一种抗氧化组合物及其应用的制作方法

本发明涉及是食品、保健食品及医药领域，具体涉及一种具有抗氧化功能的包含原花青素、人参皂苷rb1和维生素c组合物。

背景技术：

1、老化是随着年龄的增长发生的变化，伴随着疾病和死亡。自由基生成累积会导致细胞损伤发生老化。自由基导致的氧化损伤会导致与年龄增长相关的疾病如阿尔茨海默症和帕金森的发生。人体中的抗氧化防御系统是由许多内源性的抗氧化剂构成，能抵御自由基对神经系统细胞带来的氧化损伤，当抗氧化剂缺乏时就会导致氧化损伤的发生，从而导致老化的发生。

2、自由基是机体在代谢过程中产生的，在正常生理情况下，机体内的器官、组织及细胞都会产生抗氧化酶。这些抗氧化酶积累后可以清除体内的自由基，使自由基的产生和清除达到平衡状态。当机体条件发生异常时，这种平衡遭到破坏，大量的自由基积累导致细胞功能的改变，使机体遭受氧化损伤，导致动脉硬化、衰老、心血管疾病等健康问题的发生。补充具有抗氧化功能的食品，可清楚机体内多余的自由基，阻断脂质过氧化反应。因此具有抗氧化功能的食品受到了广泛关注。

3、葡萄籽提取物中的原花青素含量达95％，大量研究证明原花青素能提高机体内抗氧化酶(超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶)的活性来提高抗氧化能力。同时原花青素还能降低体内丙二醛的含量证明其具有抗氧化的效果。

4、人参皂苷rg1是我国传统中药三七的主要有效成分之一，其具众多的药理作用。研究报道人参皂苷rg1能有效提高红细胞、肝和骨骼肌sod的活性，降低mda含量，增强机体抗氧化能力来清除机体中过多的自由基及预防自由基的损伤，其机制是抑制自由基对线粒体膜结构及线粒体dna损伤性攻击的作用靶点。

5、维生素c又名抗坏血酸，是一种重要的水溶性维生素，作为一种强抗氧化剂，能够清除机体中的自由基。其抗氧化作用主要是通过可逆的脱氢反应来完成，维生素c可以与o2－、hoo－及oh－迅速反应，生成半脱氢抗坏血酸，清除单线态氧，还原硫自由基。维生素c的抗氧化功能可用于感冒、抗衰老、抗过敏、抗高血压及防癌抗癌等。人体内血浆遭受各种氧化损伤时，维生素c可以构成第一道抗氧化防线，能够防止自由基启动物(aaph)产生的水溶性过氧化氢自由基引起脂质过氧化的物质，并能有效地防止低密度脂蛋白胆固醇氧化，延缓动脉粥样硬化的进展。

6、目前还未见包含原花青素、人参皂苷rg1及维生素c的组合物的抗氧化性能的报道。

技术实现思路

1、本发明提供了一种包含原花青素、人参皂苷rg1及维生素c的、具有协同增效抗氧化作用的组合物。此外，本发明还提供上述组合物在制备用于抗氧化、抗衰老的药物、保健食品中的用途。

2、发明人经过深入研究发现，原花青素、人参皂苷rg1及维生素c以一定比例组合，能够在不同的抗氧化机制中显示协同增效作用，从而完成了本发明。

3、即，本发明包括：

4、1.一种抗氧化组合物，其包含作为活性成分的原花青素、人参皂苷rg1以及药学可接受的载体，其中，该组合物中，所述原花青素和人参皂苷rg1的重量比为1:1～2.5。

5、2.根据项1所述的抗氧化组合物，其中，所述原花青素和人参皂苷rg1的重量比为1:1.5。

6、3.根据项1所述的抗氧化组合物，其中，该组合物中，所述原花青素和人参皂苷rg1是唯一提高血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性的活性成分。

