短双歧杆菌H4-2胞外多糖在缓解OVA引起的小鼠肠道损伤中的用途

本发明属于食品微生物及免疫调节，主要涉及短双歧杆菌h4-2胞外多糖在缓解ova引起的小鼠肠道损伤中的用途。

背景技术：

1、维持肠道稳态对肠道疾病的发生和发展至关重要。强健的肠道屏障可以有效抵抗外部因

2、素的不利影响。食物过敏是指食物中特定成分引发的不良免疫反应。摄入食物引起的生理功能障碍或组织损伤可导致一系列过敏临床症状，包括呕吐、腹痛和腹泻。卵清蛋白（ova）是蛋清中发现的一种主要蛋白质，是导致蛋清过敏的主要过敏原之一。近年来，与ova 过敏相关的肠道免疫疾病的发病率和死亡率不断上升。目前的治疗方法主要包括避免过敏原和抗组胺干预。尽管这些方法具有一定的治疗效果，但它们会显著影响个人的生活方式，造成不便，同时也会产生潜在的不良副作用。因此，研究天然、无毒、有效的物质来改善 ova 过敏势在必行。

3、双歧杆菌是胃肠道中天然存在的主要细菌群，因其在维持肠道微生物群平衡、降低血清胆固醇水平和血脂浓度以及刺激身体免疫反应方面的作用而得到了广泛的研究。研究表明，双歧杆菌胞外多糖（epss）具有抗氧化、免疫调节和结肠炎修复等作用。已经证实从双歧杆菌中分离的 epss在减轻食物过敏引起的肠道损伤方面的潜力。例如，来自长双歧杆菌的 epss 通过 toll 样受体-2（tlr-2）信号激活调节小鼠的过敏反应，同时抑制嗜酸性粒细胞增殖和 il-4/il-13 基因表达。分离自短双歧杆菌wbbr04 的epss 通过增强肠道屏障完整性来有效隔离过敏原，从而预防食物过敏。尽管这些发现证实了双歧杆菌 eps 可以缓解过敏性肠道疾病，但仍需要全面了解与短双歧杆菌epss相关的对过敏性肠道疾病和肠道屏障损伤的影响。

4、以往研究发现从短双歧杆菌 h4-2中分离的epss具有肠屏障修复的作用，h4-2 产生的 eps-1 是一种富含甘露糖的多糖成分，具有免疫调节活性。为了全面研究 eps-1 在减轻 ova 过敏引起的肠道损伤中的作用和机制，构建了 ova 过敏小鼠肠道黏膜损伤模型，进一步探讨 eps-1 对肠道免疫屏障的特异性作用及其对肠道微生物群的影响。

技术实现思路

1、本发明旨在提供一种短双歧杆菌h4-2胞外多糖在缓解ova引起的小鼠肠道损伤中的用途。其特征在于，从短双歧杆菌 h4-2 的发酵液中提取胞外多糖，随后使用 deae-cellulose 52 阴离子交换柱和 sepharose cl-6b 进行纯化得到 eps-1 组分，所述短双歧杆菌h4-2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京，保藏编号为cgmcc no.31450，保藏日期2024年7月25日。

2、所述eps-1减轻了ova 诱导的小鼠体重减轻、腹泻和过敏反应。

3、所述eps-1能够减少小鼠回肠组织的炎症浸润，不同程度地恢复回肠的完整性，增加杯状细胞和粘蛋白muc2的表达，修复 ova 造成的小鼠肠道物理屏障的损伤。

4、所述eps-1能够抑制 ova 引起的小鼠回肠肥大细胞的脱颗粒，减少肥大细胞的数量和 ige 的表达，恢复失衡的 cd4+t/cd8+t 比例，

5、所述eps-1能够抑制 cd4+t 细胞向 th2 和 th17 细胞的分化，促进cd4+t 细胞向 th1 和 treg 细胞的分化。

6、所述eps-1调节相关细胞因子水平，增加了小鼠回肠组织中 tgf-β 和 inf-γ 的含量，同时显著降低了 his、ige、il-4、il-17a、il-6、il-1β 和 tnf-α 的含量。

7、所述eps-1能够抑制 nf-κb 信号通路的表达，减轻 ova 引起的肠道炎症。

8、所述eps-1 通过增加小鼠肠道菌群的多样性和丰富度，降低  streptococcus 和 candidatus_arthromitus 的相对丰度，增加  lachnospiraceae， alistipes， bacteroides， muribaculaceae， ruminococcus 以及  butyricicoccus 的相对丰度，增加了乙酸、丙酸、丁酸和戊酸的水平，维持肠道微生物稳态。

