一种仿生纳米中药的构建及其在抗肺纤维化方面的应用

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种仿生纳米中药的构建及其在抗肺纤维化方面的应用。

背景技术：

1、肺纤维化(pf)作为进行性的间质性肺病，中位生存期为2～4年，可用的药物疗法匮乏，大多数患者只能采用吡非尼酮和尼达尼布两种fda批准的药物进行姑息治疗，肺移植仍是终末期患者唯一的治愈方法，亟需开发有效的药物制品以改善患者的临床获益。

2、pf治疗药物开发困难归结于疾病复杂的微环境和多重病理改变。作为抵御病原损伤的主要屏障，肺内驻留的巨噬细胞激活释放大量一氧化氮，过氧化物，尤其是活性氧(ros)等有毒物质损伤肺组织，导致氧化应激反应，加重生物性损伤。此外炎性渗出阻碍气体交换，局部相对氧含量不足，并释放大量促血管生成因子，伴随内皮细胞增殖衍生畸形的肺泡毛细血管，为间充质细胞增殖提供必要的营养支持同时也阻碍了治疗药物的有效渗入，血管生成失调持续进展至纤维增殖期，并伴有不良预后。单一药物疗法不能同时应对所有障碍，强调策略设计和合理药物选择的必要性，打破物理屏障的同时实现重塑病理微环境的目的。

3、药物协同疗法提供了一种新的思路，有效的协同作用将显著减少药物剂量，实现理想治疗效价的同时，又避免正常组织的损伤。纳米技术的快速发展为合理设计先进的药物共递送制剂和相应靶向策略提供了更多机会。基于刺激响应的自组装前药纳米制剂作为可控的药物递送新范式受到广泛关注。通过在特定刺激条件下将负载药物释放可达到更精确的治疗效果，降低脱靶副作用。苯硼酸(pba)及其衍生物是一类人工合成的二醇类物质识别体，能够与含有邻二醇结构的多羟基化合物形成共价复合物，具有可逆性。因ros响应和酸环境的释药行为，它们在药物递送中得到了广泛的研究。

技术实现思路

1、本发明提供一种能够实现多药物靶向递送释药的仿生纳米中药及其构建方法，通过调控病理微环境以高效治疗肺纤维化的目的。

2、本发明是通过下面的技术方案实现的：

3、本发明提供一种仿生纳米中药，pbfb@pm。

4、所述的仿生纳米中药，由药物缀合物bfb和血小板膜(pm)制备得到；

5、其中，所述的药物缀合物bfb为两种天然产物芒柄花黄素(fmn)和黄芩素(be)作为优选药物复方，采用ros响应型苯硼酸-二醇偶联策略制备得到的药物缀合物bfb。

6、本发明提供所述药物缀合物bfb的制备路线，具体采用三步法合成药物缀合物bfb：

7、i)在四氢呋喃的媒介下，加入三乙胺和三氟甲磺酰氯与fmn反应，反应完成后，淬灭、萃取后得到中间体fsf；

8、ii)将fsf与醋酸钯和联硼酸频那醇酯在四氢呋喃中混合后回流搅拌至反应完全后，分离纯化得到中间体，中间体与盐酸水溶液反应得到硼酸化芒柄花黄素(bf)；

9、iii)在dmso溶剂中将bf与be混合形成药物缀合物bfb。

10、进一步的，所述步骤i)中，按摩尔比，fmn与三氟甲磺酰氯的比为4：5；所述步骤ii)中，按摩尔比，fsf：醋酸钯：联硼酸频那醇酯＝20：1：10，所述盐酸的浓度为6mol/l；所述步骤iii)中，按摩尔比bf:be＝1:1。

11、本发明提供所述仿生纳米中药的制备方法，具体步骤为：

12、1)制备pbfb：将含有药物缀合物bfb的dmso溶液滴加到聚乙烯吡咯烷酮(pvp)的水溶液中，搅拌后离心弃上清收集沉淀物，随后洗涤、冻干、秤重得到pbfb。

13、2)制备血小板膜(pm)：采用梯度离心和液氮冻融法制备血小板膜(pm)。

14、3)制备仿生纳米中药(pbfb@pm)：将pbfb混悬液与pm混悬液混合，在脂质体挤出器中依次通过1μm、400nm、200nm聚碳酸酯多孔膜即得仿生纳米中药pbfb@pm。

15、得到的仿生纳米中药pbfb@pm靶向至炎症病损部位，重塑损伤阶段病理微环境，延缓纤维化进展。

16、进一步的，所述步骤1)中，药物缀合物bfb与pvp的质量比为wbfb/wpvp＝3∶1，得到的pbfb以纳米晶的形式存在；

17、进一步的，所述步骤3)中，pbfb混悬液为pbfb与水混合得到的混悬液，浓度为3.5mg/ml；pm混悬液为pm与水混合得到的混悬液，浓度为1mg/ml膜蛋白。

