一种海藻碘产品中L-岩藻糖的检测方法与流程

本发明属于糖类检测，具体涉及一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法。

背景技术：

1、岩藻糖是一种水溶性食物纤维，取自褐藻细胞独有的黏滑成分，是一种以“硫酸基”为主的多糖体，其具有抗氧化、抗癌和增强免疫能力等功能。海藻碘产品中除了含有有机碘外，还含有硫酸多糖类、岩藻多糖类、褐藻氨酸、褐藻糖胶等，可满足人体对碘的需求，还具有抗癌作用。

2、目前对l-岩藻糖的检测多为比色法，其原理是在浓硫酸存在下，岩藻糖与盐酸半胱氨酸反应生成浅黄色化合物，其在396nm有最大吸收，在427nm处无吸收，其他干扰性中性己糖的生成物在396nm和427nm两波长吸收相等，从而利用396nm和427nm两波长吸光度差值来获得l-岩藻糖的含量。

3、但在实际工作中，采用比色法对海藻碘样品进行测试时，发现岩藻糖衍生物在427nm处仍有紫外吸收，造成标准曲线绘制困难，影响检测效果，导致无法精确获得l-岩藻糖的含量，因此，需要一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，来解决以上问题。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法。

2、一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，包括以下步骤：

3、s1：配置岩藻糖系列标准工作液

4、准确量取适量岩藻糖标准溶液，按需要用水稀释成相应浓度的系列标准工作液；

5、s2：海藻碘产品前处理

6、精密称取1.0000g海藻碘产品，置于水解管中，加入1ml酸溶液，混匀后充入氮气封盖，进行水解，取出后冷却至室温，得海藻碘样品溶液，待上机检测；

7、s3：离子色谱分析

8、设置色谱分析条件，对岩藻糖系列标准工作液和海藻碘样品溶液进行离子色谱-脉冲安培法分析；

9、s4：绘制标准工作曲线

10、将s1中配置的岩藻糖系列标准工作液按照s3给出的离子色谱分析条件及梯度洗脱程序使用离子色谱仪进行检测，以岩藻糖系列标准工作液的质量浓度为横坐标，以岩藻糖系列标准工作液的峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，外标法定量；

11、s5：海藻碘样品溶液的检测

12、将s2所得的海藻碘样品溶液按s3给出的及使用离子色谱仪进行检测，并计算结果；

13、s6：结果计算

14、通过s4岩藻糖系列标准工作液所测得的结果来校正s5所测得计算结果，从而计算出所测海藻碘产品中l-岩藻糖的含量。

15、进一步地，所述酸溶液为三氟乙酸溶液。

16、进一步地，所述三氟乙酸溶液浓度为4mol/l。

17、进一步地，所述水解条件为于110℃电热恒温干燥箱中水解2h。

18、进一步地，所述酸溶液在室温中加入。

19、进一步地，所述离子交换色谱分析的色谱分析条件包括：色谱柱：dionexcarbopac pa1(250×4mm)；保护柱：dionex carbopac pa1(50×4mm)；柱温：35℃；流速：1ml/min；进样体积：25μl。

20、进一步地，所述离子交换色谱分析的色谱分析条件还包括：淋洗液：溶剂a:2mmol/l氢氧化钠溶液，溶剂b：200mmol/l氢氧化钠溶液；梯度洗脱程序：0-8min时，淋洗液氢氧化钠浓度为2mmol/l；8.1-20min，淋洗液氢氧化钠浓度为200mmol/l；20.1-30min，淋洗液氢氧化钠浓度为2mmol/l；详见表1。

21、表1离子色谱梯度洗脱程序

22、 运行时间，min a，％ b，％ 0 100 0 8 100 0 8.1 0 100 20 0 100 20.1 100 0 30 100 0

23、进一步地，所述离子交换色谱分析的色谱分析条件还包括：检测器：电化学检测器，脉冲安培检测模式，详见表2；工作电极：1mm金电极；参比电极：ag/agcl参比电极。