7、4.一种抗氧化组合物，其包含作为活性成分的维生素c、人参皂苷rg1以及药学可接受的载体，其中，该组合物中，所述维生素c和人参皂苷rg1的重量比为1:1～5。

8、5.根据项4所述的抗氧化组合物，其中，所述维生素c和人参皂苷rg1的重量比为1:2。

9、6.根据项1所述的抗氧化组合物，其中，该组合物中，所述维生素c和人参皂苷rg1是唯一提高血清中提高血清中的超氧化物歧化酶活性的活性成分。

10、7.一种抗氧化组合物，其包含作为活性成分的原花青素、人参皂苷rg1、维生素c以及药学可接受的载体，其中，该组合物中，所述原花青素和人参皂苷rg1的重量比为1:1～2.5，且所述维生素c和人参皂苷rg1的重量比为1:1～5。

11、8.根据项7所述的抗氧化组合物，其中，所述原花青素和人参皂苷rg1的重量比为1:1.5，且所述维生素c和人参皂苷rg1的重量比为1:2。

12、9.根据项7所述的抗氧化组合物，其中，该组合物中，所述原花青素和人参皂苷rg1是唯一提高血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性的活性成分，且所述维生素c和人参皂苷rg1是唯一提高血清中提高血清中的超氧化物歧化酶活性的活性成分。

13、10.根据项1～9中任一项所述的抗氧化组合物在制备用于抗氧化的药物或保健食品中的用途。

14、本发明的组合物可以是口服剂。所述口服剂可以是例如胶囊，片剂、口服液、滴丸、粉剂、颗粒剂。本发明的组合物中可包含辅料或其他药学可接受的载体。所述的辅料可以为硬脂酸镁、木糖醇、赤藓糖醇、果汁或者柠檬酸中的一种或几种。

15、发明的具体实施方式

16、下面结合具体实施方式对本发明进行详细的说明。在无冲突的情况下，本说明书中的科学术语具有本领域技术人员通常理解的含义，如有冲突应以本说明书中的定义为准。

17、在本说明书中，原花青素是指下述化学式1所述的化合物。

18、【化学式1】

19、

20、上述原花青素是从葡萄籽中提取获得，用乙醇提取葡萄籽后再对提取后得葡萄籽提取物纯化得到原花青素。

21、在本说明书中，人参皂苷rg1是指下述化学式2所述的化合物。

22、【化学式2】

23、

24、上述人参皂苷rg1是已知化合物，可以采用本技术领域已知的方法来制备，例如可以通过从三七、人参和西洋参中的总皂苷制备获得。

25、在本说明书中，维生素c是指下述化学式3所述的化合物。

26、【化学式3】

27、

28、上述维生素c是已知化合物，可以采用本领域技术人员已知的任何方法获得。

29、本发明的抗氧化组合物中，可以包含其它原料，也可以不包含其它原料。在本发明的抗氧化组合物中包含其它原料的情况下，从更好地发挥协同增效作用的角度考虑，所述原花青素、人参皂苷rg1和维生素c这三者的含量优选为1重量份以上、更优选为5重量份以上、更优选为10重量份以上、更优选为50重量份以上、更优选为80重量份以上、更优选为90重量份以上、更优选100重量份(即所述抗氧化组合物中仅包含这三种成分)，以该抗氧化组合物中包含的所有抗氧化的活性成分为100重量份计。

30、所述原花青素、人参皂苷rg1和维生素c的含量均可以采用高效液相色谱法测定。

31、本发明的抗氧化组合物中，可以包含其它抗氧化活性成分，也可以不包含抗氧化活性成分(即，以原花青素、人参皂苷rg1和维生素c作为唯一抗氧化活性成分)。

32、另一方面，发明人发现本发明的抗氧化组合物具有显著的抗氧化效果。因此，本发明也提供本发明的抗氧化组合物在制备用于抗氧化的药物或保健食品中的用途。

33、本发明的抗氧化组合物中可以包含药物可接受的载体，例如辅料。对于本发明的药物组合物中的辅料，没有特殊限制，例如可以使用本技术领域通常用于药品或保健品的辅料。具体地，所述辅料为淀粉、硬脂酸镁、木糖醇、赤藓糖醇、果汁或者柠檬酸中的一种或几种等。

34、对本发明的抗氧化组合物的剂型没有特殊限制，例如可以是口服剂。所述口服剂型可以是液体剂型，也可以是固体剂型。所述口服剂型可以为例如如胶囊，片剂、口服液、滴丸、粉剂、颗粒剂。

