治疗PCSK9活性相关病况的化合物的制作方法

本公开涉及治疗高胆固醇血症和与pcsk9活性相关的其他病况(例如，动脉粥样硬化、动脉粥样硬化性心血管疾病、冠心病、代谢综合征、急性冠脉综合征或相关的心血管疾病和心脏代谢病况)的方法。

背景技术：

1、前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶-kexin9型(以下简称“pcsk9”)，也称为神经凋亡调节转化酶1(“narc-1”)，是被鉴定为分泌性枯草杆菌酶家族第九成员的蛋白酶k样枯草杆菌酶；参见seidah et al.,2003pnas100:928-933。pcsk9属于哺乳动物丝氨酸蛋白酶前蛋白转化酶家族，包含n端信号序列、前结构域、催化结构域和c端结构域；参见seidah et al.,2012nat.rev.drug discov.11:367–383。一项对pcsk9转录调控的研究表明，它受到甾醇调控元件结合蛋白(sterol regulatory element-binding protein,srebp)的调控，如在参与胆固醇代谢的其它基因中所观察到的；maxwell et al.,2003j.lipid res.44:2109-2119，也如在牵涉脂蛋白代谢的其他基因中是典型的；dubuc et al.,2004arterioscler.thromb.vasc.biol.24:1454-1459。已证实他汀类药物以归因于药物降胆固醇作用的方式上调pcsk9的表达；同上。此外，已证实pcsk9启动子具有两个参与胆固醇调节的保守位点，即甾醇调节元件和sp1位点；同上。

2、而在内质网中，pcsk9表现为仅有对残基gln-152和ser-153之间的自动裂解的催化活性；参见naureckiene et al.,2003arch.biochem.biophys.420:55–67；seidah etal.,2003proc.natl.acad.sci.u.s.a.100:928–933。前结构域在随后通过反式高尔基体网络运输期间保持与催化结构域紧密相关。已证明经由自动裂解的成熟对pcsk9分泌和随后的细胞外功能而言至关重要(参见benjannet et al.,2012j.biol.chem.287:33745–33755)。因此，多项证据表明，pcsk9尤其会降低肝脏ldlr蛋白的量，从而损害肝脏从循环中清除低密度脂蛋白(low density lipoprotein,ldl)胆固醇的能力。

3、小鼠肝脏中腺病毒介导的pcsk9的过表达导致循环低密度脂蛋白胆固醇(lowdensity lipoprotein cholesterol,ldl-c)的累积，这是由于肝脏ldlr蛋白的显著损失，对ldlr mrna水平没有影响；benjannet et al.,2004j.biol.chem.279:48865-48875；maxwell&breslow,2004pnas101:7100-7105；park et al.,2004j.biol.chem.279:50630-50638；和lalanne et al.,2005j.lipid res.46:1312-1319。pcsk9过表达对提高小鼠循环ldl-c水平的作用完全依赖于ldlr的表达，再次表明pcsk9对ldl-c的调节是通过ldlr蛋白下调介导的。与这些发现一致，缺乏pcsk9或其中pcsk9 mrna已被反义寡核苷酸抑制剂降低的小鼠具有更高水平的肝ldlr蛋白和更强的循环ldl-c清除能力；rashid et al.,2005pnas102:5374-5379；and graham et al.,2007j.lipid res.48(4):763-767。另外，通过sirna降低培养的人肝细胞中的pcsk9水平还导致更高的ldlr蛋白水平和增加的ldl-c摄取能力；benjannet et al.,2004j.biol.chem.279:48865-48875；和lalanne et al.,2005j.lipid res.46:1312-1319。总之，这些数据表明pcsk9作用通过降低ldlr蛋白水平导致ldl-c增加。

