基于GC指纹图谱结合化学计量学及多成分定量测定银胡感冒散挥发油质量评价方法与流程

本发明涉及药物分析领域，尤其涉及基于gc指纹图谱结合化学计量学及多成分定量测定银胡感冒散挥发油质量评价方法。

背景技术：

1、中药指纹图谱技术是以中药化学成分为目标，对中药的质量进行系统的、整体的、专属的表征的方法，是评价中药优劣、鉴别真伪、区分物种和确保其一致性和稳定性的有效方法。目前可用于指纹图谱研究的分析方法主要有高效液相色谱法、气相色谱法、液相-质谱联用法和气相-质谱联用法。指纹图谱的分析需要将测定所得到的色谱图导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012)”进行考察和评价，并结合化学计量学，如(clusteranalysis，ca)、主成分分析(principal component analysis，pca)及偏最小二乘判别分析(partial least squares discriminant analysis，pls-da)等分析方法，对复杂的数据进行整合，才能更加直观地反映不同企业和批次间药品质量差异，近几年已在中药研究中广泛应

2、银胡感冒散(yinhu ganmao powder，)是由岗松、大叶桉叶、山银花、连翘、荆芥、柴胡、青蒿、薄荷、广藿香、陈皮、桔梗、艾叶等12味药材组成，具有疏风解表，清热解毒的外用贴剂。通常用于风热感冒所致的恶寒发热，鼻塞喷嚏，咳嗽，头痛，全身不适，其在治疗中，发挥了很大的作用。银胡感冒散挥发油由药粉和药油组成，制备过程中先将各药材用水蒸气蒸馏的方式提取挥发油，将挥发油混匀之后变成药油。山银花、连翘等药材提取完挥发油后剩余的药渣经粉碎和干燥后制成药粉。银胡感冒散挥发油使用前需将药油倒入药粉中，贴至肚脐经过透皮吸收后进入人体起治疗作用。银胡感冒散挥发油的药效物质基础来自多个药味中的多种活性成分，而银胡感冒散挥发油现行的质量标准仅对绿原酸进行含量测定，缺少对银胡感冒散挥发油整体质量进行有效评价的方法，因此有必要对银胡感冒散挥发油建立多成分定量测定的综合评价方法。

3、目前尚未发现gc指纹图谱结合化学计量学及多成分定量测定银胡感冒散挥发油质量评价方法的报道。

技术实现思路

1、为了克服现有技术存在的不足，本发明提供基于gc指纹图谱结合化学计量学及多成分定量测定银胡感冒散挥发油质量评价方法。

2、本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

3、一种银胡感冒散挥发油gc指纹图谱的构建方法，所述方法包括以下步骤：

4、(1)将银胡感冒散挥发油制成供试品溶液；

5、(2)气相色谱测定：取供试品溶液，注入气相色谱仪测定，得到具有共有特征峰的银胡感冒散挥发油指纹图谱；其中，步骤(2)中，色谱条件如下：毛细管色谱柱；程序升温：起始温度为100℃，保持45min，以25℃/min的速率升至180℃，保持20min，最后以25℃/min速率上升至200℃保持10mim；进样口温度200℃；检测器温度为250℃；载气为惰性气体，流速为1.41ml/min，空气流速400ml/min，恒流模式；进样量为1μl，分流进样，分流比为30：1。

6、优选地，所述步骤(1)中，精密量取银胡感冒散挥发油样品0.2ml置于10ml量瓶中，用n,n-二甲基甲酰稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

7、优选地，所述步骤(1)中，所述毛细管色谱柱为安谱cd-624毛细管色谱柱，规格为60m×0.32mm，1.8μm。

8、优选地，所属惰性气体为纯度为99％的氦气。

9、优选地，所述步骤(1)中，所述银胡感冒散挥发油的制备方法包括如下步骤：取岗松、大叶桉叶，粉碎后按1g：15ml加水浸泡，随后水蒸气蒸馏2.5h，收集挥发油，另器保存；青蒿、荆芥、薄荷、连翘、广藿香、艾叶、陈皮，粉碎后按1g：15ml加水浸泡，随手水蒸气蒸馏3h，收集挥发油，将所收集的挥发油混合均匀，即得。

