一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分的制备方法

本发明涉及食品香料领域，特别是一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分制备的方法。

背景技术：

1、树苔，常见于松、枞、冷杉以及云杉等树干上，又被称为树畸子，也可以被称为丛生树花或树花菜，是一种附生地衣类植物。树苔浸膏是一种植物性天然香料，拥有十分独特的干果香气和极其浓厚的松柏类植物的香气，相似于橡苔香气。树苔浸膏能够很好的应用于食品、日化及卷烟上，并在一些香精香料中作为保香剂，使香料成分挥发均匀并令香气更加的持久。香气是评价浸膏品质的重要指标，因此，通过研究树苔浸膏中的香气成分可以为树苔浸膏的应用和质量控制提供参考依据。

2、迄今为止，已经有较多关于树苔浸膏的香气成分的研究报告。其中，经过气质等手段分析发现，树苔浸膏中的挥发性香气成分主要包括苔黑酚单甲醚、苔黑酚（地衣酚）、β-苔黑酚羧酸甲酯、扁枝衣酸乙酯、苔黑酚羧酸乙酯、十六酸乙酯、庚酸乙酯和赤星衣酸乙酯等，这些成分可能为构成树苔浸膏典型苔清香的关键成分。比如其中的苔黑酚单甲醚具有酸涩的、胡桃样的木香香气，扁枝衣酸乙酯具有青苔样的香气特征，并且具有一种独特的、干枯的甜气。

3、但是，由于树苔浸膏中的香气成分复杂，其所含香味物质的特征性不明显，因此对树苔浸膏进行分离、纯化，得到特征突出的香气成分是十分必要的。本发明方案提供了一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分制备的方法，可以为后续香气特征分析及应用提供很有价值的借鉴和参考意义。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分制备的方法。本发明的技术方案是这样实现的：

2、一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分制备的方法，包括如下步骤：

3、（1）取树苔，用70%乙醇提取，获得树苔浸膏；

4、（2）使用sevag法去除浸膏中蛋白类杂质，再使用大孔树脂柱去除糖类杂质，获得树苔呈香组分纯化产物；

5、（3）将树苔呈香组分纯化产物加蒸馏水溶解，收集上清液，先经过g10葡聚糖凝胶柱进行分离，蒸馏水作洗脱液，上样量为上清液中固体样品：g10葡聚糖凝胶柱填料的质量比为1:（100~400），洗脱速率为1~5 ml/min，收集各分离组分溶液a，并获得水溶后残渣a；

6、（4）向水溶后残渣a中加入体积浓度为80%~100%的乙醇溶液溶解，获得残渣a溶液，利用lh-20葡聚糖凝胶柱分离，使用体积浓度为80%~100%的乙醇溶液作洗脱液，上样量为残渣a溶液中固体物质和lh-20葡聚糖凝胶柱填料的质量比为1:（100~400），洗脱速率为1~5ml/min，收集各分离组分溶液b，并获得残渣b；

7、（5）向残渣b中加入体积浓度为50%~80%的乙醇溶液溶解，获得残渣b溶液，利用lh-20葡聚糖凝胶柱分离，使用体积浓度为50%~80%的乙醇溶液作洗脱液，上样量为残渣b溶液中固体物质和lh-20葡聚糖凝胶柱填料的质量比为1:（100~400），洗脱速率为1~5 ml/min，收集各分离组分溶液c；

8、（6）将分离组分溶液a、分离组分溶液b和分离组分溶液c分别经过旋蒸浓缩后，分别得到树苔呈香组分粗产物a、树苔呈香组分粗产物b和树苔呈香组分粗产物c；

9、（7）将树苔呈香组分粗产物a、树苔呈香组分粗产物b和树苔呈香组分粗产物c分别用1~6 ml甲醇溶解，获得树苔呈香组分粗产物a溶液、树苔呈香组分粗产物b溶液和树苔呈香组分粗产物c溶液，通过装有c18填料的色谱柱进一步分离，流动相为甲醇，进行梯度洗脱，先使用体积浓度10~30%的甲醇洗脱1~3个柱体积，再使用体积浓度40%~60%的甲醇洗脱1~3个柱体积，再使用体积浓度60%~80%的甲醇洗脱1~3个柱体积，再使用体积浓度80%~100%的甲醇洗脱1~3个柱体积。上样量为树苔呈香组分粗产物a、树苔呈香组分粗产物b、树苔呈香组分粗产物c溶液中固体物质和c18填料的质量比为1:（100~400），洗脱速率为1~5 ml/min。根据分离谱图的色谱峰分别收集树苔呈香组分粗产物a溶液、树苔呈香组分粗产物b溶液和树苔呈香组分粗产物c溶液的洗脱液，分别经过旋蒸浓缩后得到固体组分a、固体组分b和固体组分c；

10、（8）以热裂解气质分析结果显示地衣酚含量超过8%为依据，收集具有地衣酚特征的树苔呈香组分。

技术特征：

1.一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2. 根据权利要求1所述的一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中上清液中固体物质和g10葡聚糖凝胶柱填料的质量比为1:（100~400），洗脱速率为1~5 ml/min。

3. 根据权利要求1所述的一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中残渣a溶液中固体物质和lh-20葡聚糖凝胶柱填料的质量比为1:（100~400），洗脱速率为1~5 ml/min。

4. 根据权利要求1所述的一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分的制备方法，其特征在于，所述步骤（5）中残渣b溶液中固体物质和lh-20葡聚糖凝胶柱填料的质量比为1:（100~400），洗脱速率为1~5 ml/min。

5. 根据权利要求1所述的一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分的制备方法，其特征在于，所述步骤（7）中通过装有c18填料的色谱柱进一步分离中的上样量为树苔呈香组分粗产物a溶液中固体物质和c18填料的质量比为1:（100~400）；树苔呈香组分粗产物b溶液中固体物质和c18填料的质量比为1:（100~400）；树苔呈香组分粗产物c溶液中固体物质和c18填料的质量比为1:（100~400）；洗脱速率为1~5 ml/min。

技术总结本发明公开了一种具有地衣酚特征的树苔呈香组分的制备方法。包括以下步骤：（1）使用70%乙醇提取树苔浸膏；（2）使用Sevag法和大孔树脂柱去除浸膏中蛋白类和糖类杂质；（3）再溶于水，水溶部分经G10凝胶柱分离后收集粗产物A，不溶于水的部分为残渣A；（4）使用体积浓度80%~100%乙醇溶液溶解残渣A，可溶部分经LH‑20凝胶柱分离后收集粗产物B，不溶部分为残渣B；（5）使用体积浓度50%~80%乙醇溶液溶解残渣B，可溶部分经LH‑20凝胶柱分离后收集粗产物C；（6）将粗产物A、B和C使用C18色谱柱分离后得到固体组分A、B和C，根据热裂解气质分析结果收集具有地衣酚特征的树苔呈香组分。技术研发人员：王远辉,王熙,韩跃,雷柯,张启东,柴国璧,宁晨宇,李浩淇,牛晶霄,韩喆受保护的技术使用者：河南工业大学技术研发日：技术公布日：2024/5/12