24、表2检测器波形设置

25、

26、

27、进一步地，所述离子交换色谱分析的色谱分析条件还包括：通入氮气保护淋洗液。

28、进一步地，所述标准工作曲线的浓度范围为0.2-20μg/ml。

29、本发明达到的有益效果为：1、本发明采用三氟乙酸溶液水解海藻碘产品中的岩藻多糖，能够将l-岩藻糖充分释放出来，并使用离子色谱分析法，通过筛选最佳色谱分析条件，并选用dionex carbopac pa1色谱柱，能够避免其他糖醇的色谱干扰，提高检测的准确性和精密度，从而精确获得l-岩藻糖的含量。

30、2、本发明通过建立多种糖醇的离子色谱分析检测，研究发现选用dionexcarbopac pa1色谱柱，可将l-岩藻糖和其他糖类完全分离。

31、3、本发明通过深入研究水解条件，得出最优水解酸试剂和水解实验条件，提高对海藻碘产品中l-岩藻糖的检测效率。

32、4、本发明检测方法操作简便快速、灵敏准确，海藻碘产品经过简单前处理，即可上机检测，l-岩藻糖色谱图在30min内即可完全出峰。

33、5、本发明检测方法使用的溶剂、试剂和原料来源易得，且对人体和环境无毒害作用，符合绿色环保的要求。

技术特征：

1.一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述酸溶液为三氟乙酸溶液。

3.根据权利要求2所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述三氟乙酸溶液浓度为4mol/l。

4.根据权利要求1所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述水解条件为于110℃电热恒温干燥箱中水解2h。

5.根据权利要求1所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述酸溶液在室温中加入。

6.根据权利要求1所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述离子交换色谱分析的色谱分析条件包括：色谱柱：dionex carbopacpa1(250×4mm)；保护柱：dionex carbopac pa1(50×4mm)；柱温：35℃；

7.根据权利要求6所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述离子交换色谱分析的色谱分析条件还包括：淋洗液：溶剂a:2mmol/l氢氧化钠溶液，溶剂b：200mmol/l氢氧化钠溶液；梯度洗脱程序：0-8min时，淋洗液氢氧化钠浓度为2mmol/l；8.1-20min，淋洗液氢氧化钠浓度为200mmol/l；20.1-30min，淋洗液氢氧化钠浓度为2mmol/l。

8.根据权利要求7所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述离子交换色谱分析的色谱分析条件还包括：检测器：电化学检测器，脉冲安培检测模式；工作电极：1mm金电极；参比电极：ag/agcl参比电极。

9.根据权利要求7所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述离子交换色谱分析的色谱分析条件还包括：通入氮气保护淋洗液。

10.根据权利要求1所述的一种海藻碘产品中l-岩藻糖的检测方法，其特征在于，所述标准工作曲线的浓度范围为0.2-20μg/ml。

技术总结本发明属于糖类检测技术领域，具体涉及一种海藻碘产品中L‑岩藻糖的检测方法。一种海藻碘产品中L‑岩藻糖的检测方法，包括以下步骤：配置岩藻糖系列标准工作液；海藻碘产品前处理；离子色谱分析；绘制标准工作曲线；海藻碘样品溶液的检测；结果计算。本发明采用三氟乙酸溶液水解海藻碘产品中的岩藻多糖，能够将L‑岩藻糖充分释放出来，并使用离子色谱分析法，通过筛选最佳色谱分析条件，并选用Dionex CarboPac PA1色谱柱，能够避免其他糖醇的色谱干扰，提高检测的准确性和精密度，从而精确测得L‑岩藻糖的含量。技术研发人员：章骅,马兴,俞子萱,张敏,陈旭艳,刘旸,常春艳,杨菲,王飞,崔颖受保护的技术使用者：天津海关动植物与食品检测中心技术研发日：技术公布日：2024/7/25