柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法在四逆散颗粒质量控制中的应用及四逆散颗粒质量的控制方法与流程

本发明属于中药制药研发、药品制剂质量控制和分析检测，具体涉及一种hplc法四逆散中柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量测定方法的研究。

背景技术：

1、四逆散是《伤寒乱》收录记载的经典名方，国家工程院院士、全国著名中医专家王永炎教授等多位专家在古方四逆散的基础上精心研制而成，是治疗胃痛系列疾病的经典中药复方制剂，主要由枳壳、醋香附、柴胡、醋延胡索、白芍、炙甘草六味药材制成。

2、在《中华人民共和国药典》2020版一部中，四逆散主要通过芍药苷、延胡索乙素薄层鉴别以及芍药苷含量检测进行质量控制。然而，由于四逆散颗粒由多味中药材原料组成，所含的化学成分种类丰富，仅仅通过1种芍药苷的化学成分的含量测定对其进行质量控制，难以从整体上全面的反映四逆散颗粒的质量概貌，对中药复方制剂的调和平衡相互作用不足以充分阐明，造成质量检测结果缺乏客观性和准确性，从而无法保证四逆散颗粒临床用药的有效性和安全性。

3、因而，建立一种能够全面、快速检测四逆散颗粒的质量方法，对于其全面质量检测和整体质量控制具有重要意义。

4、对比专利cn201110365362.7-四逆散制备工艺，提到了采用液相色谱测定柴胡皂苷的含量，同时，对比专利cn200610002307.0-四逆散水煎物指纹图谱及其建立方法，提到了在210nm和240nm下测定柴胡皂苷a和d的含量。但是，前者为分开的两个方法，成本和耗材等消耗大；后者的指纹图谱方法仅仅为定性检测，无法实现定量。

5、以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日以前已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。

技术实现思路

1、鉴于此，为了克服现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法在四逆散颗粒质量控制中的应用，以对四逆散颗粒质量进行监控和控制。

2、为了达到上述目的，本发明采用以下的技术方案：

3、一种柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法在四逆散颗粒质量控制中的应用，在四逆散颗粒的质量控制中增加对柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定，柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法包括如下步骤：采用高效液相色谱法对四逆散颗粒中的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2的含量进行测定。

4、根据本发明的一些优先实施方面，色谱柱为inertsilods-3(4.6×250mm,5μm)色谱柱。

5、根据本发明的一些优先实施方面，选取的流动相a为乙腈，流动相b为水。

6、根据本发明的一些优先实施方面，检测波长为210nm和254nm。

7、根据本发明的一些优先实施方面，按下表所示比例进行洗脱：

8、

9、根据本发明的一些优先实施方面，所述步骤还包括供试品溶液的制备：取四逆散颗粒，研磨，称取样品，置索氏提取器中，精密加入5％氨水的80％甲醇溶液，称定重量，加热使虹吸次数达到3次或以上，取出，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

10、根据本发明的一些优先实施方面，测定时，吸取供试品溶液，注入液相色谱仪中进行测定。

11、本发明还提供了一种四逆散颗粒质量的控制方法，其包括对四逆散颗粒中的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2的含量进行测定的步骤。

12、在本发明的一些实施例中，四逆散颗粒中的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法包括如下步骤：

13、(1)供试品溶液的制备：

14、取四逆散颗粒，研细，精密称定6.0g样品，置索氏提取器中，精密加入5％氨水的80％甲醇溶液150ml，称定重量，加热使虹吸次数达到3次，取出，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

15、对照品溶液的制备：

16、取柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含1mg的混合溶液，作为柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2对照品溶液。

17、(2)选定色谱条件

18、色谱柱：inertsilods-3(4.6×250mm,5μm)；流动相：以乙腈为流动相a，以水为流动相b，按下表所示比例洗脱；检测波长：210nm和254nm，柱温：30℃，流速：1.0ml/min，进样体积：10μl。理论板数按柴胡皂苷a峰计算应不低于10000。

19、

20、(3)测定方法

21、分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

22、由于采用了以上的技术方案，相较于现有技术，本发明的有益之处在于：本发明的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法在四逆散颗粒质量控制中的应用，通过对四逆散颗粒中的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2的含量进行测定，进而监控和判断四逆散颗粒的质量。

技术特征：

1.一种柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法在四逆散颗粒质量控制中的应用，其特征在于，在四逆散颗粒的质量控制中增加对柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定，柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法包括如下步骤：采用高效液相色谱法对四逆散颗粒中的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2的含量进行测定。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，色谱柱为inertsilods-3(4.6×250mm,5μm)色谱柱。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，选取的流动相a为乙腈，流动相b为水。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，检测波长为210nm和254nm。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，按下表所示比例进行洗脱：

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述步骤还包括供试品溶液的制备：取四逆散颗粒，研磨，称取样品，置索氏提取器中，精密加入5％氨水的80％甲醇溶液，称定重量，加热使虹吸次数达到3次或以上，取出，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，测定时，吸取供试品溶液，注入液相色谱仪中进行测定。

8.一种四逆散颗粒质量的控制方法，其特征在于，包括对四逆散颗粒中的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2的含量进行测定的步骤。

技术总结本发明公开了一种柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法在四逆散颗粒质量控制中的应用，其特征在于，在四逆散颗粒的质量控制中增加对柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定，柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法包括如下步骤：采用高效液相色谱法对四逆散颗粒中的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2的含量进行测定。本发明的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2含量的测定方法在四逆散颗粒质量控制中的应用，通过对四逆散颗粒中的柴胡皂苷a、柴胡皂苷b2的含量进行测定，进而监控和判断四逆散颗粒的质量。技术研发人员：张春阳,林志展,刘俊,寇卫红受保护的技术使用者：苏州盛德堂医药科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/9/29