一种具有固发功效的药物组合物及其制备方法和其应用与流程

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种具有固发功效的药物组合物及其制备方法和其应用。

背景技术：

1、

2、

3、

4、

5、

6、

7、防治脱发的主要方法包括洗疗护理、药物治疗、激光生发、植发等。洗疗护理主要以生发液或生发剂等外用产品刺激头皮并促进头皮血液循环，促进头部供血、头部营养和头发生长，但存在生发及防脱发不佳，且对受损毛囊、休眠毛囊效果不佳或无效等缺陷。药物治疗包括口服药物(如非那雄胺、螺内酯、vb2、vb6、丹参酮胶囊、复方甘草酸苷片、白芍总苷胶囊等)和外用药物(如米诺地尔溶液、哈西奈德溶液、二硫化硒洗剂等)，仍存在治疗脱发效果不佳、副作用较大、药物依赖性等缺陷。

8、激光生发利用波长为670nm的低能量激光照射，增强细胞活性、加速血液微循环、增加头部供血及营养等，促进头发汲取营养成分，提高毛母细胞及毛囊干细胞活力，加速蛋白质的合成、激活毛囊等功效，但存在生发缓慢且价格昂贵等缺陷。植发需要手术选取患者后枕部及两颞部毛囊作为发源，将采集的毛囊分离成单株毛囊或多株毛囊后，再通过精细的显微外科手术把单株毛囊或多株毛囊移植到需要移植的脱发部位，使得新移植的单株毛囊或多株毛囊在新的植发部位存活和生长，进而修补局部毛发的分布及分布密度。植发技术可解决毛囊完全闭合导致头发无法生长的问题，但其存在新移植毛囊存活率不足、无法解决受损毛囊修复问题、手术痛苦和手术感染风险而导致患者依从性差、移植手术部位留下疤痕而影响美观、价格昂贵、受可移植部位及毛囊资源有限的限制等缺陷。

9、细胞及微生物受到外界刺激及外源应激物(包括冷、热、酸、碱、电流、辐射、化学物质等)应激诱导时会因应激反应而诱导细胞及微生物产生应激蛋白。为此，急需研发效果更佳、疗效确切、安全有效的药物组合物。

10、cn 2023100429139、pct/cn2023/073566、cn202310042911x、pct/cn2023/073590所公开的技术内容作为本发明必不可少的组成部分。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种具有固发功效的药物组合物，以重量百分比计，组合物中含有的毛囊修复蛋白组合物为0.1-10％、神经酰胺为0.001-10％、咖啡因为0.0001-10％、中药提取物为0.01-10％和药学上可接受的载体，其中，所述中药提取物选自当归提取物、燕麦仁提取物、野大豆胚芽提取物、黄芩提取物、姜根提取物、丹参提取物中的任一种或其组合。

2、本发明的优选技术方案，所述毛囊修复蛋白组合物的制备包括如下步骤：

3、(1)在本发明的细胞蛋白提取物中加入20u/ml-35u/ml的核酸酶或全能核酸酶的任一种或其组合，将其置于37℃±1℃条件下酶解15min-40min，制得酶解液；

4、(2)在2℃-8℃条件下，将步骤(1)制得的酶解液用洗脱溶剂配置成5-15mg/ml，过色谱柱，洗脱流速为0.1-1ml/min，监测并收集紫外波长为280nm的洗脱部位，其中，洗脱溶剂由50mmo l/l磷酸盐缓冲液(ph6.8)中含300mmo l/l氯化钠组成。

5、本发明的优选技术方案中，所述细胞蛋白提取物的制备包括如下步骤：

6、s-1:将密度为5.0×106个/ml-1.0×107个/ml的间充质传代细胞置于含有dmem/f12 40-50％、rpmi 1640 40-50％、牛血清蛋白(bsa)0.1-2％、表皮细胞生长因子(egf)1-15ug/ml、成纤维细胞生长因子(fgf)1-15ug/ml、胰岛素转铁蛋白1-15ug/ml、复方氨基酸(18aa)0.01-0.1％和2-10μmo l/l应激物的培养基中，再将其置于37.0℃±0.5℃、5％±1.0％co2条件下培养10-60min后，分离，洗涤，收集细胞，其中，所述的应激物选自化合物1-16的任一种或其组合，