35、制备口服固体制剂，可以向主药中加入适当的粘合剂、着色剂等，按照常规方法制成胶囊、片剂、包衣片剂颗粒剂等。可加入山梨糖醇、淀粉、微晶纤维素等作为赋形剂。二氧化硅、硬脂酸镁可作为润滑剂。

36、制备口服液体制剂，可向其中加入甜味剂如安赛蜜、三氯蔗糖等、苦味遮盖剂糊精等、果汁等调和口感。

37、将本发明的抗氧化组合物施用于对象，具有抗氧化、延缓衰老的作用。所述对象可以是哺乳动物，例如可以是人、大鼠、兔、羊、猪、牛、猫、狗、猴等，优选为人。

38、本发明的组合物，可以口服施用。施用量为成人每日1μg～20000mg、优选10μg～2000mg、更优选100μg～1000mg、更优选1mg～500mg，更优选10mg～500mg(以原花青素、人参皂苷rg1和维生素c总量计)，上述用量可分为每日1～3次施用。

39、实施例

40、下面给出的实施例，为了便于理解本发明，并不以任何方式限定本发明的权利要求的范围。

41、实施例1原花青素、人参皂苷rg1、以及原花青素和人参皂苷rg1组合物对d-半乳糖模型小鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，gsh-px)活性的影响

42、制备了如下试剂：原花青素(浓度为50mg/ml，水溶液)、人参皂苷rg1i、人参皂苷rg1ii、人参皂苷rg1iii、人参皂苷rg1iv、人参皂苷rg1v(浓度分别为25mg/ml、50mg/ml、75mg/ml、100mg/ml、125mg/ml，水溶液)、组合物1-5(原花青素浓度均为50mg/ml+人参皂苷rg1浓度分别为25mg/ml、50mg/ml、75mg/ml、100mg/ml、125mg/ml，水溶液)。

43、使用上述原花青素、人参皂苷rg1i-v和组合物1-5，对d-半乳糖衰老模型小鼠进行分组给药。具体步骤如下：

44、小鼠适应喂养一周后，选取25-30g小鼠130只，除正常组外，其余动物每天腹腔注射d-半乳糖1.2g/kg造模，注射量为0.1ml/10g，每日1次，连续造模4周后，随机分组为模型对照组、原花青素组、人参皂苷rg1i-v组和组合物1-5组共12组，每日继续注射d-半乳糖的同时，各给药组灌胃相应剂量的受试样品，灌胃量均为1ml/kg·bw，模型对照组和正常组给予等量生理盐水灌胃。连续给药30d后，在末次给药2h后，处死小鼠，检测小鼠血清中的gsh-px酶活性。

45、同时计算联合用药指数ci＝(a×b)/ab。ci＜1时，表明联用有协同作用；ci≤0.8时，表明协同作用非常显著。其中，

46、c＝正常组gsh-px值-模型对照组gsh-px值，代表给药后gsh-px值恢复的上限；

47、t＝各给药组gsh-px值-模型对照组gsh-px值，代表给药后gsh-px值实际恢复的水平；

48、a、b分别表示单独给药原花青素或人参皂苷rg1i-v时的(1+t/c)值；

49、ab表示给药组合物1-5时的(1+t/c)值。

50、上述原花青素、人参皂苷rg1i-v和组合物1-5对小鼠血清中gsh-px值的影响、以及组合物1-5的联合用药指数如表1所示。

51、表1原花青素、人参皂苷rg1i-v和组合物1-5对小鼠血清中gsh-px值的影响(x±s，n＝10)

52、 组别 gsh-px(u/mg) ci 正常组 125.24±18.06 / 模型组 74.40±9.45 / 原花青素 81.31±12.40 / 人参皂苷rg1i 80.68±10.14 人参皂苷rg1ii 83.61±12.72 / 人参皂苷rg1iii 85.69±14.63 / 人参皂苷rg1iv 92.02±13.80 / 人参皂苷rg1v 96.58±8.43 / 组合物1 88.02±8.46 1.01 组合物2 95.65±10.52 0.94 组合物3 119.31±12.99 0.73 组合物4 120.02±10.44 0.81 组合物5 121.42±9.17 0.85

