包含源自罗斯氏菌属或源自双歧杆菌属的细胞外囊泡的用于预防、改善或治疗炎性疾病的组合物的制作方法

本发明涉及用于预防、改善或治疗炎性疾病的组合物，其包含罗斯氏菌属菌株、双歧杆菌属菌株或源自其的细胞外囊泡(ev)。

背景技术：

1、炎症是指由于外部传染性病原体(细菌、真菌、病毒、各类过敏原)的侵入而形成脓肿的病理情况。具体而言，当外部细菌侵入并在特定组织中增殖时，身体的白细胞会识别出这种情况，并主动地攻击该增殖的外部细菌。在此过程中，由白细胞产生的死亡细胞积聚在细菌侵入的组织中，并且同时，被白细胞杀死的侵入细菌的细胞裂解物溶解到该被侵入的组织中，从而形成脓肿。可以通过抗炎作用来促进由炎症引发的脓肿的治疗，其是一种炎症治疗的促进活动，例如使用抗菌剂抑制侵入细菌的增殖，或者激活吞噬脓肿中积聚的外源物质的巨噬细胞以增强巨噬细胞消化并排出外源物质的功能。

2、一般而言，炎症反应是一种用于对使生命体的细胞或组织发生器质性变化的侵入所导致的损伤进行修复和再生的生物防御反应过程，在这个反应过程中局部血管及体液中的各种组织细胞和免疫细胞发挥效果。通常，由外部侵入细菌引起的该炎症反应是保护生命体的防御系统，但当异常过度的炎症反应被诱发时，就会发生各种疾病，这些疾病被称为炎性疾病。在炎性疾病中，由通过外界刺激激活的靶细胞所分泌的各种炎症介质会扩张并维持炎症，从而威胁人类生命。炎性疾病包括急性支气管炎、慢性支气管炎、急性细支气管炎、慢性细支气管炎、败血症、败血性休克、急性呼吸窘迫综合征、多器官衰竭和慢性阻塞性肺病。代表性炎性疾病之一的炎性肠病(inflammatory bowel disease，ibd)是一种引起胃肠道慢性炎症、呈慢性病程，逐渐发展、引起并发症并降低身体机能的疾病(sy na and wmoon,korean jgastroenterol vol.71no.2,61-68)。ibd主要分为两种形式：溃疡性结肠炎(uc)和克罗恩病(cd)。ibd的确切发病机制尚不清楚，并且ibd被推测为由遗传因素和环境因素(例如压力和药物使用)共同引起的。因此，由于每个患者具有的病因不同，并且显示出的病程和预后也不同，所以ubd是一种很难被完全治愈的疾病。

3、许多炎症相关疾病的发生与巨噬细胞的激活以及随之发生的炎症相关因子的过度产生有关，代表性的炎症相关因子包括il-1β和tnf-α。此外，在炎性反应的诱导剂中，脂多糖(lps)是构成革兰氏阴性菌细胞表面的物质，它与免疫细胞(例如白细胞)相互作用，并参与炎性相关细胞因子的调节。特别地，炎性细胞因子(例如il-1β、tnf-α和il-6)在介导各种感染性或炎性疾病的病理发展中发挥着重要作用。这些炎性细胞因子由各种免疫细胞和炎性细胞产生，并有助于将额外的炎性细胞募集到导致组织和器官损伤的受伤部位。

技术实现思路

1、技术问题

2、作为寻找与常规治疗剂相比对炎性疾病具有更好的效果的药物的不懈努力的结果，本发明的发明人通过证实源自罗斯氏菌属菌株和双歧杆菌属菌株的细胞外囊泡(extracellular vesicle，ev)对炎性疾病表现出的优异的预防、改善和治疗效果完成了本发明。

3、因此，本发明的一个目的是提供一种用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物，其包含源自罗斯氏菌属(roseburia spp.)菌株的细胞外囊泡(ev)和源自双歧杆菌属(bifidobacterium spp.)菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

4、本发明的另一个目的是提供一种用于预防或治疗炎性疾病的试剂盒，其包含选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

5、本发明的又一个目的是提供一种预防或治疗炎性疾病的方法，包括向有此需要的受试者施用选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

6、本发明的又一个目的是提供一种用于预防或改善炎性疾病的食品组合物，其包含选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

7、本发明的又一目的是提供一种用于预防或改善炎性疾病的饲料组合物，其包含选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

8、然而，本发明要解决的技术问题并不限于上述问题，本领域技术人员从下面的描述中将清楚地理解未提及的其他问题。

9、技术方案

10、本发明提供了一种用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物，其包含选自由源自罗斯氏菌属菌株的细胞外囊泡(ev)和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

11、另外，本发明提供了一种用于预防或改善炎性疾病的食品组合物，其包含选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

12、另外，本发明提供了一种用于预防或改善炎性疾病的饲料组合物，其包含选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

13、另外，本发明提供了一种用于预防、改善或治疗炎性疾病的试剂盒，其包含选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

14、进一步地，本发明提供了一种预防或治疗炎性疾病的方法，包括向有此需要的受试者施用选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

15、进一步地，本发明提供了选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种用于预防或治疗炎性疾病的用途。

