一种HTLV-1病毒感染阻断剂、其药物组合物、疫苗及其应用

本发明涉及生物医药，具体涉及一种htlv-1病毒感染阻断剂、其药物组合物、疫苗及其应用。

背景技术：

1、htlv-1病毒，又称人类t淋巴细胞白血病病毒1型(human t-cell leukemia virustype 1，htlv-1)，世界上有多个htlv-1的流行区，分别是日本西南部、加勒比海地区和非洲中部，在中国东南部沿海地区也有流行态势。人t淋巴细胞白血病1型病毒与hiv-1相似，是一种与人类多种疾病密切相关的逆转录病毒，可以通过临床输血、毒品注射、性接触及母婴等途径传播。htlv-1的潜伏期较长，感染后2％～5％的患者可发展为急性成人t淋巴细胞白血病(adult t-cell leukemia，atl)。htlv-1感染的细胞主要是cd4+t淋巴细胞，但在特定条件下亦可感染非t淋巴细胞，如b淋巴细胞，甚至可感染骨髓干细胞和巨噬细胞。在细胞培养上，htlv-1感染可诱导t细胞永生化。htlv-1感染人t淋巴细胞后能促进il-2和il-6等细胞因子表达，其中il-6可与其受体结合从而激活信号传导与转录激活因子3(signaltransducer and activator of transcription 3，stat3)磷酸化，促进感染细胞的增殖与恶性转化，有利于病毒发生免疫逃逸。研究表明，在stat蛋白家族的7个成员(stat1～4、5a、5b和6)中，stat3与恶性肿瘤增殖和免疫抑制关系最为密切。htlv-1感染的脐带t细胞可持续生长，并表达dr蛋白，白细胞介素-2受体(il-2r)表达量增加，而对外源性il-2的依赖性降低。这些特性与atl患者的恶性t细胞特性相似。

2、atl起病急、进展快、预后差、死亡率高，因此针对htlv-1病毒感染及其诱发的atl疾病，有开展靶向精准预防、抑制或治疗的必要。近年来国内多聚焦于htlv-1病毒感染的流行病调查，其长期潜伏和致病的分子机制目前尚不清楚，更多聚焦于具有抗病毒作用的小分子化合物或天然化合物的研究，对于基因分子水平靶向阻断/抑制htlv-1病毒感染的研究鲜有报道。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的之一在于提供一种htlv-1病毒感染阻断剂，靶向piezo2，抑制piezo2表达，以降低htlv-1病毒感染效率。

2、本发明的目的之二在于提供一种药物组合物，以靶向piezo2抑制剂为活性成分，具有降低htlv-1病毒感染效率的药物功效,用于抑制/治疗htlv-1病毒感染致急性成人t淋巴细胞白血病。

3、本发明的目的之三在于提供一种疫苗，以靶向piezo2抑制剂为活性成分，预防/抑制htlv-1病毒感染致急性成人t淋巴细胞白血病(atl)。

4、本发明的目的之四在于提供本发明提供的htlv-1病毒感染效率阻断剂，在制备预防/抑制/治疗htlv-1病毒感染致atl药物方面的应用。

5、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

6、htlv-1病毒感染阻断剂，其有效成分为靶向piezo2抑制剂。

7、可选的，所述靶向piezo2抑制剂为靶向piezo2的sirna。

8、可选的，所述靶向piezo2抑制剂为反义寡聚体；所述反应寡聚体与编码所述piezo2蛋白的mrna前体的靶向区结合。

9、可选的，所述靶向piezo2抑制剂为piezo2抗体。

10、可选的，所述靶向piezo2抑制剂为用于敲除/沉默piezo2基因表达的sgrna。

11、可选的，所述sgrna包括sgrna1：agaggcactgatctatgaagagg，如seq id no.1所示、sgrna2：cgaagttaaaaatgttccgcagg，如seq id no.2所示和sgrna3：cccgaggagcccagtaagatgg，如seq id no.3所示。

