一种检测呼气中甲醛的组合试剂及检测方法

本发明属于检测，特别涉及一种检测呼气中甲醛的组合试剂及检测方法。

背景技术：

1、肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一，也是致死率最高的癌症之一。目前较常使用的肺癌早筛方法主要有电子计算机断层扫描(ct)、基因检测和肿瘤标志物检测等。但由于早期症状不明显、检测和筛查设备普及率低，以及检测成本高等原因，大多数肺癌患者错失了最佳治疗时机。

2、甲醛已被作为肺癌病人呼出气体中的特征性标志物之一，据统计，肺癌患者呼气中甲醛的浓度中位水平为83ppb，而健康人则为48ppb。由于无创且廉价的检测方式和易于获得检测样本等优势，通过检测呼吸标志物对肺癌患者进行早筛很有帮助。

3、目前检测室内外大气中的甲醛浓度最常用的方法主要有酚试剂分光光度法。酚试剂分光光度法易受到大气中二氧化硫和氮氧化物等的干扰，使得检测结果准确性偏低。且现有的甲醛检测方法能检测的甲醛下限也较高，对肺癌筛查的效果较为一般，有些甚至会对人体产生创口。

4、因此，亟需提供一种对人体无创口，且对低浓度甲醛待测气体的检测准确度高的方法。

技术实现思路

1、本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种检测呼气中甲醛的组合试剂及检测方法。本发明所述检测方法对低浓度甲醛待测气体的检测准确度高，对甲醛的检测下限为ppb级别(例如为10ppb以上)，将本发明的检测方法用于对肺癌筛查，不仅操作简单，成本低廉，无创口，样本易获取，而且检测准确度高。

2、本发明的第一方面提供一种检测呼气中甲醛的组合试剂。

3、具体的，一种检测呼气中甲醛的组合试剂，包括试剂a、试剂b和试剂c；

4、所述试剂a包括ahmt的酸溶液，所述ahmt的结构式为所述ahmt的酸溶液中，ahmt的质量浓度为0.5-3％；

5、所述试剂b为氢氧化钾溶液；

6、所述试剂c包括kio4的碱溶液。

7、优选的，所述试剂a中，所述ahmt的质量浓度为0.5-2％，例如为0.5％、1.5％、2％。

8、优选的，所述试剂a中，所述ahmt的酸溶液中的酸为hcl，所述hcl的浓度为0.2-0.5mol/l。

9、优选的，所述试剂b中，氢氧化钾溶液中氢氧化钾与水的质量比为28-100：100，进一步优选为40-80：100。

10、优选的，所述试剂c中，所述kio4的碱溶液中，所述kio4的质量浓度为1-3％，进一步优选为1-2％，例如为1％、2％、3％。

11、优选的，所述kio4的碱溶液中的碱为氢氧化钾，氢氧化钾的浓度为0.1-0.2mol/l。

12、优选的，一种检测呼气中甲醛的组合试剂，包括试剂a、试剂b和试剂c；

13、所述试剂a包括ahmt的酸溶液，所述ahmt的结构式为所述ahmt的酸溶液中，ahmt的质量浓度为0.5-3％，所述ahmt的酸溶液中的酸为hcl，所述hcl的浓度为0.2-0.5mol/l；

14、所述试剂b为氢氧化钾溶液，氢氧化钾溶液中氢氧化钾与水的质量比为28-100：100；

15、所述试剂c包括kio4的碱溶液，所述kio4的碱溶液中，所述kio4的质量浓度为1-3％，所述kio4的碱溶液中的碱为氢氧化钾，氢氧化钾的浓度为0.1-0.2mol/l。