7、

8、

9、s-2:将收集细胞按照密度为5.0×106个/ml-5.0×107个/ml分散于溶剂中，再将其置于2℃-8℃条件下超声处理，制得细胞裂解液，其中，所述溶剂选自选自生理盐水、5％葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液(pbs)、tbps缓冲液、tbst缓冲液、tr i s缓冲液的任一种或其组合；

10、s-3:将步骤s-2制得的细胞裂解液分离后，所得的分离液依次经0.45um、0.22um滤膜过滤，即得。

11、本发明的优选技术方案中，步骤s-1的培养基中含有dmem/f12 42-45％、rpmi164042-45％、牛血清蛋白(bsa)0.5-1.5％、表皮细胞生长因子(egf)5-10ug/ml、成纤维细胞生长因子(fgf)5-10ug/ml、胰岛素转铁蛋白5-10ug/ml、复方氨基酸(18aa)0.02-0.05％和3-8μmo l/l的应激物。

12、本发明的优选技术方案中，步骤s-1的培养基中含有dmem/f12 45％、rpmi164045％、牛血清蛋白(bsa)0.5％、表皮细胞生长因子(egf)10ug/ml、成纤维细胞生长因子(fgf)10ug/ml，胰岛素转铁蛋白10ug/ml、复方氨基酸(18aa)0.05％和4-6μmo l/l的应激物。

13、本发明的优选技术方案中，步骤s-1的间充质传代细胞密度为6.0×106-2.0×107个/ml，优选为8.0×106-1.0×107个/ml。

14、本发明的优选技术方案中，步骤s-1的间充质传代细胞在培养基中培养15-50min，优选为20-40min。

15、本发明的优选技术方案中，步骤s-1中洗涤细胞的溶剂选自生理盐水、5％葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液(pbs)、tbps缓冲液、tbst缓冲液、tr i s缓冲液的任一种或其组合,洗涤细胞次数为2-5次，优选为3-4次。

16、本发明的优选技术方案中，步骤s-1所述的分离选自离心、过滤的任一种或其组合。

17、本发明的优选技术方案中，步骤s-1中的离心条件为1000-2000rpm*3-15min，优选为1200rpm-1500rpm*5-10min。

18、本发明的优选技术方案中，步骤s-2的超声条件为：在2℃-8℃、25khz、360w条件下工作3s再间隙1s，超声处理1-5min。

19、本发明的优选技术方案中，步骤s-3所述分离选自离心、多级离心、多级过滤的任一种或其组合。

20、本发明的优选技术方案中，步骤s-3中的离心条件为2000-8000rpm*10-30min，优选为3000-7000rpm*15-25min。

21、本发明的优选技术方案中，步骤s-3的多级离心依次为3000-4000rpm*3-5min、5000-6000rpm*3-5min和7000rpm*5-8min。

22、本发明的优选技术方案中，所述多级过滤的滤膜孔径选自80um、50um、30um、10um、5um的任一种。

23、本发明的优选技术方案中，将步骤s-3制得的细胞蛋白提取物采用核酸酶或全能核酸酶的任一种酶解后再分离纯化。

24、本发明的优选技术方案中，所述核酸酶选自rna核酸酶、dna核酸酶的任一种或其组合。

25、本发明的优选技术方案中，所述毛囊修复蛋白组合物的分子量为20kda-300kda，优选为50kda-200kda。

26、本发明的优选技术方案中，将步骤s-3制得的细胞蛋白提取物或步骤(2)制得的蛋白组合物冻存，优选冻存于-40℃至-20℃。

27、本发明的优选技术方案中，在步骤s-3制得的细胞蛋白提取物或步骤(2)制得的蛋白组合物中加入冻干保护剂，冻干，制得细胞蛋白提取物冻干制剂或蛋白组合物冻干制剂，其中，所述冻干保护剂选自甘露醇、山梨糖醇、右旋糖酐、甘油、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、葡聚糖、三辛酸甘油酯(hes)、聚乙二醇、乙烯乙二烯、磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、山梨醇、淀粉中的任一种或其组合。