9、所述eps-1能够通过调节酪氨酸代谢（map00350）、色氨酸代谢（map00380）、花青素的生物合成（map00942）、次级胆汁酸的生物合成（map00121）、蛋氨酸代谢（map00270）

10、以及胆固醇代谢（map04979），增加短链脂肪酸、氨基酸、壬二酸、三丁酸甘油酯、红景天苷、肉豆蔻酸的含量修复 ova 造成的小鼠肠道屏障损伤。

技术特征：

1.短双歧杆菌h4-2胞外多糖在缓解ova引起的小鼠肠道损伤中的用途，其特征在于，从短双歧杆菌 h4-2 的发酵液中提取胞外多糖，随后使用 deae-cellulose 52 阴离子交换柱和 sepharose cl-6b 进行纯化得到 eps-1 组分，所述短双歧杆菌h4-2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京，保藏编号为cgmcc no.31450，保藏日期2024年7月25日。

2.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于：所述eps-1减轻了ova 诱导的小鼠体重减轻、腹泻和过敏反应。

3.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于：所述eps-1能够减少小鼠回肠组织的炎症浸润，不同程度地恢复回肠的完整性，增加杯状细胞和粘蛋白muc2的表达，修复 ova 造成的小鼠肠道物理屏障的损伤。

4.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于：所述eps-1能够抑制 ova 引起的小鼠回肠肥大细胞的脱颗粒，减少肥大细胞的数量和 ige 的表达，恢复失衡的 cd4+t/cd8+t 比例。

5.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于：所述eps-1能够抑制 cd4+t 细胞向 th2和 th17 细胞的分化，促进cd4+t 细胞向 th1 和 treg 细胞的分化。

6.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于：所述eps-1调节相关细胞因子水平，增加了小鼠回肠组织中 tgf-β 和 inf-γ 的含量，同时显著降低了 his、ige、il-4、il-17a、il-6、il-1β 和 tnf-α 的含量。

7.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于：所述eps-1能够抑制 nf-κb 信号通路的表达，减轻 ova 引起的肠道炎症。

8.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于：所述eps-1 通过增加小鼠肠道菌群的多样性和丰富度，降低 streptococcus和candidatus_arthromitus 的相对丰度，增加lachnospiraceae，alistipes，bacteroides，muribaculaceae，ruminococcus 以及butyricicoccus 的相对丰度，增加了乙酸、丙酸、丁酸和戊酸的水平，维持肠道微生物稳态。

9.根据权利要求 1 所述的用途，其特征在于：所述eps-1能够通过调节酪氨酸代谢（map00350）、色氨酸代谢（map00380）、花青素的生物合成（map00942）、次级胆汁酸的生物合成（map00121）、蛋氨酸代谢（map00270）以及胆固醇代谢（map04979），增加短链脂肪酸、氨基酸、壬二酸、三丁酸甘油酯、红景天苷、肉豆蔻酸的含量修复 ova 造成的小鼠肠道屏障损伤。

技术总结本发明公开了从短双歧杆菌H4‑2中分离的富含甘露糖的胞外多糖在制备缓解OVA引起的小鼠肠道损伤的药物中的用途。本发明提供了短双歧杆菌H4‑2胞外多糖多糖的新用途，EPS‑1干预能有效缓解OVA引起的小鼠过敏反应，通过增加小鼠回肠组织中的粘蛋白含量和杯状细胞计数来改善肠道物理屏障。而且，EPS‑1干预通过恢复不平衡的CD4+T/CD8+T比率、调节Th1/Th2和Th17/Treg细胞平衡以及抑制NF‑κB信号通路的激活来维持免疫屏障的完整性。此外，EPS‑1干预通过增加Ruminococcus、Butyricicoccus和Muribaculaceae的丰度，同时减少Streptococcus和Candidatus Arthromitus的丰度，维持了肠道微生物群屏障内的稳态。最后，EPS‑1通过提高酪氨酸、蛋氨酸、色氨酸、甘油三酯和红景天苷等代谢产物的含量，间接减轻了OVA诱导的肠道损伤。技术研发人员：孟祥晨,牛萌萌,郭欢新,于航,马梁雨,杨硕,苏倩,陈思远,李岩,李巧慧受保护的技术使用者：东北农业大学技术研发日：技术公布日：2024/12/2