12、一种药物组合物，其活性成分为上述htlv-1病毒感染阻断剂，用于抑制/治疗htlv-1病毒感染致急性成人t淋巴细胞白血病(atl)。

13、一种疫苗，其活性成分为上述htlv-1病毒感染阻断剂，用于预防/抑制htlv-1病毒感染致atl。

14、上述htlv-1病毒感染阻断剂在制备预防/抑制/治疗htlv-1病毒感染致atl药物或疫苗方面的应用。

15、本发明通过crispr/cas9技术敲除jurkat细胞上的piezo2分子(即为piezo2-/-jurkat细胞)，通过细胞共培养技术促使piezo2-/-jurkat细胞与jurkat细胞均感染上htlv-1病毒，然后通过磁性分选获取感染htlv-1病毒的htlv-1+piezo2-/-jurkat细胞与htlv-1+jurkat细胞。检测感染有htlv-1病毒的htlv-1+piezo2-/-jurkat细胞与htlv-1+jurkat细胞中的htlv-1相关细胞因子(如tax、p19等)mrna，对比这两种细胞内的htlv-1相关细胞因子mrna的表达水平，结果表明敲除piezo2的jurkat细胞内htlv-1相关细胞因子(tax、p19等)的mrna表达水平降低，提示靶向piezo2的抑制剂能够作为htlv-1病毒阻断剂，抑制htlv-1病毒感染t细胞，具有阻止htlv-1病毒感染，预防/抑制病毒感染致急性成人t淋巴细胞白血病的药用价值。

技术特征：

1.htlv-1病毒感染阻断剂，其特征在于，其有效成分为靶向piezo2抑制剂。

2.如权利要求1所述htlv-1病毒感染阻断剂，其特征在于，所述靶向piezo2抑制剂为靶向piezo2的sirna。

3.如权利要求1所述的htlv-1病毒感染阻断剂，其特征在于，所述靶向piezo2抑制剂为反义寡聚体；所述反应寡聚体与编码所述piezo2蛋白的mrna前体的靶向区结合。

4.如权利要求1所述的htlv-1病毒感染阻断剂，其特征在于，所述靶向piezo2抑制剂为piezo2抗体。

5.如权利要求1所述的htlv-1病毒感染阻断剂，其特征在于，所述靶向piezo2抑制剂为用于敲除/沉默piezo2基因表达的sgrna。

6.如权利要求5所述的htlv-1病毒感染阻断剂，其特征在于，所述sgrna包括sgrna1：agaggcactgatctatgaagagg，如seq id no.1所示、

7.一种药物组合物，其特征在于，其活性成分为如权利要求1～4任一项所述htlv-1病毒感染阻断剂，用于抑制/治疗htlv-1病毒感染致急性成人t淋巴细胞白血病。

8.一种疫苗，其特征在于，其活性成分为如权利要求1～4任一项所述htlv-1病毒感染阻断剂，用于预防/抑制htlv-1病毒感染致急性成人t淋巴细胞白血病。

9.一种如权利要求1～4任一项所述htlv-1病毒感染阻断剂在制备预防/抑制/治疗htlv-1病毒感染致急性成人t淋巴细胞白血病药物或疫苗方面的应用。

技术总结本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种HTLV‑1病毒感染阻断剂、其药物组合物、疫苗及其应用。本发明通过对比敲除Piezo2和未敲除Piezo2的Jurkat细胞（CD4+T细胞），并经过HTLV‑1病毒感染操作后检测细胞内HTLV‑1相关细胞因子（Tax、P19等）的mRNA表达水平，结果表明Jurkat细胞敲除Piezo2后，其感染HTLV‑1病毒的能力降低（HTLV‑1相关细胞因子Tax、P19等的mRNA表达水平降低），提示靶向Piezo2的抑制剂能够作为HTLV‑1病毒阻断剂，抑制HTLV‑1病毒感染T细胞，具有阻止HTLV‑1病毒感染，预防/抑制病毒感染致急性成人T淋巴细胞白血病的药用价值。技术研发人员：张晨光,张黎琛,于小佳,梁银明,李晗颖,徐银兰,赵桂增,朱雅文受保护的技术使用者：新乡医学院技术研发日：技术公布日：2024/8/27