53、由上述表1的结果可知，本发明的组合物1、组合物2、组合物3、组合物4、组合物5能够显著增加小鼠血液中gsh-px的活性。其中，组合物2、3、4和5的联合用药指数均小于1，表明原花青素：人参皂苷rg1重量比在1:1、1:1.5、1:2和1:2.5时具有协同作用。而且，组合物3的协同指数小于0.8，表明原花青素:人参皂苷rg1在1:1.5时，对提高小鼠血清中gsh-px酶活性的协同作用非常显著。gsh-px在代谢中发挥着抗氧化剂的作用，通过催化谷胱甘肽还原过氧化氢能保护生物膜不受氧化损害。gsh-px能结合体内的有害物质自由基、重金属离子后排出体外，防止机体遭受氧化损伤，因此gsh-px活性是抗氧化、抗衰老的重要指标之一。

54、实施例2人参皂苷rg1、维生素c、以及人参皂苷rg1/维生素c组合物对d-半乳糖模型小鼠的血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，sod)活力的影响

55、制备了如下试剂：维生素c(浓度为50mg/ml，水溶液)、人参皂苷rg1ⅵ、人参皂苷rg1ⅵi、人参皂苷rg1ⅷ、人参皂苷rg1ⅸ、人参皂苷rg1ⅹ(浓度分别为25mg/ml、50mg/ml、100mg/ml、200mg/ml、250mg/ml，水溶液)、组合物6-10(维生素c浓度均为50mg/ml+人参皂苷rg1浓度分别为25mg/ml、50mg/ml、100mg/ml、200mg/ml、250mg/ml)。

56、实验方法及给分组给药同实施例1，处死小鼠，检测小鼠血清中sod酶活力。

57、同时计算联合用药指数ci＝(a×b)/ab。ci＜1时，表明联用有协同作用；ci≤0.8时，表明协同作用非常显著。其中，

58、c＝正常组sod酶活力-模型对照组sod酶活力，代表给药后sod酶活力恢复的上限；

59、t＝各给药组sod酶活力-模型对照组sod酶活力，代表给药后sod酶活力实际恢复的水平；

60、a、b分别表示单独给药维生素c或人参皂苷rg1i-v时的(1+t/c)值；

61、ab表示给药组合物6-10时的(1+t/c)值。

62、上述维生素c、人参皂苷rg1ⅵ-ⅹ和组合物6-10对小鼠血清中sod值的影响和联合用药指数如表2所示。

63、表2人参皂苷rg1、维生素c和组合物6-10对小鼠血清中sod值的影响(x±s，n＝10)

64、 组别 sod(u/mg) ci 正常组 108.52±7.90 / 模型组 40.10±7.26 / 维生素c 48.99±5.17 / 人参皂苷rg1ⅵ 56.98±5.66 / 人参皂苷rg1ⅵi 59.12±4.92 / 人参皂苷rg1ⅷ 60.61±4.50 / 人参皂苷rg1ⅸ 65.50±5.15 / 人参皂苷rg1ⅹ 69.42±4.62 / 组合物6 67.08±4.97 1.01 组合物7 79.82±5.49 0.91 组合物8 98.82±4.81 0.79 组合物9 102.06±7.90 0.81 组合物10 104.02±7.26 0.83

65、由上述表2的结果可知，本发明的组合物6-10能够显著增加小鼠血清中sod值，其中组合物7、8、9和10联合用药指数均小于1，表明组合物中人维生素c：参皂苷rg1维生素c重量比在1:1、1:2、1:4、1:5时具有协同作用。通过调整人参皂苷rg1、维生素c单体的重量比，能够取得更好的增加sod值的效果。而且，组合物8的联合用药指数小于0.8，表明维生素c:人参皂苷rg1在1:2时具有显著协同作用。组合物6的联用指数大于1，表明这种组合物并不能起到协同增效的作用。sod活性的降低与自由基及其代谢产物引起的膜损伤直接相关。sod能清除体内产生的过多的自由基，使体内的氧化和抗氧化保持动态平和。

66、以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了说明，但本领域技术人员应该理解的是，这些并非意图对本发明的范围进行限定，本发明的范围应由权利要求书确定。

67、工业实用性

68、本发明提供了一种包含原花青素、人参皂苷rg1和维生素c的协同增效的具有抗氧化作用的组合物，可应用于药物和保健食品中。