28、本发明的优选技术方案中，以质量百分比计，所述细胞蛋白提取物冻干制剂或蛋白组合物冻干制剂中含有的冻干保护剂为0.5-8％，优选为1-5％。

29、本发明的优选技术方案中，在步骤s-3制得的细胞蛋白提取物或步骤(2)制得的蛋白组合物中任选地加入蛋白稳定剂，其中，所述蛋白稳定剂选自白蛋白、锌盐、铝盐的任一种。

30、本发明的优选技术方案，所述细胞蛋白提取物冻干制剂或蛋白组合物冻干制剂ph6-8，优选为ph7-7.5。

31、本发明的优选技术方案中，所述药物组合物临用前用等渗溶液或缓冲溶液复溶后，涂抹至头皮上，采用滚针、微针、按摩的任一种或其组合方式至吸收，其中，所述的等渗溶液或缓冲溶液选自生理盐水、5％葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液(pbs)、tbps缓冲液、tbst缓冲液、tr i s(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、巴比妥酸盐缓冲液的任一种或其组合。

32、本发明的优选技术方案中，所述原代间充质干细胞的培养为本领域的培养方法。

33、本发明的优选技术方案中，所述间充质传代干细胞的培养包括下述步骤：将原代间充质干细胞按照初始密度为5.0×105-5.0×106个/ml加入到传代培养基中，再将其置于37.0℃±0.5℃、5％±1.0％co2条件下培养10-15天，每隔2-3天，观察传代培养基变黄后，半量更换传代培养基，其中，所述传代培养基含有10％fbs、100u/ml青霉素和100ug/ml链霉素的dmem/f12培养基。

34、本发明的优选技术方案中，所述原代间充质干细胞的培养包括下述步骤：

35、a:将脐带清洗消毒后，组织解剖，取华通胶层组织，将其切成3mm3的小块，离心，清洗，收集组织块，将其置于含10％胎牛血清fbs、100ug/ml青霉素、100ug/ml链霉素的dmem/f12培养基中，再将其置于37.0℃±0.5℃、5％±1.0％co2条件下培养，每间隔2-3天半量更换培养基，培养至组织块爬出细胞；

36、b:振摇，收集低层细胞用pbs清洗后，加入0.25％的胰蛋白酶消化2min-3min，加入等体积的胰蛋白酶终止液停止消化，吸管轻轻吹打，1200-1500rpm/min*5-8min离心后，收集细胞，即得。

37、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物中含有的毛囊修复蛋白组合物0.2-8％，优选为0.3-5％。

38、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物中含有的神经酰胺为0.001-5％，优选为0.001-1％。

39、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物中含有的咖啡因0.0001-5％，优选为0.0001-1％。

40、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物中含有的中药提取物0.01-5％，优选为0.01-1％。

41、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.2-8％、咖啡因0.0001-5％、神经酰胺0.001-5％、当归提取物0.05-0.1％、燕麦仁提取物0.005-0.1％、野大豆胚芽提取物0.0001-0.1％、黄芩提取物0.0001-0.1％和姜根提取物0.0001-0.1％。

42、本发明的优选技术方案，所述组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.47％、咖啡因0.0012％、神经酰胺0.00075％、当归提取物0.05％、燕麦仁提取物0.005％、野大豆胚芽提取物0.0001％、黄芩提取物0.0001％和姜根提取物0.0001％。

43、本发明的优选技术方案，所述组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.413％、咖啡因0.4％、神经酰胺0.3％、当归提取物0.05％、燕麦仁提取物0.1％、野大豆胚芽提取物0.1％、黄芩提取物0.1％和姜根提取物0.05％。

44、本发明的优选技术方案，所述药学上可接受的载体选自保湿剂、增稠剂、抗氧化剂、防腐剂、ph调节剂、表面活性剂中的任一种或其组合。

45、本发明的优选技术方案，所述保湿剂选自丙二醇、丁二醇、甘油、1,2-己二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油、peg-40氢化蓖麻油、1,2-戊二醇、葡萄糖、硫酸镁、甘氨酸、植物鞘氨醇中的任一种或其组合。

46、本发明的优选技术方案，组合物中的保湿剂为1-15％，优选为5-10％。

47、本发明的优选技术方案，所述增稠剂选自黄原胶、卡波姆、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵中的任一种或其组合。

