西松烷型大环二萜衍生物及其制备方法和应用

本发明属于医药，涉及西松烷型大环二萜衍生物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、西松烷二萜是一类结构新颖、特殊且具有重要生物活性的十四元环母核的天然产物，按结构可分类为异丙基型、内酯环型、环醚、开环型以及降碳型，最早发现于松属植物和烟草中，随着海洋生物的研究，发现其中含有大量西松烷二萜衍生物。该类化合物具有显著的药理活性，包括抗肿瘤、抗炎、抗菌及抗疟原虫等，是二萜研究领域备受关注的一类特征结构。其中，4r-cembranoid(1s,2e,4r,6r,7e,11e)-cembra-2,7,11-triene-4,6-diol)为从烟草叶中分离出来的具有神经保护和抗尼古丁成瘾特性的典型天然大环二萜，因此，4r-cembranoid作为神经退行性疾病和戒烟治疗中的候选药物引起了相关研究人员的高度重视。

2、神经退行性疾病是中枢神经系统或周围神经系统神经元进行性丢失的一种神经系统疾病，包括病理性蛋白聚集、突触和神经元网络功能障碍、蛋白稳态异常、细胞骨架异常、能量代谢改变、dna和rna缺陷、炎症等病理特征，导致阿尔茨海默病(ad)、帕金森病(pd)、原发性tau蛋白病等疾病，严重影响着人们的生活质量。脑部的初期损伤、创伤或遗传缺陷都会导致炎症信号转导。大脑的常驻型免疫细胞(星形胶质细胞和小胶质细胞)会启动tnf-α、il-1β和il-6等细胞因子分泌的炎症反应。因此，调节炎症反应可以有效改善和预防神经系统病变。本发明涉及的新颖西松烷二萜从榄绿巴豆中提取分离获得，通过体内外建立lps诱导bv-2小胶质细胞炎症模型，对得到的二萜化合物进行抗炎活性评价。本发明所涉及的化合物及其抗神经炎活性测试未见专利或文献报道。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供西松烷型大环二萜衍生物、制备方法及其在制备抗神经炎药物中的应用。

2、本发明采用了一种体外和体内lps诱导bv-2细胞炎症模型，用于对西松烷二萜类化合物的抗神经炎活性评价。

3、本发明提供了如下式i-vi所示西松烷型大环二萜衍生物或其在药学上可接受的盐：

4、

5、其中，

6、式ⅰ中，a环为十四元环；

7、式ⅱ中，a环为十四元环；

8、式ⅲ中，a环为十四元环；

9、式ⅳ中，a环为十四元环，b环为呋喃环；

10、式ⅴ中，a环为十四元环，b环为呋喃环，c环为五元醚环；

11、式ⅵ中，a环为十四元环，b环为呋喃环，c环为五元醚环。

12、进一步地，所述式i中，a环存在2个孤立双键，一个烯酮共轭双键，且c-3、c-4为e构型，c-7、c-8为z构型，c-10、c-11为z构型，c-5位为羟基，c-6位为酮羰基。

13、进一步地，所述式ii中，a环存在2个孤立双键，一个烯酮共轭双键，且c-3、c-4为e构型，c-7、c-8为z构型，c-10、c-11为z构型，c-6位为酮羰基。

14、进一步地，所述式iii中，a环存在2个孤立双键，一个烯酮共轭双键，且c-3、c-4为e构型，c-7、c-8为z构型，c-10、c-11为e构型，c-6位为酮羰基。

15、进一步地，所述式iv中，a环存在1个孤立双键，一个烯酮共轭双键，且c-3、c-4为e构型，c-12、c-13为e构型，c-5位为酮羰基。

16、进一步地，所述式v中，a环存在1个孤立双键，且c-12、c-13为e构型，c-5位为酮羰基。

17、进一步地，所述式vi中，a环存在1个孤立双键，且c-11、c-12为e构型，c-5位为酮羰基。

18、本发明提供所述西松烷型大环二萜衍生物，其名称和结构如下：

19、化合物1-6分别为化合物1：croton-cembranoida、化合物2：croton-cembranoidb、化合物3：croton-cembranoid c、化合物4：croton-cembranoid d、化合物5：croton-cembranoid e、化合物6：croton-cembranoid f；

