一种食品添加剂甲基香豆素通过抑制灰霉菌几丁质酶防治灰霉病的应用

本发明涉及一种食品添加剂甲基香豆素通过抑制灰霉菌几丁质酶进而治疗灰霉病的应用

背景技术：

1、灰霉菌，属于半知菌亚门、葡萄球壳孢菌，是引起灰霉病的病原菌，其菌核表面涂有一层黑化的葡聚糖硬质膜，可以抵抗紫外线辐射、干燥和外界环境中的微生物感染，从而在极端的条件下能够保持活性。作为一种主要的采后果蔬病原菌，其在感染部位表面会产生大量的灰霉层，并迅速蔓延直至腐烂，造成严重的经济损失。

2、由于缺乏抗病品种，灰霉病的防治主要依靠化学防治。在目前多种化学抑制的策略中，几丁质酶已被确定为最合适的药物靶标之一。几丁质是由重复的n-乙酰葡萄糖胺糖单元通过β-1,4糖苷键连接形成的线性多糖。作为自然界中含量第二丰富的天然聚合物，几丁质是真菌细胞壁和细胞间隔的重要组成部分，含有其骨架的细胞壁可以保护细胞免受外界环境的刺激和机械损伤。由于刚性的几丁质结构限制了真菌一定程度上的分裂，故需利用几丁质酶来降解几丁质。它不仅水解几丁质产生n-乙酰葡萄糖胺和能量供真菌生长繁殖，而且在真菌萌发的过程中起着重要作用。总之，抑制几丁质酶可以进一步对真菌生长发育的过程造成不利影响，从而实现抑菌的目的。

3、传统化学抑制剂虽然具有易获得、效率高和抑菌效果优异等好处，但其导致的污染残留与食品安全问题愈发严重。因此开发一种环保高效、成本低廉的新型抑制剂用于灰霉菌的防治不仅会避免化学药物的残留对人体造成的潜在伤害，而且对于未来果蔬病害的防治具有重要意义。

4、甲基香豆素是香豆素的甲基衍生物，是我国gb 2760-86(食品安全国家标准食品添加剂使用标准)规定为允许使用的食用香料，主要用以配制椰子、香草和焦糖等型香精。现未有涉及甲基香豆素在抑制灰霉菌几丁质酶或防治灰霉病的报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种食品添加剂甲基香豆素在抑制灰霉菌几丁质酶防治灰霉病的应用。

2、本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：采用了一种食品添加剂甲基香豆素在抑制灰霉菌几丁质酶防治灰霉病的验证方法。

3、进一步地讲，通过药物对蛋白活性的测定，确定其抑制的效果。

4、更进一步地讲，通过菌丝生长测定以及孢子萌发实验验证药物的抑菌活性。

5、本发明的有益效果是，对食品添加剂甲基香豆素进行活性测定，得到其蛋白抑制的ic50为113.3ug/ml，且对菌丝生长和孢子萌发有较好的抑制效果，可以作为一种防治灰霉病的绿色抑制剂。

技术特征：

1.一种食品添加剂甲基香豆素通过抑制灰霉菌几丁质酶防治灰霉病的应用。

2.根据权利要求1所述的食品添加剂甲基香豆素通过抑制灰霉菌几丁质酶防治灰霉病的应用，其特征在于：食品添加剂甲基香豆素抑制蛋白的浓度分别为32ug/ml、64ug/ml、96ug/ml、128ug/ml、160ug/ml、192ug/ml。

3.根据权利要求1所述的食品添加剂甲基香豆素通过抑制灰霉菌几丁质酶防治灰霉病的应用，其特征在于：食品添加剂甲基香豆素抑制菌丝生长的浓度分别为96ug/ml、128ug/ml、160ug/ml、192ug/ml。

4.根据权利要求1所述的食品添加剂甲基香豆素通过抑制灰霉菌几丁质酶防治灰霉病的应用，其特征在于：食品添加剂甲基香豆素抑制孢子萌发的浓度分别为96ug/ml、128ug/ml、160ug/ml、192ug/ml。

技术总结本发明公开了一种食品添加剂甲基香豆素通过抑制灰霉菌几丁质酶防治灰霉病的应用。甲基香豆素作为一种香豆素的甲基衍生物，目前未有涉及其抑制灰霉菌几丁质酶并治疗灰霉病的报道。为此，我们将纯化出的灰霉菌几丁质酶与甲基香豆素共孵育，发现蛋白的活性随着药物浓度的增加而逐渐降低，抑制率最高可达72％。同样，在抑制菌丝生长和孢子萌发上甲基香豆素也表现出较好的抗菌活性。绿色环保的甲基香豆素有望成为替代现有抗灰霉菌抑制剂的新型抑制剂。技术研发人员：王虹苏,王晨阳,牛效迪,任家萱受保护的技术使用者：吉林大学技术研发日：技术公布日：2024/5/12