根瘤菌GZHC2-2菌株及制备、该菌株招募根内生细菌方法及在缓解敏感大豆涝害胁迫的应用

本发明属于微生物，具体公开了一种根瘤菌gzhc2-2菌株及制备、该菌株招募根内生细菌方法及在缓解敏感大豆涝害胁迫的应用。

背景技术：

1、在自然条件下，植物经常暴露于短暂或长期的土壤涝害中，这长期以来被认为是一种主要的非生物胁迫。土壤涝害严重限制了许多植物物种的生长、发育和生存，这不仅发生在自然生态系统中，而且也发生在农业系统中。我国的热带和亚热带地区因受到季风气候影响，降雨强度大且季节分布不均匀，在长江中下游及南方地区涝害发生频繁。

2、长期的涝害不仅会降低大豆产量和品质，还会导致大豆的根系受损，甚至导致死亡。因此，探索更多有效的方法来帮助大豆抵抗涝害是非常必要的。

技术实现思路

1、为了弥补现有技术存在的不足，本发明的目的是根瘤菌(rhizobiummultihospitium)接种在涝害敏感品种“冀豆17号”招募耐涝害根内生细菌(aeromonas、clostridium、pseudomonas、staphylococcus、paenibacillus、stenotrophomonas)抵抗涝害胁迫的应用。

2、一种根瘤菌(rhizobium multihospitium)gzhc2-2菌株，所述根瘤菌(rhizobiummultihospitium)gzhc2-2菌株于2023年1月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no.63032。

3、一种接种根瘤菌gzhc2-2菌株招募根内生细菌的方法，通过以下步骤：

4、s1.所述根瘤菌gzhc2-2菌株在根瘤菌培养基yma(yeast mannitol agar)中培养；

5、s2.所述根瘤菌gzhc2-2菌株培养温度为25-35℃、100-150rpm/min培养72-108h；

6、s3.所述根瘤菌gzhc2-2菌株接种至涝害敏感大豆品种根部；

7、s4.对接种十天后所述涝害敏感大豆品种的根部进行收集，对s3中根部dna进行16srna扩增子测序；

8、s5.对s4中的根内生细菌分离培养并进行测序；

9、s6.对s5中相对丰度显著增加根内生细菌进行筛选。

10、优选的，所述的根瘤菌gzhc2-2菌株接种量为2×104-2×106个/株。

11、优选的，所述s6中相对丰度显著增加根内生细菌至少包括有aeromonas、clostridium、pseudomonas、staphylococcus、paenibacillus、stenotrophomonas其中的任一一种或任意组合。

12、一种接种根瘤菌gzhc2-2菌株招募根内生细菌的方法，在缓解敏感大豆涝害胁迫适应性方面的应用。

13、与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：

14、本发明中根瘤菌(rhizobium multihospitium)具有高效的定植能力和较强的耐涝害能力。涝害敏感大豆在涝害胁迫下在接种根瘤菌(rhizobiummultihospitium)生长良好，显著增加了根内生细菌(aeromonas、clostridium、pseudomonas、staphylococcus、paenibacillus、stenotrophomonas)的丰度，经过纯化分离以上根内生细菌，其均可以显著增加涝害胁迫下大豆的根长和地上地下生物量。该根瘤菌可作为缓解大豆耐涝害的有效环境友好型菌剂，对增加大豆在华南地区涝害胁迫土壤的适应性有显著意义。

技术特征：

1.一种根瘤菌(rhizobium multihospitium)gzhc2-2菌株，其特征在于，所述根瘤菌(rhizobium multihospitium)gzhc2-2菌株于2023年1月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no.63032。

2.一种接种根瘤菌gzhc2-2菌株招募根内生细菌的方法，其特征在于，通过以下步骤：

3.根据权利要求2所述的一种接种根瘤菌gzhc2-2菌株招募根内生细菌的方法，其特征在于，所述的根瘤菌gzhc2-2菌株接种量为2×104-2×106个/株。

4.根据权利要求2所述的一种接种根瘤菌gzhc2-2菌株招募根内生细菌的方法，其特征在于，所述s6中相对丰度显著增加根内生细菌至少包括有aeromonas、clostridium、pseudomonas、staphylococcus、paenibacillus、stenotrophomonas其中的任一一种或任意组合。

5.权利要求3或4任一所述的一种接种根瘤菌gzhc2-2菌株招募根内生细菌的方法，在缓解敏感大豆涝害胁迫适应性方面的应用。

技术总结本发明涉及农业微生物技术领域，涉及一种根瘤菌GZHC2‑2菌株及制备、该菌株招募根内生细菌方法及在缓解敏感大豆涝害胁迫的应用，所述根瘤菌(Rhizobiummultihospitium)GZHC2‑2菌株于2023年1月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No:63032。此菌株具有帮助大豆抵抗涝害的能力。在涝害胁迫下接种该根瘤菌可以增加大豆的地上、地下生物量，根瘤数量和根瘤鲜重。同时诱导涝害敏感大豆品种富集有益根内生细菌(如Aeromonas、Clostridium、Pseudomonas、Staphylococcus、Paenibacillus、Stenotrophomonas)的能力。经过纯化分离根内生细菌，被富集的有益细菌也可以显著增加涝害胁迫下大豆的地上地下生物量，根瘤数量和根瘤鲜重。本发明的根瘤菌菌株GZHC2‑2可以应用于农业生产，用于提高涝害胁迫下大豆的生长和增加产量，具有广阔的应用前景。技术研发人员：连腾祥,刘昆,年海,成浪,刘琪受保护的技术使用者：华南农业大学技术研发日：技术公布日：2024/6/18