16、本发明的第二方面提供一种检测呼气中甲醛的组合试剂的制备方法。

17、具体的，一种检测呼气中甲醛的组合试剂的制备方法，包括以下步骤：

18、称取ahmt溶于酸溶液中，加水稀释，得到所述试剂a；

19、将koh溶于水中，得到所述试剂b；

20、将kio4溶于碱溶液中，加热溶解，得到所述试剂c；

21、所述试剂a、试剂b和试剂c构成所述组合试剂。

22、本发明的第三方面提供一种甲醛的检测方法。

23、具体的，一种检测方法，包括以下步骤：

24、步骤(1)：将所述试剂a和试剂b混合，得到第一混合物，然后取待测气体加入到所述第一混合物中，封口，静置，得到第二混合物；

25、步骤(2)：将所述试剂c加入到所述第二混合物中，振荡，封口，静置，得到第三混合物，测得所述第三混合物的紫外-可见光的吸光度数据；

26、步骤(3)：将步骤(1)中的待测气体更换成已知标准系列浓度的甲醛和氮气的混合气体，按照步骤(1)和步骤(2)的过程，得到紫外-可见光吸光度与甲醛浓度的线性方程；

27、步骤(4)：将待测气体所对应的所述第三混合物的紫外-可见光的吸光度数据代入步骤(3)的线性方程中，计算得到所述待测气体中的甲醛浓度。

28、优选的，步骤(1)中，将所述试剂a和试剂b在离心管中混合。

29、优选的，步骤(1)中，所述试剂a和试剂b的体积比为1：(0.9-1.1)，进一步优选为1：(1.0-1.05)。

30、优选的，步骤(1)中，所述待测气体的体积为150-200ml，进一步优选为180-200ml。

31、优选的，步骤(1)中，所述待测气体含甲醛，所述甲醛的浓度为ppb级别。例如为10ppb以上，具体为10-180ppb、10-50ppb。

32、优选的，步骤(1)中，所述待测气体包括环境空气或人体呼出气。环境空气例如为室内空气，用于检测室内甲醛含量。人体呼出气可检测人体呼出气中甲醛含量。

33、优选的，步骤(1)中，所述静置的时间为20-40分钟，进一步优选为30-40分钟。

34、优选的，步骤(2)中，所述试剂c的用量为0.5-1.5ml，进一步优选为0.5-1ml。

35、优选的，步骤(2)中，所述静置的时间为20-40分钟，进一步优选为20-35分钟。

36、优选的，步骤(2)中，测得所述第三混合物的紫外-可见光光谱数据，收集500-600nm处的吸光度数据，进一步收集550nm处的吸光度数据。

37、优选的，步骤(3)中，所述线性方程为：y＝0.00358x+0.00182，相关系数为0.99572，其中，x为甲醛浓度，y为吸光度。

38、优选的，步骤(3)中，所述已知标准系列浓度的甲醛和氮气的混合气体中，甲醛的浓度为10-180ppb，进一步优选为10-170ppb。

39、ahmt与甲醛的反应过程为：

40、ahmt则对甲醛具有较高的专一性。

41、待测气体中甲醛与ahmt在碱性条件下缩合，然后经高碘酸钾氧化成6-巯基-5-三氮杂茂[4,3-b]-s-四氮杂苯紫红色化合物，其色泽深度与甲醛含量成正比，在550nm处有最大吸收峰。

42、本发明所述检测方法对甲醛的检测限低，操作简单，成本低廉，无创口，样本易获取。

43、相对于现有技术，本发明的有益效果如下：

44、本发明所述一种检测呼气中甲醛的组合试剂，包括试剂a、试剂b和试剂c；所述试剂a包括ahmt的酸溶液，所述ahmt的结构式为所述ahmt的酸溶液中，ahmt的质量浓度为0.5-3％；所述试剂b为氢氧化钾溶液；所述试剂c包括kio4的碱溶液。本发明所述组合试剂，通过特定的试剂a、试剂b和试剂c搭配使用，且ahmt的质量浓度为0.5-3％，使得利用所述组合试剂检测低浓度甲醛待测气体时，检测的准确度高，对甲醛的检测下限为ppb级别，将本发明的检测方法用于对肺癌筛查，不仅操作简单，成本低廉，无创口，样本易获取，而且检测准确度高。