一种注射用氯诺昔康的质量检测方法与流程

本发明涉及化学物质的检测方法，尤其是注射用氯诺昔康的质量检测方法，属于药品检测。

背景技术：

1、注射用氯诺昔康主要具有一定镇痛作用，属于非甾体抗炎药，通过抑制环氧化酶而减少前列腺素合成，起到一定镇痛以及抗炎作用。对前列腺素的镇痛作用是属于外周性镇痛效果，对中枢神经系统也具有一定作用，同样也起到镇痛功效，除镇痛外氯诺昔康还具有一定的抗炎的作用，主要是能够缓解非感染性的炎症。在临床上注射用氯诺昔康主要可以用于急性期疼痛的缓解，比如通常用于手术后的短期疼痛治疗。注射用氯诺昔康的主要成份为氯诺昔康，在使用氯诺昔康时需要注意，如果患者有溃疡或者胃肠道出血的情况，不建议使用，如果患者有其它出血性疾病或者血小板减少的情况，同样也不建议使用。氯诺昔康可以通过抑制环氧化酶活性进而抑制前列腺素合成，还能激活阿片神经肽系统，具有较强的抗炎、镇痛的作用。

2、氯诺昔康的化学名称为：6-氯-4-羟基-2-甲基-3-(2-吡啶氨基甲酰基)-2h-噻吩并[2，3-e]-1，2-噻嗪-1，1-二氧化物。在完成注射用氯诺昔康的制备后，需要对注射用氯诺昔康产品进行质量检测，质量检测物质包括主成份含量和有关物质的量，主成份为氯诺昔康，有关物质为2-氨基吡啶、氧代(2-吡啶氨基)-醋酸(简称hn-10002)、5-氯-3-[(甲氨基)磺酰基]硫代-2-赛酚羧酸(简称hn-10004)等等，有关物质也称为杂质。主成份含量和杂质的量关系到产品质量的高低，以及产品效果。目前，针对注射用氯诺昔康中主成份含量和杂质的量的各项检测方法，还未能够准确、灵敏地检测出注射用氯诺昔康中主成份含量和杂质的量，保障高质量的注射用氯诺昔康合格产品的生产。

技术实现思路

1、本发明需要解决的技术问题是提供一种注射用氯诺昔康的质量检测方法，解决现有技术中未能够准确对注射用氯诺昔康的质量进行检测的问题，采用高效液相色谱法通过高效液相色谱仪设置不同的色谱检测条件及检测参数可以准确检测出注射用氯诺昔康中的含量和有关物质的量，确保更好地控制产品质量。

2、为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

3、一种注射用氯诺昔康的质量检测方法，质量检测包括含量检测和有关物质检测，所述质量检测采用高效液相色谱法进行检测；含量检测中检测的化学物质包括：氯诺昔康，有关物质检测中检测的化学物质包括：2-氨基吡啶、hn-10004、hn-10002、hn-33144；

4、含量检测包括以下色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.1mol/l醋酸钠溶液-甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为375nm，洗脱方式为等度洗脱；

5、有关物质检测包括以下色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以1％醋酸铵溶液-10％四丁基氢氧化铵溶液-甲醇为流动相a，以乙腈-三乙胺为流动相b；流速为1.0ml/min，检测波长为280nm，洗脱方式为梯度洗脱。

6、进一步地，0.1mol/l醋酸钠溶液与甲醇的体积比为5：1。

7、进一步地，含量检测具体操作，包括以下步骤：

8、a1.甲醇-浓氨溶液的制备：取甲醇500ml，加水500ml与浓氨溶液20ml，混匀备用，即得甲醇-浓氨溶液；

9、a2.取注射用氯诺昔康10瓶，分别加甲醇-浓氨溶液适量，振摇使其完全溶解，再分别转移至100ml量瓶中，用甲醇-浓氨溶液适量洗涤瓶内壁及瓶塞，洗液并入量瓶中，加甲醇-浓氨溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；

10、a3.取氯诺昔康对照品适量，精密称定，加甲醇-浓氨溶液制成每1ml中约含86μg的溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；

11、a4.按外标法以峰面积分别计算氯诺昔康的含量。

12、进一步地，在步骤a4中，含量计算公式：

13、

14、进一步地，含量限度：每瓶含氯诺昔康(c13h10cln3o4s2)应为8.34mg-8.86mg。

15、进一步地，流动相a中1％醋酸铵溶液：10％四丁基氢氧化铵溶液：甲醇的体积比为1000：6：5；流动相b中乙腈：三乙胺的体积比为70：30。

16、进一步地，梯度洗脱程序：0min，70％a，30％b；10min，80％a，20％b；30min，70％a，30％b；60min，60％a，40％b；70min，70％，30％b。

17、进一步地，有关物质检测具体操作，包括以下步骤：

18、b1.醋酸钠-甲醇混合溶液的制备：取醋酸钠5g，加水400ml使溶解，加甲醇600ml与冰醋酸0.1ml，混匀备用，即得醋酸钠-甲醇混合溶液；

19、b2.取注射用氯诺昔康2支，至10ml量瓶中，加醋酸钠-甲醇混合溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；

20、b3.精密称取2-氨基吡啶、hn-10004、hn-10002、hn-33144与替诺昔康、氯诺昔康对照品各8mg，至10ml量瓶中，加醋酸钠-甲醇混合溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置于100ml量瓶中，加醋酸钠-甲醇混合溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；

21、b4.分别精密量取10μl供试品溶液和对照品溶液，分别注入液相色谱仪中检测，记录色谱图；

22、b5.按外标法以峰面积分别计算2-氨基吡啶、hn-10004、hn-10002、hn-33144的量。

23、进一步地，在步骤b5中，有关物质计算公式：

24、

25、总杂质＝2-氨基吡啶％+hn-10004％+hn-10002％+hn-33144％+其他杂质和％。

26、进一步地，按外标法以峰面积计算各有关物质相对于氯诺昔康实际含量的百分含量，含2-氨基吡啶、hn-10004、hn-10002、hn-33144，其他单杂、总杂质分别不得过0.1％、0.1％、0.1％、0.2％、0.1％、0.4％。

27、由于采用了上述技术方案，本发明取得的技术进步是：

28、本发明的方法能够准确地检测出含量和有关物质，确保产品质量，检测方法灵敏度高，分离度好。具体的，本发明主要以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，针对不同的检测物质使用不同的流动相、不同的洗脱方式、不同的检测波长相互结合进行检测，分别能够准确、灵敏地检测出注射用氯诺昔康中的氯诺昔康、2-氨基吡啶、hn-10004、hn-10002、hn-33144的量。

29、首先，本发明采用的流动相物质及流动相组合能够更好的将注射用氯诺昔康中的氯诺昔康、2-氨基吡啶、hn-10004、hn-10002、hn-33144分离，检测出物质的量，从而获得相应的色谱图，准确度高。其次，本发明采用的梯度洗脱方式和洗脱程序能够更好地将注射用氯诺昔康中的氯诺昔康、2-氨基吡啶、hn-10004、hn-10002、hn-33144分离，避免出现干扰，准确检出物质的量，从而获得相应的色谱图，基线分离，分离度好。最后，本发明通过设置相应的检测波长，准确检测出注射用氯诺昔康中的氯诺昔康、2-氨基吡啶、hn-10004、hn-10002、hn-33144物质，避免检测波长以外的物质干扰，从而获得相应的色谱图，基线分离，分离度好。