48、本发明的优选技术方案，组合物中的增稠剂0.1-10％,优选为0.2-8％，更优选为0.3-5％。

49、本发明的优选技术方案，所述抗氧化剂选自馨鲜酮、对羟基苯乙酮、维生素c中的任一种或其组合。

50、本发明的优选技术方案，组合物中含有的抗氧化剂0.1-10％,优选为0.2-8％。

51、本发明的优选技术方案，所述防腐剂选自苯氧乙醇、山梨酸钾中的任一种或其组合。

52、本发明的优选技术方案，组合物中的防腐剂0.1-10％,优选为0.2-8％，更优选为0.3-5％。

53、本发明的优选技术方案，所述ph调节剂选自氢氧化钠、乳酸、盐酸、碳酸钠、碳酸氢钠中的任一种或其组合。

54、本发明的优选技术方案，所述表面活性剂选自pca钠、月桂酰乳酰乳酸钠、硅氧烷三醇藻酸酯中的任一种或其组合。

55、本发明的优选技术方案，组合物中的表面活性剂0.001-1％,优选为0.01-0.1％。

56、本发明的优选技术方案，所述组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.47％、咖啡因0.0012％、神经酰胺0.00075％、当归提取物0.05％、燕麦仁提取物0.005％、野大豆胚芽提取物0.0001％、黄芩提取物0.0001％、姜根提取物0.0001％。

57、本发明的优选技术方案，所述组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.413％、咖啡因0.4％、神经酰胺0.3％、当归提取物0.05％、燕麦仁提取物0.1％、野大豆胚芽提取物0.1％、黄芩提取物0.1％、姜根提取物0.1％、丹参提取物0.05％。

58、本发明的优选技术方案，所述组合物ph7-8，优选为ph7.5-7.8。

59、本发明的另一目的在于提供一种固发药物组合物的制备方法，以重量百分比计，组合物中含有的毛囊修复蛋白组合物为0.1-10％、神经酰胺为0.001-10％、咖啡因为0.0001-10％、中药提取物为0.01-10％和药学上可接受的载体，其中，所述的中药提取物选自当归提取物、燕麦仁提取物、野大豆胚芽提取物、黄芩提取物、姜根提取物、丹参提取物中的任一种或其组合，所述组合物的制备包括下述步骤：

60、(1)组合物1的制备：将所需量的毛囊修复蛋白组合物溶解于无机盐溶液中制得；

61、(2)组合物2的制备：称取所需量的神经酰胺、咖啡因和药学上可接受的载体，将其均匀混合制得；

62、(3)组合物3的制备：称取所需量的当归提取物、燕麦仁提取物、野大豆胚芽提取物、黄芩提取物、姜根提取物和药学上可接受的载体，将其均匀混合制得；

63、(4)在搅拌条件下，将组合物1-3混合均匀后，加水定容，即得。

64、本发明的优选技术方案，所述毛囊修复蛋白组合物的制备包括如下步骤：

65、(1)在本发明的细胞蛋白提取物中加入20u/ml-35u/ml的核酸酶或全能核酸酶的任一种或其组合，将其置于37℃±1℃条件下酶解15min-40min，制得酶解液；

66、(2)在2℃-8℃条件下，将步骤(1)制得的酶解液用洗脱溶剂配置成5-15mg/ml，过色谱柱，洗脱流速为0.1-1ml/min，监测并收集紫外波长为280nm的洗脱部位，其中，洗脱溶剂由50mmo l/l磷酸盐缓冲液(ph6.8)中含300mmo l/l氯化钠组成。

67、本发明的优选技术方案中，所述细胞蛋白提取物的制备包括如下步骤：

68、s-1:将密度为5.0×106个/ml-1.0×107个/ml的间充质传代细胞置于含有dmem/f12 40-50％、rpmi 1640 40-50％、牛血清蛋白(bsa)0.1-2％、表皮细胞生长因子(egf)1-15ug/ml、成纤维细胞生长因子(fgf)1-15ug/ml、胰岛素转铁蛋白1-15ug/ml、复方氨基酸(18aa)0.01-0.1％和2-10μmo l/l应激物的培养基中，再将其置于37.0℃±0.5℃、5％±1.0％co2条件下培养10-60min后，分离，洗涤，收集细胞，其中，所述的应激物选自化合物1-16的任一种或其组合，

