南瓜蒂药材及其制剂薄层鉴别方法与流程

本发明涉及分析检测，尤其是涉及一种南瓜蒂药材及其制剂薄层鉴别方法。

背景技术：

1、南瓜蒂为葫芦科植物南瓜cucurbita moschata(duch.ex lam.)duch.ex poir的干燥瓜蒂，具有补中益气，养血安胎，解毒消肿的功效，临床主要用于脾虚气弱，胎动不安；外治疔疮痈肿，烫伤。

2、南瓜蒂主要有黄酮类、四萜类、糖类、有机酸类及挥发性成分。《上海市中药饮片炮制规范》2018年版、《贵州省中药材民族药材质量标准》2003年版等采用性状鉴别、显微鉴别的方式实现南瓜蒂药材、饮片鉴别，未收载薄层鉴别项，不利于药材、饮片的质量控制。由于南瓜蒂配方颗粒是南瓜蒂饮片经一系列工艺制成的，其中一些工艺会破坏原有的性状特征、显微特征，性状鉴别、显微鉴别方法并不适用南瓜蒂提取物、制剂的鉴定。

3、目前还没有有效的薄层鉴别方法用于南瓜蒂药材、制剂的定性鉴别。故亟待建立一种能够将南瓜蒂药材、制剂的鉴别方法，保障南瓜蒂临床用药准确。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供南瓜蒂药材及其制剂薄层鉴别方法。

2、本文术语“包括”、“包含”和“具有”之间可互换使用，旨在表示方案的包含性，意味着所述方案可存在除所列出的元素之外的其他元素。同时应当理解，在本文中使用“包括”、“包含”和“具有”描述，也提供“由……组成”方案。

3、本技术中，术语“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，a和/或b，可以表示:单独存在a，同时存在a和b，单独存在b的情况。其中a,b可以是单数或者复数。

4、本技术中，“至少一个”是指一个或者多个，“多个”是指两个或两个以上。“以下至少一项(个)”或其类似表达，是指的这些项中的任意组合，包括单项(个)或复数项(个)的任意组合。

5、应理解，在本技术的各种实施例中，下述各过程的序号的大小并不意味着执行顺序的先后，部分或全部步骤可以并行执行或先后执行，各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定，而不应对本技术实施例的实施过程构成任何限定。

6、本发明旨在建立南瓜蒂药材及配方颗粒薄层鉴别色谱方法，通过观察供试品薄层色谱图谱中是否与对照药材在相同位置有相同颜色的荧光斑点，用于快速、有效鉴别南瓜蒂药材及其制剂。弥补南瓜蒂定性鉴别的空白，完善南瓜蒂药材及其制剂质量标准，保障用药安全。

7、本发明提供了一种南瓜蒂药材及其制剂薄层鉴别方法，包括：

8、a)取待测样品加水煎煮，过滤，浓缩，第一溶剂提取，蒸干，残渣加水和盐酸加热提取，蒸干，残渣加第二溶剂溶解，得到供试品溶液；所述待测样品为南瓜蒂药材及其制剂；

9、b)取南瓜蒂对照药材，加水煎煮，过滤，浓缩，第一溶剂提取，蒸干，残渣加水和盐酸加热提取，蒸干，残渣加第二溶剂溶解，得到对照药材溶液；

10、c)将供试品溶液和对照药材溶液进行薄层色谱检测，薄层板为硅胶g薄层板；展开剂为正己烷-乙醚-冰醋酸；

11、d)喷以磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点清晰，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

12、本发明提供的南瓜蒂药材及其制剂薄层鉴别方法首先取待测样品，加水煎煮。本发明所述煎煮时间为30min。

13、本发明所述待测样品为南瓜蒂药材、南瓜蒂配方颗粒或南瓜蒂饮片。

14、本发明所述待测样品和水的质量体积比为3g：90～110ml；

15、一些具体实施例中，所述待测样品和水的质量体积比为3g：100ml；

16、煎煮后过滤，浓缩，第一溶剂提取。蒸干，残渣加水和盐酸加热提取，蒸干，残渣加第二溶剂溶解，得到对照药材溶液；所述加热提取为加热回流提取，所述加热回流提取的时间为1.5～2h；更优选为2h。

