一种同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法与流程

本发明属于药物分析，为提高头孢洛林酯合成的效率和产品质量，建立一种同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法。

背景技术：

1、头孢洛林酯为第五代头孢菌素类药物，对革兰氏阳性菌包括耐甲氧西林葡萄球菌感染、多重耐药肺炎链球菌感染及常见的革兰氏阴性菌的感染等具有良好的抗菌活性。目前，注射用头孢洛林酯于2010年10月29号经美国fda批准通过，由阿斯利康进行生产，在国内均无申报及已上市产品。在细菌耐药问题是世界难题的今天，头孢洛林酯作为抗多药耐药菌的新型药物，具有广泛的应用前景。

2、头孢洛林酯制备过程的简单叙述(仅涉及本发明中要检测的六种中间体)：

3、第一步反应，从3-羟基头孢用制备cfms

4、

5、第二步反应，制备ct-3

6、

7、第三步反应，制备ct-3m

8、

9、第四步反应，制备7-aptm

10、

11、第五步反应，制备7-atm

12、

13、从上面上述发现：头孢洛林酯合成步骤多，工艺比较复杂。我们要求对每一步反应产生的中间体进行监控。通过观察其已反应(或剩余)及新产生物质的相对含量，以确定该步反应是不是充分，能否进行下一步投料。每部反应都会残留少量中间体或出现一些副产物，全应作为杂质，在该工艺下给予控制，从而保证最终产品的质量。

14、反应中涉及到的3-羟基头孢、cfms、ct-3、ct-3m、7-aptm和7-atm均定为中间体和产物中的杂质予以控制。

15、在现有的制备过程中，往往考虑只是比较“粗糙”的中间体控制，为贪图方便，一度试图采用等度法洗脱，结果造成监控效果很不理想，精确度非常差。而采用不同的分析方法则会大大降低生产效率。

技术实现思路

1、本发明旨在克服上述缺陷，提供一种无需更换不同的分析方法以应对不同的样品，能在同一张图谱上显示六种物质在反应过程中的变化情况，具有简便、准确、快速、一目了然的优点的，对于保证头孢洛林酯产品质量，提高合成工作效率都也有很大帮助的同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法。

2、本发明提供的一种同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法，采用高效液相色谱法，其特征在于：

3、上述高效液相色谱法的流动相a和流动相b为不同组成的醋酸盐缓冲液-乙腈；

4、上述流动相a为0.04-0.12mol/l醋酸盐缓冲液-乙腈，

5、其中，醋酸盐缓冲液与乙腈的体积比为99-85：1-15；

6、上述流动相b为0.04-0.12mol/l醋酸盐缓冲液-乙腈，

7、其中，醋酸盐缓冲液与乙腈的体积比为10-25：90-75；

8、洗脱方式：梯度洗脱。

9、进一步地，本发明提供的一种同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法，其特征还在于：

10、上述流动相a为0.08mol/l醋酸盐缓冲液-乙腈,

11、醋酸盐缓冲液与乙腈的体积比为95:5；

12、上述流动相b为0.08mol/l醋酸盐缓冲液-乙腈,

13、醋酸盐缓冲液与乙腈的体积比为18:82。

14、进一步地，本发明提供的一种同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法，其特征还在于：

15、上述梯度洗脱程序如下：

16、 时间(min) a(％) b(％) 0 90-100 10-0 5 90-100 10-0 10 38～46 62～54 20 38～46 62～54 25 24～30 76～70 40 24～30 76～70 41 90-100 10-0 50 90-100 10-0

17、进一步地，本发明提供的一种同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法，其特征还在于：

18、上述梯度洗脱程序如下：

19、 时间(min) a(％) b(％) 0 100 0 5 100 0 10 42 58 20 42 58 25 27 73 40 27 73 41 100 0 50 100 0

20、进一步地，本发明提供的一种同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法，其特征还在于：

21、上述高效液相色谱法的色谱柱选用waters symmetry shield rp185μm4.6*250mm。

22、进一步地，本发明提供的一种同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法，其特征还在于：

23、上述高效液相色谱法的流速为1.0ml/min，检测波长230nm，柱温30℃，进样量20μl。

24、此外，本发明提供的同时检测头孢洛林酯制备过程中多种中间体的方法在同时观察3-羟基头孢、cfms、ct-3、ct-3m、7-aptm和7-atm在反应过程中的含量变化中的应用。

25、本发明的作用和效果：

26、于同一张图谱上显示六种物质在整个反应过程中的变化情况，且具有简便、准确、快速特点的分析方法，能提供较为可靠的数据，以达到有效优化合成工艺，保证头孢洛林酯产品质量的目的。