18、本发明提供所述仿生纳米中药在制备治疗肺纤维化药物的应用。

19、本发明提供一种药物组合物，包括所述仿生纳米中药及药学中可接受的辅料。

20、本发明提供所述药物组合物在制备治疗肺纤维化药物的应用。

21、本发明的有益效果：

22、本发明采用响应型苯硼酸-二醇偶联策略，以硼酸化芒柄花黄素和黄芩素为原料，通过一步法合成具备ros和ph双响应功能的药物缀合物bfb，能够保证药物缀合物bfb在高ros的炎性环境和酸性环境下释放原始药物分子fmn和be。

23、本发明采用反溶剂沉淀法诱导药物缀合物bfb利用分子间的疏水相互作用和π-π堆积作用，以特定的比例在水溶液中自组装形成致密的纳米晶pbfb，显著提升药物的负载含量。

24、本发明采用挤出法制备pm包被的仿生纳米中药pbfb@pm，保留血小板相关膜蛋白功能，提高纳米中药体内稳定性的同时赋予病损炎症部位主动靶向能力，避免了小分子在体内的快速清除和全身副作用。

25、本发明描述了仿生纳米中药的制备方法，以及相关的制剂表征、体内靶向性评价及药效学评价。

26、本发明通过体内分布实验证明了该仿生纳米中药凭借pm的炎症趋向性，通过尾静脉注射在体内实现肺部靶向给药的可行性。

27、本发明通过肺组织冷冻切片的免疫荧光实验证明了该仿生纳米中药有效清除病损部位ros，缓解肺内氧化应激，抑制内皮细胞活化，有效调控氧化应激/血管新生病理微环境。

28、本发明通过综合药效实验证明该仿生纳米中药显著改善肺纤维化治疗效果，有效抑制肺内炎症和胶原沉积，显著延长小鼠生存期。

技术特征：

1.一种仿生纳米中药，其特征在于，所述仿生纳米中药，pbfb@pm，由药物缀合物bfb和血小板膜制备得到。

2.根据权利要求1所述的仿生纳米中药，其特征在于，所述的药物缀合物bfb为两种天然产物芒柄花黄素和黄芩素作为药物复方，采用ros响应型苯硼酸-二醇偶联策略制备得到的药物缀合物bfb。

3.根据权利要求2所述的仿生纳米中药，其特征在于，所述的药物缀合物bfb由以下方法制备：

4.权利要求1-3任一项所述的仿生纳米中药的制备方法，其特征在于，采用反溶剂沉淀法制备。

5.根据权利要求4所述的仿生纳米中药的制备方法，其特征在于，具体采用如下步骤：

6.根据权利要求5所述的仿生纳米中药的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中，药物缀合物bfb与聚乙烯吡咯烷酮的质量比为wbfb/wpvp＝3∶1；得到的pbfb以纳米晶的形式存在。

7.根据权利要求5所述的仿生纳米中药的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中，pbfb混悬液为pbfb与水混合得到的混悬液，浓度为3.5mg/ml；pm混悬液为pm与水混合得到的混悬液，浓度为1mg/ml膜蛋白。

8.权利要求1-3任一项所述的仿生纳米中药在制备治疗肺纤维化药物的应用。

9.一种药物组合物，包含权利要求1-3任一项所述的仿生纳米中药及药学中可接受的辅料。

10.权利要求9所述的药物组合物在制备治疗肺纤维化药物的应用。

技术总结一种仿生纳米中药的构建及其在抗肺纤维化方面的应用，属于药物制剂领域。本发明应用两种天然产物芒柄花黄素(FMN)和黄芩素(BE)作为优选药物复方。采用苯硼酸‑二醇偶联策略设计合成了以硼酸酯键结合的药物缀合物bFB。药物缀合物bFB在水溶液中自组装并对其仿生化修饰，得到的仿生纳米中药PbFB@PM主动靶向病损部位积累后响应高ROS和酸性环境快速释放药物，有效清除自由基，缓解肺内氧化应激，抑制内皮细胞活化。PbFB@PM在博来霉素(BLM)诱导的肺纤维化(PF)模型小鼠肺内重塑损伤阶段氧化应激和血管新生病理微环境，预防纤维化进展，并延长小鼠生存期。技术研发人员：董竞成,欧阳博书,魏颖,王纳受保护的技术使用者：复旦大学技术研发日：技术公布日：2024/9/2