17、在一个具体实施例中，优选包括：将滤液浓缩到20ml，加正丁醇振摇提取2～3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干。蒸干后，残渣加水20ml，加盐酸2ml，加热回流提取2小时，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

18、取南瓜蒂对照药材，加水煎煮，过滤，浓缩，第一溶剂提取，蒸干，残渣加水和盐酸加热提取，蒸干，残渣加第二溶剂溶解，得到对照药材溶液。

19、本发明所述南瓜蒂对照药材和水的质量体积比为3g：90～110ml；

20、一些具体实施例中，所述南瓜蒂对照药材和水的质量体积比为3g：100ml；

21、煎煮后过滤，浓缩，第一溶剂提取。蒸干，残渣加水和盐酸加热提取，蒸干，残渣加第二溶剂溶解，得到对照药材溶液；所述加热提取为加热回流提取，所述加热回流提取的时间为1.5～2h；更优选为2h。

22、在一个具体实施例中，优选包括：将滤液浓缩到20ml，加正丁醇振摇提取2～3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，蒸干。蒸干后，残渣加水20ml，加盐酸2ml，加热回流提取2小时，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，得到对照药材溶液。

23、将供试品溶液和对照药材溶液进行薄层色谱检测。

24、优选为：吸取供试品溶液，对照药材溶液，分别点于同一硅胶g薄层板上，以展开剂展开，取出，晾干，喷以磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点清晰，紫外光灯下检视。所述紫外光波长为365nm。

25、按照本发明，展开剂为正己烷-乙醚-冰醋酸；

26、在本发明其中一部分优选实施方式中，所述正己烷-乙醚-冰醋酸的体积比为7:3:1。

27、本发明所述薄层板为硅胶g薄层板。可以选自天津思利达科技有限公司可剪裁型薄层层析板，青岛裕民源，青岛海洋化工厂分厂预制硅胶g板。结果表明，耐用性良好。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

28、本发明所述薄层色谱点样量为4～10μl。当对照药材溶液、供试品溶液点样4-10μl，薄层色谱荧光斑点显色清晰，确定南瓜蒂对照药材溶液和南瓜蒂药材点样量为4-10μl。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

29、本发明检视温度为4℃～35℃。本发明的方法对不同温度的适应性较好，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

30、本发明所述检视湿度为32％rh～75％rh。本发明的方法对不同湿度的适应性较好，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

31、本发明提供了一种南瓜蒂药材和甜瓜蒂药材的鉴别方法，采用上述技术方案所述的方法进行鉴别。

32、本发明提供了一种南瓜蒂药材和冬瓜蒂药材的鉴别方法，采用上述技术方案所述的方法进行鉴别。

33、本发明人发现，甜瓜蒂、冬瓜蒂供试品色谱在与南瓜蒂对照药材色谱相应位置上斑点差异较大，本发明建立的南瓜蒂薄层鉴别方法专属性较强，能够实现南瓜蒂药材、提取物、制剂的鉴别。

34、本发明提供了一种南瓜蒂药材及其制剂薄层鉴别方法，包括：a)取待测样品加水煎煮，过滤，浓缩，第一溶剂提取，蒸干，残渣加水和盐酸加热提取，蒸干，残渣加第二溶剂溶解，得到供试品溶液；所述待测样品为南瓜蒂药材及其制剂；b)取南瓜蒂对照药材，加水煎煮，过滤，浓缩，第一溶剂提取，过滤，残渣加水和盐酸加热提取，蒸干，残渣加第二溶剂溶解，得到对照药材溶液；c)将供试品溶液和对照药材溶液进行薄层色谱检测，薄层板为硅胶g薄层板；展开剂为正己烷-乙醚-冰醋酸；

35、d)喷以磷钼酸乙醇溶液，加热至斑点清晰，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。本发明建立的南瓜蒂药材及其制剂薄层鉴别色谱方法，通过观察薄层色谱图谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，作为鉴别点，用以快速、有效鉴别南瓜蒂药材及其制剂。

36、本发明公开了南瓜蒂药材及其制剂薄层鉴别方法构建及应用，本方法稳定性好、精密度高、重现性好、便捷且易于掌握。