69、

70、

71、s-2:将收集细胞按照密度为5.0×106个/ml-5.0×107个/ml分散于溶剂中，再将其置于2℃-8℃条件下超声处理，制得细胞裂解液，其中，所述溶剂选自选自生理盐水、5％葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液(pbs)、tbps缓冲液、tbst缓冲液、tr i s缓冲液的任一种或其组合；

72、s-3:将步骤s-2制得的细胞裂解液分离后，所得的分离液依次经0.45um、0.22um滤膜过滤，即得。

73、本发明的优选技术方案中，步骤s-1的培养基中含有dmem/f12 42-45％、rpmi164042-45％、牛血清蛋白(bsa)0.5-1.5％、表皮细胞生长因子(egf)5-10ug/ml、成纤维细胞生长因子(fgf)5-10ug/ml、胰岛素转铁蛋白5-10ug/ml、复方氨基酸(18aa)0.02-0.05％和3-8μmo l/l的应激物。

74、本发明的优选技术方案中，步骤s-1的培养基中含有dmem/f12 45％、rpmi164045％、牛血清蛋白(bsa)0.5％、表皮细胞生长因子(egf)10ug/ml、成纤维细胞生长因子(fgf)10ug/ml，胰岛素转铁蛋白10ug/ml、复方氨基酸(18aa)0.05％和4-6μmo l/l的应激物。

75、本发明的优选技术方案中，步骤s-1的间充质传代细胞密度为6.0×106-2.0×107个/ml，优选为8.0×106-1.0×107个/ml。

76、本发明的优选技术方案中，步骤s-1的间充质传代细胞在培养基中培养15-50min，优选为20-40min。

77、本发明的优选技术方案中，步骤s-1中洗涤细胞的溶剂选自生理盐水、5％葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液(pbs)、tbps缓冲液、tbst缓冲液、tr i s缓冲液的任一种或其组合,洗涤细胞次数为2-5次，优选为3-4次。

78、本发明的优选技术方案中，步骤s-1所述的分离选自离心、过滤的任一种或其组合。

79、本发明的优选技术方案中，步骤s-1中的离心条件为1000-2000rpm*3-15min，优选为1200rpm-1500rpm*5-10min。

80、本发明的优选技术方案中，步骤s-2的超声条件为：在2℃-8℃、25khz、360w条件下工作3s再间隙1s，超声处理1-5min。

81、本发明的优选技术方案中，步骤s-3所述分离选自离心、多级离心、多级过滤的任一种或其组合。

82、本发明的优选技术方案中，步骤s-3中的离心条件为2000-8000rpm*10-30min，优选为3000-7000rpm*15-25min。

83、本发明的优选技术方案中，步骤s-3的多级离心依次为3000-4000rpm*3-5min、5000-6000rpm*3-5min和7000rpm*5-8min。

84、本发明的优选技术方案中，所述多级过滤的滤膜孔径选自80um、50um、30um、10um、5um的任一种。

85、本发明的优选技术方案中，将步骤s-3制得的细胞蛋白提取物采用核酸酶或全能核酸酶的任一种酶解后再分离纯化。

86、本发明的优选技术方案中，所述核酸酶选自rna核酸酶、dna核酸酶的任一种或其组合。

87、本发明的优选技术方案中，所述毛囊修复蛋白组合物的分子量为20kda-300kda，优选为50kda-200kda。

88、本发明的优选技术方案中，将步骤s-3制得的细胞蛋白提取物或步骤(2)制得的蛋白组合物冻存，优选冻存于-40℃至-20℃。

89、本发明的优选技术方案中，在步骤s-3制得的细胞蛋白提取物或步骤(2)制得的蛋白组合物中加入冻干保护剂，冻干，制得细胞蛋白提取物冻干制剂或蛋白组合物冻干制剂，其中，所述冻干保护剂选自甘露醇、山梨糖醇、右旋糖酐、甘油、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、葡聚糖、三辛酸甘油酯(hes)、聚乙二醇、乙烯乙二烯、磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、山梨醇、淀粉中的任一种或其组合。

