一种同时测定中药组合物中7种成分含量的方法

本发明属于中药成分检测的，具体地说，涉及一种同时测定中药组合物中7种成分含量的方法。

背景技术：

1、结直肠癌是当今最常见的疾病之一，每年全球有约120万名患者被确诊为结直肠癌，而有超过60万名患者直接或间接死于结直肠癌。其在各地区的发病率有显著差异，这与所谓西方式生活有密切联系。男性结直肠癌的发病率高于女性。此外，结直肠癌的发病率会随着年龄的增大而增加，比如发达国家的结直肠癌发病中位年龄为70岁。虽然遗传因素是结直肠癌的危险因素，但大部分结直肠癌都是散发的，并在几年内以腺瘤-肿瘤的形式发生。

2、当前结直肠癌最主要的治疗手段是外科手术、新辅助放射治疗(患者是直肠癌)以及辅助化疗(患者为iii、iv期或高风险的ii期结肠癌)。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种同时测定中药组合物中7种成分含量的方法。

2、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

3、本发明的第一方面，提供了一种同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，包括以下步骤：

4、所述中药组合物是由知母、黄柏、虎杖根、藤梨根、红藤、败酱草、薏苡仁制成；

5、将上述中药组合物制成中药提取物，取上述制备的中药提取物研细，加入溶剂溶解，搅拌反应，冷却，再称定重量，用溶剂补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液，得到供试品溶液，经高效液相色谱分析检测，同时获得上述中药提取物中的7种成分：红景天苷、绿原酸、芒果苷、虎杖苷、盐酸小檗碱、异牡荆素、白藜芦醇。

6、根据供试品溶液色谱的出峰保留时间与对照品比对，以及阴性对照实验，确定中药组合物中的7种成分为：红景天苷、绿原酸、芒果苷、虎杖苷、盐酸小檗碱、异牡荆素、白藜芦醇。

7、所述高效液相色谱的条件如下：以甲醇为流动相a，以0.1％磷酸溶液为流动相b，梯度洗脱流梯度洗脱，条件：0～30min，10％～30a；30～60min，30％～42％a，速度为1ml/min；柱温为25℃～35℃(优选为30℃)；检测波长为250～364nm(250nm、265nm、275nm、278nm、364nm)。

8、所述高效液相色谱采用的色谱柱选自以下的一种：资生堂spolar c18(4.6×250mm，5μm)、agilent zorbax eclipse plus c18(4.6×250mm，5μm)、waters xselect cshc18(4.6×250mm，5μm)、waters hss t3(4.6×250mm，5μm)，优选为资生堂spolar c18(4.6×250mm，5μm)。

9、所述色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

10、所述中药组合物是由以下重量份数的组分制成；

11、黄柏9～15份、知母9～15份、藤梨根10～50份、虎杖根10～50份、红藤10～50份、败酱草10～50份、薏苡仁10～50份。

12、较优选的，所述中药组合物是由以下重量份数的组分制成；

13、黄柏12份、知母12份、藤梨根30份、虎杖根30份、红藤30份、败酱草30份、薏苡仁30份。

14、所述中药提取物的制备方法包括以下步骤：

15、将中药组合物各组分混合，加中药组合物总重量6～12倍(优选为10倍)量水，煎煮1～3次(优选为2次)，每次煎煮1～3小时(优选为2小时)，合并滤液，干燥，获得中药提取物。

16、所述干燥采用喷雾干燥，进风温度为140-170℃，出风温度为85-115℃，雾化器频率为300～400hz，进料速度为10～40转/分钟。

17、所述溶剂选自50％甲醇、25％乙醇、50％乙醇、75％乙醇、乙醇，优选为50％乙醇。

18、所述中药提取物与溶剂的质量体积比为1g:20～100ml(优选为1g:50ml)。

19、所述搅拌反应的条件是加热回流或超声提取。

20、所述加热回流的时间选自20～45min，优选为20min。

21、本发明的第二方面，提供了一种治疗结直肠癌的中药组合物，所述中药组合物是由知母、黄柏、虎杖根、藤梨根、红藤、败酱草、薏苡仁制成。

22、由于采用上述技术方案，本发明具有以下优点和有益效果：

23、本发明的方法可以同时测定中药组合物中7种成分含量：红景天苷、绿原酸、芒果苷、虎杖苷、盐酸小檗碱、异牡荆素、白藜芦醇，目前无含量测定项，无法全面控制产品质量；本发明建立hplc法同时测定中药组合物中红景天苷、绿原酸、芒果苷、虎杖苷、盐酸小檗碱、异牡荆素、白藜芦醇的含量，样品处理方法简单，测试方法的专属性、重复性、准确度都良好，能很好的为其质量评价提供参考依据。

24、本发明提供的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，准确可靠、简便易行、专属性强，建立了该中药组合物的质量标准，可用于中药组合物的质量控制。所以，本发明有效克服了现有技术中的种种缺点而具高度产业利用价值。

技术特征：

1.一种同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的条件如下：以甲醇为流动相a，以0.1％磷酸溶液为流动相b，梯度洗脱流梯度洗脱，条件：0～30min，10％～30a；30～60min，30％～42％a，速度为1ml/min；柱温为25℃～35℃；检测波长为250～364nm。

3.根据权利要求2所述的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，所述高效液相色谱采用的色谱柱选自以下的一种：资生堂spolar c18：4.6×250mm，5μm、agilent zorbax eclipse plus c18：4.6×250mm，5μm、waters xselect csh c18：4.6×250mm，5μm、waters hss t3：4.6×250mm，5μm。

4.根据权利要求1所述的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，所述中药组合物是由以下重量份数的组分制成；

5.根据权利要求4所述的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，所述中药组合物是由以下重量份数的组分制成；

6.根据权利要求1所述的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，所述中药提取物的制备方法包括以下步骤：

7.根据权利要求6所述的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，所述干燥采用喷雾干燥，进风温度为140-170℃，出风温度为85-115℃，雾化器频率为300～400hz，进料速度为10～40转/分钟。

8.根据权利要求1所述的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，所述溶剂选自50％甲醇、25％乙醇、50％乙醇、75％乙醇、乙醇。

9.根据权利要求1所述的同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，其特征在于，所述中药提取物与溶剂的质量体积比为1g:20～100ml。

10.一种治疗结直肠癌的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物是由知母、黄柏、虎杖根、藤梨根、红藤、败酱草、薏苡仁制成。

技术总结本发明公开了一种同时测定中药组合物中7种成分含量的方法，所述中药组合物是由知母、黄柏、虎杖根、藤梨根、红藤、败酱草、薏苡仁制成；本发明建立HPLC法同时测定中药组合物中红景天苷、绿原酸、芒果苷、虎杖苷、盐酸小檗碱、异牡荆素、白藜芦醇的含量，样品处理方法简单，测试方法的专属性、重复性、准确度都良好，能很好的为其质量评价提供参考依据。技术研发人员：徐嘉,宋利斌,芮黎珺受保护的技术使用者：复旦大学附属肿瘤医院技术研发日：技术公布日：2024/9/2