一种王瓜根药材的质量控制方法及其质量标准与流程

本发明属于中药材质量控制，具体涉及一种王瓜根药材的质量控制方法及其质量标准。

背景技术：

1、王瓜根为葫芦科栝楼属植物王瓜(trichosanthes cucumeroides(ser.)maxim.)的根，别名土瓜根、山苦瓜根、土花粉。块根呈圆柱形或纺锤形，肥大，通常2-9个呈簇生状，断面为洁白或黄白色，粉性，味稍苦涩。分布于东南亚、澳大利亚、中国、朝鲜、日本，全世界大约有80种，中国分布有41种8个变种，主要分布在我国华中、华南、华东及西南等地，味苦，性寒，归大肠、胃经。据《中华本草》记载，王瓜根具有散瘀通结、泻热解毒、行血消肿等功效，用于跌打损伤、热病烦渴、咽喉炎、痈疮肿毒、小便不利、乳汁不下等。

2、王瓜根含有葫芦素b和葫芦素e，对鼻咽癌细胞具有较强的杀伤作用，可以作为鼻咽癌、胃癌、肠癌及其他晚期癌症的镇痛剂，初步证实王瓜根的糖蛋白具有杀伤肺腺癌细胞作用，其中酸性蛋白较为显著，但不及原汁。王瓜根的抗早孕蛋白能引起子宫组织学的变化，因此王瓜根抗早孕蛋白有较好的药用效果。目前，国内外已有大量关于栝楼属植物化学成分及药理活性的研究报道，但栝楼属植物活性成分及生理活性的研究主要集中于栝楼果、栝楼皮、栝楼藤、栝楼根等方面。栝楼属含有萜类、黄酮类、甾体类、苯丙素、生物碱及氨基酸等化学成分。但目前未见王瓜三萜类活性成分质量标准研究的相关报道。

3、另外，目前仅查询到《湖南省中药饮片炮制规范(2010年版)》对王瓜根炮制做出的规范要求，但未见王瓜根质量控制以及质量标准的研究，因此缺乏系统、有效的王瓜根质量控制方法与标准，会导致药材内在质量、用药质量的准确性、有效性下降，甚至引发安全性问题，因此建立王瓜根药材的质量控制方法及其质量标准具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明针对现有技术的不足，提出了一种王瓜根药材的质量控制方法及其质量标准。

2、具体是通过以下技术方案来实现的：

3、一种王瓜根药材的质量控制方法，包括对水分、总灰分、水溶性浸出物、葫芦素b含量的测定，所述水分、总灰分、水溶性浸出物含量测定按照《中国药典》2020年版四部方法；所述葫芦素b含量测定采用高效液相色谱法，具体如下：

4、(1)对照品溶液的制备：取葫芦素b对照品，加甲醇即得；

5、(2)供试品溶液的制备：取王瓜根细粉加甲醇，超声处理，放冷，补足甲醇，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

6、(3)分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液，注入液相色谱仪中测定。

7、所述甲醇的体积浓度为40-60％。

8、所述对照品溶液的质量浓度为50-200μg/ml。

9、所述超声处理的工作条件：功率为200-250w，频率为40khz，时间为30-50min。

10、所述液相色谱的工作条件：色谱柱为hypersil ods c18，流动相为乙腈-水，检测波长为231nm，流速按体积流量计，柱温为30℃，进样量为10μl，理论塔板数按葫芦素b峰计算应不低于5000。

11、所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm。

12、所述流动相中乙腈与水的体积比为(44-46)∶(54-56)。

13、所述流速的体积流量为0.8-1.4ml/min。

14、一种王瓜根药材的质量标准采用上述的王瓜根药材的质量控制方法建立而得，其中葫芦素b不得少于1.10mg/g，水分不得过15.0％，总灰分不得过5.0％，水溶性浸出物不得少于12.83％。

