液的制备方法包括：解淀粉芽孢杆菌p20接种在培养基中进行第一培养得到种子液，所述种子液接种于培养基中进行第二培养得到培养液；所述第一培养的温度为28℃～37℃，所述第一培养的时间为12～18h；所述第二培养的温度为28℃～37℃，所述第二培养的时间为12h～36h。

8、本发明提供了一种代谢液的制备方法，上述技术方案所述培养液离心得到上清液，过滤所述上清液得到代谢液。

9、本发明提供了一种细胞悬液的制备方法，上述技术方案所述培养液离心得到菌体，洗涤所述菌体后重悬得到细胞悬液。

10、本发明提供了上述技术方案所述解淀粉芽孢杆菌p20或上述技术方案所述促生防病菌剂在防治植物病害和/或促生中的应用。

11、优选的，所述植物包括葡萄；所述病害包括白腐病、灰霉病和黑曲病中的一种或多种；

12、所述白腐病的病原菌包括葡萄白腐病菌(coniella diplodiella)，所述灰霉病的病原菌包括贵腐霉菌(botrytis cinerea)、黑曲病的病原菌包括塔宾曲霉菌(aspergillustubingensis)。

13、优选的，所述促生包括提高果实百粒重和/或果粒横径。

14、本发明的有益效果：本发明提供一株解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)p20，保藏编号为cgmcc no.28999。本发明提供的解淀粉芽孢杆菌p20菌能够防治葡萄白腐病、灰霉病、黑曲病、霜霉病和酸腐病等多种病害，同时具有促生作用。实施例结果表明：在田间试验中，菌株p20对葡萄白腐病的田间防效可达60％以上，对灰霉病的田间防效可达60％以上，对黑曲病的田间防效可达80％以上、对霜霉病的田间防效可达70％以上和对酸腐病的田间防效可达70％，同时该菌株具有促生效果，能够显著提高果实百粒重，公主白葡萄的果粒重可达(193.20±5.60)g，相比于对照组提高19.7％；公主红葡萄的果实百粒重可达(655.31±37.40)g，相比于对照组提高36.8％。

15、生物保藏说明

16、解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)p20，于2023年11月14日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.28999，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

技术特征：

1.一株解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)p20，保藏编号为cgmccno.28999。

2.一种促生防病菌剂，其特征在于，包括权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌p20。

3.根据权利要求2所述促生防病菌剂，其特征在于，所述促生防病菌剂中解淀粉芽孢杆菌p20的有效活菌数为≥1×107cfu/g。

4.根据权利要求2或3所述促生防病菌剂，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌p20的应用形式包括发酵液。

5.一种培养液的制备方法，其特征在于，所述培养液的制备方法包括：解淀粉芽孢杆菌p20接种在培养基中进行第一培养得到种子液，所述种子液接种于培养基中进行第二培养得到培养液；所述第一培养的温度为28℃～37℃，所述第一培养的时间为12～18h；所述第二培养的温度为28℃～37℃，所述第二培养的时间为12h～36h。

6.一种代谢液的制备方法，其特征在于，将权利要求5所述培养液离心得到上清液，过滤所述上清液得到代谢液。

7.一种细胞悬液的制备方法，其特征在于，将权利要求5所述培养液离心得到菌体，洗涤所述菌体后重悬得到细胞悬液。

8.权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌p20或权利要求2～4任一项所述促生防病菌剂在防治植物病害和/或促生中的应用。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述植物包括葡萄；所述病害包括白腐病、灰霉病和黑曲病中的一种或多种；

10.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述促生包括提高果实百粒重和/或果粒横径。

技术总结本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株解淀粉芽孢杆菌、促生防病菌剂和应用。本发明提供一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)P20，保藏编号为CGMCC No.28999，本发明提供的解淀粉芽孢杆菌P20菌能够防治葡萄白腐病、灰霉病、黑曲病、霜霉病和酸腐病等多种病害，同时具有促生作用。实施例结果表明：在田间试验中，菌株P20对葡萄白腐病的田间防效可达60％以上，对灰霉病的田间防效可达60％以上，对黑曲病的田间防效可达80％以上，对霜霉病的田间防效可达70％以上和对酸腐病的田间防效可达70％，同时该菌株具有促生效果，能够显著提高果实百粒重。技术研发人员：王琦,刘紫依,王震铄,李燕受保护的技术使用者：中国农业大学技术研发日：技术公布日：2024/6/18