16、进一步地，本发明提供了选自由源自罗斯氏菌属菌株的ev和源自双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种用于制备炎性疾病治疗剂的用途。

17、在本发明的一个实施方案中，所述ev的平均直径可为30nm至200nm，但不限于此。

18、在本发明的另一个实施方案中，所述源自罗斯氏菌属菌株的ev可为由罗斯氏菌属菌株自然或人工分泌的；并且在本发明的又一个实施方案中，所述源自双歧杆菌属菌株的ev可为由双歧杆菌属菌株自然或人工分泌的，但不限于此。

19、在本发明的又一个实施方案中，所述罗斯氏菌属菌株可为选自由肠罗斯氏菌(roseburia intestinalis)、粪罗斯氏菌(roseburia faecis)、人罗斯氏菌(roseburiahominis)和食葡糖罗斯氏菌(roseburia inulinivorans)组成的组中的一种或多种，但不限于此。

20、在本发明的又一个实施方案中，所述双歧杆菌属菌株可为选自由长双歧杆菌(bifidobacterium longum)、两歧双歧杆菌(bifidobacterium bifidum)、短双歧杆菌(bifidobacterium breve)、乳双歧杆菌(bifidobacterium lactis)和青春双歧杆菌(bifidobacterium adolescentis)中的一种或多种，但不限于此。

21、在本发明的另一个实施方案中，所述炎性疾病可以为选自由胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、炎性皮肤病、过敏性疾病、肠易激综合征、溃疡性结肠炎、炎性肠病、腹膜炎、骨髓炎、蜂窝组织炎、脑膜炎、脑炎、胰腺炎、创伤性休克、支气管哮喘、囊性纤维化、中风、急性支气管炎、慢性支气管炎、急性细支气管炎、慢性细支气管炎、骨关节炎、痛风、脊柱关节病、强直性脊柱炎、赖特(reiter’s)综合征、银屑病性关节病、肠病性脊柱炎、幼年(juvenile)关节病、幼年强直性脊柱炎、反应性关节病、感染性关节炎、感染后关节炎、淋病性关节炎、结核性关节炎、病毒性关节炎、真菌性关节炎、梅毒性关节炎、莱姆病、与血管炎综合征相关的关节炎、结节性多动脉炎、过敏性血管炎、卢格里克肉芽肿病(lou gehrig'sgranulomatosis)、风湿性多肌痛、关节细胞性动脉炎(articular cell arteritis)、钙晶体沉积性关节病、假性痛风、非关节风湿病、滑囊炎、腱鞘炎、上髁炎、神经性关节病(夏科氏关节病)、出血性关节病(关节积血)、过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura)、肥大性骨关节病、多中心网状组织细胞瘤、结节病、血色素沉着症、镰状细胞性贫血、血红蛋白病、高脂蛋白血症、低丙种球蛋白血症、家族性地中海热、白塞病、系统性红斑狼疮、回归热、银屑癣、多发性硬化症、败血症、败血性休克、多器官功能障碍综合征、急性呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺疾病、急性肺损伤和支气管肺发育不良组成的组中的一种或多种。

22、在本发明的又一个实施方案中，所述炎性肠病可为选自由溃疡性结肠炎、克罗恩病、白塞病、胶原性结肠炎、淋巴细胞性结肠炎、缺血性结肠炎、出血性直肠溃疡、回肠贮袋炎(ileal pouchitis)和改道性结肠炎组成的组中的一种或多种。

23、在本发明的又一个实施方案中，根据本发明的组合物可具有选自以下组成的组中的一种或多种效果：

24、i)减少肠上皮屏障损伤；

25、ii)减少免疫细胞的肠组织浸润；

26、iii)抑制杯状细胞数量的减少；

27、iv)抑制盲肠重量减少；

28、v)抑制肠长度的减少；

29、vi)抑制炎性细胞因子的产生；

30、vii)促进抗炎细胞因子的产生；

31、viii)增强杯状细胞的粘液分泌；

32、ix)促进肠上皮细胞中紧密连接(tight junction)的形成；和

33、x)增加肠内双歧杆菌的数量，但不限于此。

34、在本发明的又一个实施方案中，所述食品组合物可为保健功能性食品组合物，但不限于此。

35、[有益效果]

36、本发明涉及包含源自罗斯氏菌属菌株和/或源自双歧杆菌属菌株的ev的用于预防、改善或治疗炎性疾病的组合物。已发现本发明的ev可减少炎性肠病动物模型中的肠上皮细胞屏障损伤和免疫细胞浸润、维持杯状细胞的数量、抑制肠炎引起的盲肠重量和肠长度的减少，并且通过改变肠微生物群来抑制炎性细胞因子的分泌，以及恢复杯状细胞的粘液分泌和肠上皮细胞形成紧密连接的能力。特别地，还证明了源自属于罗斯氏菌属或双歧杆菌属的同属菌株的所有ev均显示出强效的抗炎作用。换言之，根据本发明的源自罗斯氏菌属菌株和双歧杆菌属菌株的ev可以有效地抑制炎症并改善由于炎症引起的组织损伤或功能障碍，由此它们可被提供为用于预防、改善和/或治疗各种炎性疾病的组合物。