从亚硝胺纯化利福平的方法与流程

本发明涉及利福平中的遗传毒性杂质的量的控制，特别是亚硝胺的量的控制。特别地，本发明涉及用于制备基本上不含1-甲基-4-亚硝基哌嗪(menp)杂质的利福平的方法。本发明还涉及基本上不含1-甲基-4-亚硝基哌嗪(menp)杂质的利福平。

背景技术：

0、现有技术

1、亚硝胺是具有通式r1r2n-n＝o的有机化合物，由ema(欧洲药品管理局(europeanmedicines agency))ich m7(r1)(评估和控制药物中的dna反应性(诱变性)杂质以限制潜在致癌风险)分类为1类杂质，“已知诱变性致癌物”，并由国际癌症研究机构(international agency for research on cancer，iarc)分类为2a-“可能的致癌物”。

2、这样的化合物是多种合成方法的已知副产物，例如在亚硝化剂(例如酸性条件下的亚硝酸盐)和胺(仲、叔或季)的存在下，并且可以是难以分离的：因此，即使在纯化之后，成品中也可存在这些痕量杂质。

3、已经在许多用于人的活性药物成分中发现痕量亚硝胺。近年来，这导致全球监管机构(例如美国食品和药品管理局(food and drug administration，fda)和ema)对这些杂质的耐受阈值施加了严格的限制。因此，持有包含化学或生物来源的活性药物成分(activepharmaceutical ingredient，api)的药物的销售许可的公司需要对其药物产品及其生产方法进行越来越准确和严格的审查，以防止或限制亚硝胺含量。监管机构对遗传毒性杂质(特别是对于亚硝胺)问题的关注，代表了旨在保证患者安全和健康的预防方法(符合ema条例(ec)no 726/2004第5条第3款修订所引入的措施，以限制用于人用途的药品中亚硝胺的存在)。

4、利福平(如下图所示)属于利福霉素(rifamycin)类并且是抗生素，主要用于治疗结核病，以及治疗严重感染，例如血流感染和麻风。

5、例如，利福平可以从利福霉素-s开始来获得，通过通常不分离的嗪(oxazino)中间体，并随后与1-氨基-4-甲基哌嗪(1-amino-4-methylpiperazine，1-amp)反应以获得利福平(参见下面的合成方案)。这种类型的合成方法在文献中是已知的，参见例如us4174320和cn101486716。

6、

7、最近在市售的利福平批次中已经检测到亚硝胺(特别是1-甲基-4-亚硝基哌嗪(menp))的痕迹。已知这种遗传毒性杂质的存在来源于利福平生产方法中1-amp的使用，以及来源于利福平本身降解产物的氧化。

8、fda建议menp的最大日摄入量为96ng/天。特别是对于利福平，根据该数据，并考虑对应于600mg/天的最大日剂量，活性成分中认为可接受的最大menp阈值对应于百万分之0.16(ppm；sandrine and mike frick,n-nitrosamines and tuberculosismedicines rifampicin and rifapentine,february 2021)。

9、事实上，在2020年八月，fda发布了这样的说明，其中将利福平中menp的可接受限度设定为0.16ppm，然而规定接受包含低于5ppm menp的临时分布的利福平，以维持患者可获得这些挽救生命的药物。

10、据申请人所知，用于获得包含等于或低于0.16ppm的量的menp的利福平的方法在本领域中是未知的。

11、专利文献cn111018887描述了利福平纯化方法，其允许获得纯度约为99.5％并且单一杂质含量低于0.1％的利福平。然而，该文献完全没有提及关于遗传毒性杂质(特别是menp)的存在，并因此也没有提及关于对其量的控制。

技术实现思路

1、因此，本申请人已经解决了获得基本上不含1-甲基-4-亚硝基哌嗪(menp)的利福平，并且特别是具有等于或低于0.16ppm的menp含量的利福平的目标。

2、本申请人还已经解决了开发从遗传毒性物质(特别是从1-甲基-4-亚硝基哌嗪(menp))中纯化利福平的方法的目标。

3、因此，在第一方面中，本发明涉及用于制备基本上不含1-甲基-4-亚硝基哌嗪(menp)的利福平，并且优选具有等于或低于0.16ppm的menp含量的利福平的方法，所述方法包括以下步骤：

4、a)提供粗制利福平在有机溶剂中的混合物，其中所述混合物是通过将固体粗制利福平溶解在有机溶剂中获得的；

5、b)将所述混合物用ph为2至7的水溶液洗涤，以获得有机层和水层，然后将其分离；

6、c)将至少一种抗氧化剂添加至从步骤b)获得的经分离的有机层；

7、d)在惰性气氛下蒸馏所述有机溶剂；

8、e)在惰性气氛下结晶；以及

9、f)在惰性气氛下分离由此获得的利福平。

10、本发明还涉及这样的利福平，其具有1-甲基-4-亚硝基哌嗪(menp)的含量等于或低于0.16ppm。

技术特征：

1.用于制备基本上不含1-甲基-4-亚硝基哌嗪(menp)的利福平的方法，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述利福平包含的1-甲基-4-亚硝基哌嗪的量低于或等于0.16ppm。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述利福平包含的1-甲基-4-亚硝基哌嗪的量为0.01ppm至0.16ppm，优选0.01ppm至0.10ppm。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中步骤a)中使用的有机溶剂选自极性和非极性非质子溶剂，例如二氯甲烷、乙酸乙酯、2-甲基四氢呋喃、甲基异丁基酮、甲苯及其混合物。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述有机溶剂是非极性非质子溶剂，优选二氯甲烷。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述至少一种抗氧化剂选自抗坏血酸、抗坏血酸-2-葡糖苷、抗坏血酸-6-辛酸酯、抗坏血酸-6-棕榈酸酯、半胱氨酸、焦亚硫酸钠、没食子酸丙酯、丁基羟基茴香醚、丁基羟基甲苯(bht)及其组合。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述抗氧化剂是抗坏血酸。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述惰性气氛是基本上氮饱和或氩饱和的气氛，或者在真空下，优选地o2的量低于3％体积。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中分离的步骤f)是通过过滤进行的。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其还包括步骤f’)，其中将步骤f)中获得的利福平用非质子极性溶剂洗涤，优选地用丙酮洗涤，并分离。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，还包括步骤g)，其中将从步骤f)或从步骤f’)获得的利福平进行干燥。

12.可通过根据权利要求1至11所述的方法获得的利福平，其特征在于包含的1-甲基-4-亚硝基哌嗪的量低于或等于0.16ppm。

13.利福平，其特征在于包含的1-甲基-4-亚硝基哌嗪的量低于或等于0.16ppm。

技术总结本发明涉及利福平中的遗传毒性杂质的量的控制，特别是亚硝胺的量的控制。特别地，本发明涉及用于制备基本上不含1‑甲基‑4‑亚硝基哌嗪(MeNP)杂质的利福平的方法。本发明还涉及基本上不含1‑甲基‑4‑亚硝基哌嗪(MeNP)杂质的利福平。技术研发人员：纳特瓦尔·潘查尔,马杜·萨达希瓦亚,维努·巴布·戈里帕蒂,桑贾尼·万古乐,桑迪普·帕瓦尔受保护的技术使用者：欧伦股份公司技术研发日：技术公布日：2024/12/23