90、本发明的优选技术方案中，以质量百分比计，所述细胞蛋白提取物冻干制剂或蛋白组合物冻干制剂中含有的冻干保护剂为0.5-8％，优选为1-5％。

91、本发明的优选技术方案中，在步骤s-3制得的细胞蛋白提取物或步骤(2)制得的蛋白组合物中任选地加入蛋白稳定剂，其中，所述蛋白稳定剂选自白蛋白、锌盐、铝盐的任一种。

92、本发明的优选技术方案，所述细胞蛋白提取物冻干制剂或蛋白组合物冻干制剂ph6-8，优选为ph7-7.5。

93、本发明的优选技术方案中，所述的药物组合物临用前用等渗溶液或缓冲溶液复溶后，涂抹至头皮上，采用滚针、微针、按摩的任一种或其组合方式至吸收，其中，所述的等渗溶液或缓冲溶液选自生理盐水、5％葡萄糖溶液、磷酸盐缓冲液(pbs)、tbps缓冲液、tbst缓冲液、tr i s(三羟甲基氨基甲烷)缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、巴比妥酸盐缓冲液的任一种或其组合。

94、本发明的优选技术方案中，所述原代间充质干细胞的培养为本领域的培养方法。

95、本发明的优选技术方案中，所述间充质传代干细胞的培养包括下述步骤：将原代间充质干细胞按照初始密度为5.0×105-5.0×106个/ml加入到传代培养基中，再将其置于37.0℃±0.5℃、5％±1.0％co2条件下培养10-15天，每隔2-3天，观察传代培养基变黄后，半量更换传代培养基，其中，所述传代培养基含有10％fbs、100u/ml青霉素和100ug/ml链霉素的dmem/f12培养基。

96、本发明的优选技术方案中，所述原代间充质干细胞的培养包括下述步骤：

97、a:将脐带清洗消毒后，组织解剖，取华通胶层组织，将其切成3mm3的小块，离心，清洗，收集组织块，将其置于含10％胎牛血清fbs、100ug/ml青霉素、100ug/ml链霉素的dmem/f12培养基中，再将其置于37.0℃±0.5℃、5％±1.0％co2条件下培养，每间隔2-3天半量更换培养基，培养至组织块爬出细胞；

98、b:振摇，收集低层细胞用pbs清洗后，加入0.25％的胰蛋白酶消化2min-3min，加入等体积的胰蛋白酶终止液停止消化，吸管轻轻吹打，1200-1500rpm/min*5-8min离心后，收集细胞，即得。

99、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物中含有的毛囊修复蛋白组合物0.2-8％，优选为0.3-5％。

100、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物中含有的神经酰胺为0.001-5％，优选为0.001-1％。

101、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物中含有的咖啡因0.0001-5％，优选为0.0001-1％。

102、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物中含有的中药提取物0.01-5％，优选为0.01-1％。

103、本发明的优选技术方案，以重量百分比计，组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.2-8％、咖啡因0.0001-5％、神经酰胺0.001-5％、当归提取物0.05-0.1％、燕麦仁提取物0.005-0.1％、野大豆胚芽提取物0.0001-0.1％、黄芩提取物0.0001-0.1％和姜根提取物0.0001-0.1％。

104、本发明的优选技术方案，所述组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.47％、咖啡因0.0012％、神经酰胺0.00075％、当归提取物0.05％、燕麦仁提取物0.005％、野大豆胚芽提取物0.0001％、黄芩提取物0.0001％和姜根提取物0.0001％。

105、本发明的优选技术方案，所述组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.413％、咖啡因0.4％、神经酰胺0.3％、当归提取物0.05％、燕麦仁提取物0.1％、野大豆胚芽提取物0.1％、黄芩提取物0.1％和姜根提取物0.05％。

106、本发明的优选技术方案，所述药学上可接受的载体选自保湿剂、增稠剂、抗氧化剂、防腐剂、ph调节剂、表面活性剂中的任一种或其组合。

107、本发明的优选技术方案，所述保湿剂选自丙二醇、丁二醇、甘油、1,2-己二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油、peg-40氢化蓖麻油、1,2-戊二醇、葡萄糖、硫酸镁、甘氨酸、植物鞘氨醇中的任一种或其组合。