20、

21、本发明还提供了所述的西松烷型大环二萜衍生物的制备方法，包括以下步骤：

22、(1)榄绿巴豆干燥枝叶进行粉碎，采用加热回流提取法，以乙醇或甲醇回流提取，减压回收醇溶剂，用水混悬；

23、(2)混悬液依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，分别回收溶剂和水，分别得到石油醚层浸膏、二氯甲烷层浸膏、乙酸乙酯层浸膏、正丁醇层浸膏和水层浸膏；

24、(3)对步骤(2)得到的石油醚层浸膏经硅胶柱色谱进行分离洗脱；

25、(4)对步骤(3)得到的含有西松烷型大环二萜衍生物类成分的流份再次经硅胶色谱分离或ods柱色谱分离后，再对含有西松烷型大环二萜衍生物类成分的流份采用制备型或半制备型hplc色谱分离，以甲醇-水或乙腈-水为流动相进行洗脱，得到西松烷二萜化合物；

26、进一步的，所述步骤(1)中，乙醇或甲醇的量为榄绿巴豆干燥枝叶质量的3～15倍；所述的乙醇或甲醇为体积浓度为30％～100％的乙醇或甲醇。

27、进一步的，所述步骤(2)中，萃取次数为1～5次，萃取溶剂与混悬液体积比(1:1)～(2:1)。

28、进一步的，所述步骤(3)中，当采用的硅胶色谱为硅胶柱时，采用的洗脱条件为石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇中的一种或二种混合溶剂，具体包括，按体积比，石油醚：乙酸乙酯＝(100:1)～(1:1)、二氯甲烷：甲醇＝(100:0)～(15:1)；当采用的硅胶色谱为gf254硅胶板时，采用洗脱条件为，按体积比，石油醚：乙酸乙酯＝(100:1)～(1:1)；

29、更进一步的，所述步骤(3)中，当采用的硅胶色谱为gf254硅胶板时，采用的洗脱条件优选为，按体积比，石油醚：乙酸乙酯＝100:1、石油醚：乙酸乙酯＝20:1、石油醚：乙酸乙酯＝4:1、石油醚：乙酸乙酯＝3:1、石油醚：乙酸乙酯＝2:1和石油醚：乙酸乙酯＝1:1。

30、进一步的，所述步骤(4)中，制备型或半制备型hplc制备西松烷型大环二萜衍生物的体系具体为：流动相为，按体积比，甲醇：水＝(1:4)～(9:1)或乙腈：水＝(1:5)～(4:1)，优选为甲醇：水＝(1:4)～(9:1)。

31、本发明采用谱学手段对所述步骤(2)中得到的浸膏中所含有的活性成分进行分离。通过考察浸膏对lps诱导的bv-2小胶质细胞一氧化氮(no)产生的抑制作用结果可见，其活性组分主要集中在石油醚层浸膏中，结合10％硫酸乙醇显淡黄色，证实其活性物质为萜类衍生物，根据发色团和助色团的变化，其紫外全波长扫描表现出一定的规律性和特征性，实现了活性二萜的追踪分离。

32、从榄绿巴豆枝叶中分离得到的为具有共轭特征的西松烷二萜骨架，存在烯酮共轭时，紫外吸收主要特征为存在245nm左右的吸收；存在呋喃环时，紫外吸收主要特征为存在280-300nm左右的吸收。据此，可对其中所含西松烷型大环二萜衍生物进行追踪。

33、本发明提供所述西松烷型大环二萜衍生物或其药学中科接受的盐在制备治疗神经炎症相关的神经退行性疾病药物中的应用。

34、本发明提供了一种药物组合物，包含所述西松烷型大环二萜衍生物或其药学上可接受的盐中的一种或几种和药学上可接受的载体或赋形剂。

35、本发明提供所述药物组合物在制备治疗神经炎症相关的神经退行性疾病药物中的应用。

36、本发明的有益效果：

37、本发明首次从榄绿巴豆干燥枝叶提取了所述西松烷型大环二萜衍生物，并通过采用硅胶柱色谱、ods柱色谱以及高效液相色谱(hplc)等分离方法，结合核磁共振波谱等多种谱学技术，确定所述西松烷型大环二萜衍生物的结构。本发明方法制备所得西松烷型大环二萜衍生物能够抑制lps诱导的bv-2细胞no的释放，其在制备抗神经炎药物方面有很大的应用前景。