10、优选地，各原料的用量为：岗松6818g、大叶桉叶6818g，青蒿、荆芥、薄荷、连翘、广藿香各45g，艾叶、陈皮各23g。

11、本发明还提供一种基于gc指纹图谱结合化学计量学及多成分定量测定银胡感冒散挥发油的质量评价方法，所述质量评价方法包括以下步骤：

12、(1)将银胡感冒散挥发油制成供试品溶液；

13、(2)气相色谱测定：取供试品溶液，注入气相色谱仪测定，得到具有共有特征峰的银胡感冒散挥发油指纹图谱；其中，步骤(2)中，色谱条件如下：安谱cd-624毛细管色谱柱(60m×0.32mm，1.8μm)；程序升温：起始温度为100℃，保持45min，以25℃/min的速率升至180℃，保持20min，最后以25℃/min速率上升至200℃保持10mim；进样口温度200℃；检测器温度为250℃；载气为氦气(99.99％)，流速为1.41ml/min，空气流速400ml/min，恒流模式；进样量为1μl，分流进样，分流比为30：1；

14、(3)将步骤(2)检测得到的供试品溶液色谱图与上述构建方法得到的指纹图谱比较，计算相似度，结合聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘回归分析、多成分的定量测定，对银胡感冒散挥发油的质量进行评价。

15、与现有技术比较，本发明的方法具有以下优点：

16、1.本发明建立了银胡感冒散挥发油样品的gc指纹图谱，20批次样品中确定了30个共有峰，指认了12个成分。20批银胡感冒散挥发油样品的指纹图谱与对照图谱相似度在0.944～0.992之间，表明各批次的样品一致性良好。指纹图谱通过结合hca、pca、opls-da等化学计量学统计方法分析，20批银胡感冒散挥发油样品分为3类，不同年份的样品聚为一类。通过opls-da分析，筛选影响银胡感冒散挥发油样品的标志成分，结果发现指纹图谱中2号峰(α-蒎烯)、19号峰(薄荷脑)、21峰(α-松油烯)、16号峰、13号峰(芳樟醇)、29号峰、18号峰、15号峰、25号峰、1号峰、26号峰、11号峰、30号峰、8号峰(桉叶油醇)、17号峰、3号峰(莰烯)、9号峰和20号峰可能是引起不同批次银胡感冒散挥发油之间产生差异的主要原因，他们具有一定的标志性作用。

17、2.本发明通过对11种成分的定量分析实验发现，不同批次不同年份的银胡感冒散挥发油样品中各成分的含量差异较大。本发明通过绘制含量聚类热图，样品分类与hca、pca、opls-da等分析得到的聚类结果一致。本发明通过指纹图谱、多成分的定量测定和化学计量统计分析三者结合，更有利于建立更加科学全面的质量评价方法，为银胡感冒散挥发油质量标准的控制与提升提供科学依据。

技术特征：

1.一种银胡感冒散挥发油gc指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(1)中，精密量取银胡感冒散挥发油样品0.2ml置于10ml量瓶中，用n,n-二甲基甲酰稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述毛细管色谱柱为安谱cd-624毛细管色谱柱，规格为60m×0.32mm，1.8μm。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所属惰性气体为纯度为99％的氦气。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述银胡感冒散挥发油的制备方法包括如下步骤：取岗松、大叶桉叶，粉碎后按1g：15ml加水浸泡，随后水蒸气蒸馏2.5h，收集挥发油，另器保存；青蒿、荆芥、薄荷、连翘、广藿香、艾叶、陈皮，粉碎后按1g：15ml加水浸泡，随手水蒸气蒸馏3h，收集挥发油，将所收集的挥发油混合均匀，即得。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，各原料的用量为：岗松6818g、大叶桉叶6818g，青蒿、荆芥、薄荷、连翘、广藿香各45g，艾叶、陈皮各23g。

7.一种基于gc指纹图谱结合化学计量学及多成分定量测定银胡感冒散挥发油的质量评价方法，其特征在于，所述质量评价方法包括以下步骤：

技术总结本发明涉及药物分析领域，尤其涉及基于GC指纹图谱结合化学计量学及多成分定量测定银胡感冒散挥发油的质量评价方法。所述指纹图谱的构建方法包括以下步骤：(1)将银胡感冒散挥发油制成供试品溶液；(2)气相色谱测定，得到具有共有特征峰的银胡感冒散挥发油指纹图谱。本发明通过指纹图谱、多成分的定量测定和化学计量统计分析三者结合，更有利于建立更加科学全面的质量评价方法，为银胡感冒散挥发油质量标准的控制与提升提供科学依据。技术研发人员：罗胜信,许有城,李丹凤,杨汉祥,刘涛,罗春羽受保护的技术使用者：广西源安堂药业有限公司技术研发日：技术公布日：2024/11/4