15、本发明在中国药典的基础上，增加了葫芦素b含量的检测，提高了王瓜根质量控制的有效性，有利于更好把控药材的内在质量和用药质量，本发明优选葫芦素b作为质量控制的指标之一，不仅是由于葫芦素b具有抗肿瘤、提高机体免疫力、保肝等多种生物活性，还同时考虑到王瓜根含有的葫芦素d等活性成分与葫芦素b为同系列成分，但由于葫芦素d提取溶剂用量大，供试品溶液制备步骤繁杂，检出限高等问题，所以本发明最终选择以葫芦素b作为质控指标。

16、有益效果：

17、第一、本发明通过对药材中葫芦素b、水分、总灰分、水溶性浸出物的含量测定，建立了一种科学、完整、可靠、有效的王瓜根药材质量控制方法，该方法专属性强、重现性好、快速准确、操作简单。

18、第二、本发明采用该方法建立王瓜根药材的质量标准，能够有效评价和控制药材的内在质量和用药品质，同时便于区分王瓜籽、王瓜皮粉末材料。

技术特征：

1.一种王瓜根药材的质量控制方法，其特征在于，包括对水分、总灰分、水溶性浸出物、葫芦素b含量的测定，所述水分、总灰分、水溶性浸出物含量测定按照《中国药典》2020年版四部方法；所述葫芦素b含量测定采用高效液相色谱法，具体如下：

2.如权利要求1所述的一种王瓜根药材的质量控制方法，其特征在于，所述甲醇的体积浓度为40-60％。

3.如权利要求1所述的一种王瓜根药材的质量控制方法，其特征在于，所述对照品溶液的质量浓度为50-200μg/ml。

4.如权利要求1所述的一种王瓜根药材的质量控制方法，其特征在于，所述超声处理的工作条件：功率为200-250w，频率为40khz，时间为30-50min。

5.如权利要求1所述的一种王瓜根药材的质量控制方法，其特征在于，所述液相色谱的工作条件：色谱柱为hypersilodsc18，流动相为乙腈-水，检测波长为231nm，流速按体积流量计，柱温为30℃，进样量为10μl，理论塔板数按葫芦素b峰计算应不低于5000。

6.如权利要求1所述的一种王瓜根药材的质量控制方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm。

7.如权利要求1所述的一种王瓜根药材的质量控制方法，其特征在于，所述流动相中乙腈与水的体积比为(44-46)∶(54-56)。

8.如权利要求1所述的一种王瓜根药材的质量控制方法，其特征在于，所述流速的体积流量为0.8-1.4ml/min。

9.一种王瓜根药材的质量标准，采用如权利要求1-8任一项所述的一种王瓜根药材的质量控制方法建立而得。

10.如权利要求9所述的一种王瓜根药材的质量标准，其特征在于，所述质量标准中葫芦素b不得少于1.10mg/g，水分不得过15.0％，总灰分不得过5.0％，水溶性浸出物不得少于12.83％。

技术总结本发明属于中药材质量控制技术领域，具体涉及一种王瓜根药材的质量控制方法及其质量标准，包括对水分、总灰分、水溶性浸出物、葫芦素B含量的测定，所述水分、总灰分、水溶性浸出物含量测定按照《中国药典》2020年版四部方法；所述葫芦素B含量测定采用高效液相色谱法，本发明通过对药材中葫芦素B、水分、总灰分、水溶性浸出物的含量测定，建立了一种科学、完整、可靠、有效的王瓜根药材质量控制方法，该方法专属性强、重现性好、快速准确、操作简单；本发明采用该方法建立王瓜根药材的质量标准，能够有效评价和控制药材的内在质量和用药品质，同时便于区分王瓜籽、王瓜皮粉末材料。技术研发人员：冯发进,杨江林,吴飞龙,杨德智,赵启华,杨迺嘉,杨熟英受保护的技术使用者：贵州省生物技术研究开发基地有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/27