108、本发明的优选技术方案，组合物中的保湿剂为1-15％，优选为5-10％。

109、本发明的优选技术方案，所述增稠剂选自黄原胶、卡波姆、聚丙烯酰基二甲基牛磺酸铵中的任一种或其组合。

110、本发明的优选技术方案，组合物中的增稠剂0.1-10％,优选为0.2-8％，更优选为0.3-5％。

111、本发明的优选技术方案，所述抗氧化剂选自馨鲜酮、对羟基苯乙酮、维生素c中的任一种或其组合。

112、本发明的优选技术方案，组合物中含有的抗氧化剂0.1-10％,优选为0.2-8％。

113、本发明的优选技术方案，所述防腐剂选自苯氧乙醇、山梨酸钾中的任一种或其组合。

114、本发明的优选技术方案，组合物中的防腐剂0.1-10％,优选为0.2-8％，更优选为0.3-5％。

115、本发明的优选技术方案，所述ph调节剂选自氢氧化钠、乳酸、盐酸、碳酸钠、碳酸氢钠中的任一种或其组合。

116、本发明的优选技术方案，所述表面活性剂选自pca钠、月桂酰乳酰乳酸钠、硅氧烷三醇藻酸酯中的任一种或其组合。

117、本发明的优选技术方案，组合物中的表面活性剂0.001-1％,优选为0.01-0.1％。

118、本发明的优选技术方案，所述组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.47％、咖啡因0.0012％、神经酰胺0.00075％、当归提取物0.05％、燕麦仁提取物0.005％、野大豆胚芽提取物0.0001％、黄芩提取物0.0001％、姜根提取物0.0001％。

119、本发明的优选技术方案，所述组合物含有的毛囊修复蛋白组合物0.413％、咖啡因0.4％、神经酰胺0.3％、当归提取物0.05％、燕麦仁提取物0.1％、野大豆胚芽提取物0.1％、黄芩提取物0.1％、姜根提取物0.1％、丹参提取物0.05％。

120、本发明的优选技术方案，所述组合物ph7-8，优选为ph7.5-7.8。

121、本发明的优选技术方案，组合物1的制备中，以重量份计，所述的无机盐溶液由0.004份氯化钠、0.00145份磷酸氢二钠、0.0001份磷酸钾和0.0001份氯化钾溶解于水制成。

122、本发明的优选技术方案，组合物2的制备中，以重量份或体积份计，所述的药学上接受载体由0.5份1,2-己二醇、0.21份丁二醇、0.09份葡萄糖、0.03份硫酸镁、0.013份1,2-戊二醇、0.005份pca钠、0.005份甘氨酸、0.005份月桂酰乳酰乳酸钠、0.002份peg-40氢化蓖麻油、0.0005份香精、0.00025份植物鞘氨醇、0.00025份胆甾醇、0.00024份硅氧烷三醇藻酸酯、0.00015份卡波姆、0.00015份黄原胶和0.000006份苯氧乙醇，在搅拌条件下，加水定容制得。

123、本发明的优选技术方案，组合物3的制备，以重量份或体积份计，所述的药学上接受载体由6份丙二醇、1份甘油和0.5份对羟基苯乙酮，在搅拌条件下，加水定容制得。

124、本发明的另一目的在于提供一种固发药物组合物，包括0.1-10(w/w)的毛囊修复蛋白组合物、0.1-10％(w/w)的神经酰胺、0.1-10％(w/w)的咖啡因、0.1-10％(w/w)的丹参提取物、0.1-10％(w/w)的当归提取物、0.1-10％(w/w)的燕麦仁提取物、0.1-10％(w/w)的野大豆胚芽提取物、0.1-10％(w/w)的黄芩提取物、0.1-10％(w/w)的姜提取物和药学上可接受的载体。