4、pcsk9基因中的许多突变还结论性地与常染色体显性高胆固醇血症(autosomaldominant hypercholesterolemia,adh)相关，这是一种以血浆中低密度脂蛋白(lowdensity lipoprotein,ldl)颗粒显著升高为特征的遗传性代谢紊乱，可导致早发性心血管功能衰竭；参见abifadel et al.,2003nature genetics 34:154-156；timms et al.,2004hum.genet.114:349-353；leren,2004clin.genet.65:419-422。abifadel等人(同上)随后发表的一项关于s127r突变的研究，报告了携带这种突变的患者在血浆中表现出较高的总胆固醇和apob100，这归因于(1)含apob100的脂蛋白如低密度脂蛋白(low densitylipoprotein,ldl)、极低密度脂蛋白(very low density lipoprotein,vldl)和中密度脂蛋白(intermediate density lipoprotein,idl)的过量产生，和(2)所述脂蛋白的清除率或转化率的相关降低；ouguerram et al.,2004arterioscler.thromb.vasc.biol.24:1448-1453。

5、因此，毫无疑问的是pcsk9在ldl的调节中发挥作用。pcsk9的表达或上调与增加的ldl胆固醇的血浆水平相关，并且pcsk9表达的相应抑制或缺乏与降低的ldl胆固醇血浆水平相关。已发现与pcsk9中的序列变异相关的降低的ldl胆固醇水平赋予对冠心病的保护；cohen,2006n.engl.j.med.354:1264-1272。

6、在临床试验中，ldl胆固醇水平的降低与冠状动脉事件的发生率直接相关；law etal.,2003bmj 326:1423-1427。已发现血浆ldl胆固醇水平的适度终生降低与冠状动脉事件发生率的显著降低相对应；cohen et al.,2006n.engl.j.med.354:1264-1272。即使在非脂质相关心血管危险因素高流行的群体中情况也是如此；同上。因此，从ldl胆固醇水平的管理控制中可以获得很大益处。

7、因此，亟需确定有效治疗心血管疾病的化合物和/或药剂，包括在ldl调节中对pcsk9的功能的拮抗；然而，一般来说，因为pcsk9在血液中循环并且对细胞表面ldl受体具有适度的结合亲和力，迄今为止利用这种机制治疗与高血清ldl水平相关的疾病的尝试一直集中于大生物分子(例如抗体)的使用。尽管pcsk9导向的sirna或单克隆抗体(mab)疗法可降低高胆固醇血症患者的ldl-c，但这两种类型的疗法均通过注射给药。小肽或小分子作为靶向pcsk9的药物的治疗潜力才刚刚开始被探索；参见例如，tombling et al.,atherosclerosis 330(2021)52-60。此外，没有多少化合物适合配制成剂型以利用口服施用途径给药此类化合物，口服施用途径对于为其中pcsk9活性的调节可能起作用的病况提供疗法而言是非常理想的。

8、wo2019/246349公开了可用于治疗与pcsk9活性相关的心血管疾病和病况的环肽化合物。本公开通过提供治疗高胆固醇血症和与pcsk9活性相关的其他病况的方法，提高了现有技术的水平，所述方法理想地包括口服使用所确定的pcsk9抑制剂。本文还提供了pcsk9抑制剂的新的盐的形式。

技术实现思路

1、本公开提供了治疗高胆固醇血症和与pcsk9活性相关的其他病况(例如，动脉粥样硬化、动脉粥样硬化性心血管疾病、冠心病、代谢综合征、急性冠脉综合征或相关的心血管疾病和心脏代谢病况)的方法，其通过向受试者口服施予一定量的式(i)化合物，

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4、其中a-选自药学上可接受的阴离子，并且其中式(i)化合物的施予量为约5mg至约300mg的。

5、本公开还提供了一种在有需要的受试者中降低ldl-c的方法，其包括向所述受试者口服施予一定量的式(i)化合物，其中a-选自药学上可接受的阴离子，并且其中式(i)化合物的施予量为约5mg至约300mg的。

6、本公开还提供了一种在有此需要的受试者中治疗动脉粥样硬化性心血管疾病的方法，其包括向所述受试者口服施予一定量的式(i)化合物，其中a-选自药学上可接受的阴离子，并且其中式(i)化合物施予量为约5mg至约300m。

7、本公开还提供了一种在有此需要的受试者中抑制pcsk9活性的方法，其包括向所述受试者口服施予一定量的式(i)化合物，其中a-选自药学上可接受的阴离子，并且其中式(i)化合物的施予量为约5mg至约300mg。

8、本发明还涉及式(i)化合物的特定盐。

9、本发明还涉及包含式(i)化合物(包括式(i)化合物的特定盐)和渗透促进剂的药物组合物。