125、本发明的优选技术方案，所述组合物中毛囊修复蛋白组合物的含量为0.2-8％(w/w)，优选为1-5％(w/w)。

126、本发明的优选技术方案，所述药学上可接受的载体包括保湿剂、抗氧化剂中的任一种或其组合。

127、本发明的优选技术方案，所述组合物中保湿剂的含量为0.5-18％(w/w)，优选为1-15％(w/w)。

128、本发明的优选技术方案，所述保湿剂包括丙二醇、丁二醇、甘油、1，2己二醇、咖啡因硅烷醇c、聚氧乙烯氢化蓖麻油中的任一种或其组合。

129、本发明的优选技术方案，所述组合物中抗氧化剂的含量为0.5-18％(w/w)，优选为1-15％(w/w)。

130、本发明的优选技术方案，所述抗氧化剂包括馨鲜酮、对羟基苯乙酮、维生素c中的任一种或其组合。

131、本发明的优选技术方案，所述组合物包括0.1-0.5(w/w)的毛囊修复蛋白组合物、0.001-0.1％(w/w)的神经酰胺、0.1-1％(w/w)的丹参提取物、0.1-1％(w/w)的燕麦仁提取物、0.1-1％(w/w)的姜根提取物、0.1-1％(w/w)的野大豆胚芽提取物、1-10％(w/w)的丙二醇、0.1-1％(w/w)的丁二醇、1-10％(w/w)的甘油、0.1-10％(w/w)的馨鲜酮、0.1-10％(w/w)的咖啡因硅醇c、0.1-10％(w/w)的1,2己二醇、0.01-1％(w/w)的聚氧乙烯氢化蓖麻油、0.01-1％(w/w)的当归提取物，其余为水。

132、本发明的优选技术方案，所述组合物选自冻干制剂、凝胶剂、液体敷料、喷剂、水剂、霜剂、膏剂的任一种。

133、本发明的另一目的在于提供一种固发药物组合物的制备方法，包括0.1-10(w/w)的毛囊修复蛋白组合物、0.1-10％(w/w)的神经酰胺、0.1-10％(w/w)的咖啡因、0.1-10％(w/w)的丹参提取物、0.1-10％(w/w)的当归提取物、0.1-10％(w/w)的燕麦仁提取物、0.1-10％(w/w)的野大豆胚芽提取物、0.1-10％(w/w)的黄芩提取物、0.1-10％(w/w)的姜提取物和药学上可接受的载体，所述组合物的制备方法包括下述步骤：

134、(1)将除毛囊修复蛋白组合物的各组分依次加入到装有水的乳化锅中，20-50rpm加热搅拌均匀至完全溶解，40-85℃保温；

135、(2)将乳化锅温度降温至30-35℃，加入毛囊修复蛋白组合物，20-50rpm下均质1-10分钟，即得。

136、本发明的另一目的在于提供固发药物组合物用于制备防脱固发制品中的应用。

137、本发明的优选技术方案，所述脱发选自斑秃、神经性脱发、雄脱、毛囊受损、毛囊未完全闭合、头皮炎症、毛囊炎、脂溢性脱发、头发局部稀疏的任一种或其组合导致的脱发。

138、本发明的另一目的在于提供固发药物组合物用于制备改善头皮环境制品中的应用。

139、本发明的优选技术方案，所述改善头皮环境为改善皮脂、防治脱发、敏感、白发、毛囊炎症状中的任一种或其组合。

140、本发明的优选技术方案，将组合物直接喷涂至头皮处，按摩吸收；或用纳米微晶导入。

141、除非另有说明，本发明涉及液体与液体之间的百分比时，所述的百分比为体积/体积百分比；本发明涉及液体与固体之间的百分比时，所述百分比为体积/重量百分比；本发明涉及固体与液体之间的百分比时，所述百分比为重量/体积百分比；其余为重量/重量百分比。

142、与现有技术相比，本发明具有下述有益技术效果：

143、1、本发明的固发组合物中可实现毛囊受损细胞全面修复、毛囊微环境免疫调节、加速代谢清除毛囊炎性因子、抑制亢进毛囊皮脂腺细胞功能、软化疏通毛囊基地周围微血管、补充毛发毛干角蛋白、纤维蛋白、黑素颗粒，具有显著的修复效果。

144、2、本发明的固发组合物显著改善头皮的梳理力、光泽度、摩擦力，脱发量显著下降，舒缓头皮，提高透明质酸酶抑制率、强化头皮屏障、提高头发浓密度。

145、3、本发明的制备方法具有操作简便，绿色环保，成本更优，适用于工业化生产等优点。