阳离子性脂质的制作方法

本发明涉及能够将作为活性成分的核酸导入到多种细胞、组织或器官中的阳离子性脂质。进而，本发明涉及含有该阳离子性脂质的脂质粒子和含有该脂质粒子和核酸的组合物。

背景技术：

1、近年来，含有核酸作为活性成分的核酸药物的研究开发正在火热地进行。例如，对含有sirna、mirna、mirna mimic或反义核酸等核酸的具有靶mrna的分解作用、功能抑制作用的核酸药物进行了很多研究。另外，还研究了含有编码目标蛋白的mrna等的、用于在细胞内表达目标蛋白的核酸药物。与这些研究开发相关联地，开发了用于将核酸高效地导入到细胞、组织或器官中的技术，作为药物递送系统(dds)技术。

2、作为上述dds技术，一直以来已知将核酸和脂质混合而形成复合体后借助上述复合体使核酸进入细胞的技术。作为用于形成上述复合体的脂质，一直以来已知有阳离子性脂质、亲水性聚合物脂质、辅助脂质等。作为上述阳离子性脂质，已知例如下述现有技术文献中记载的化合物。

3、专利文献1中记载了下式所示的化合物或其盐等。

4、规定了：

5、

6、式中，r1各自独立地选自由可被取代的c8～c24烷基和可被取代的c8～c24链烯基组成的组；r2和r3各自独立地选自由氢、可被取代的c1～c8烷基、可被取代的芳基烷基等组成的组；y1和y2各自独立地选自由氢、可被取代的c1～c6烷基、可被取代的芳基烷基等组成的组；y3存在时，各自独立地选自由氢、可被取代的c1～c8烷基、可被取代的芳基烷基等组成的组；m为1～4中的任一整数，n为0～3中的任一整数，p为0或1，m、n和p的合计为4；k为1～5中的任一整数；q为0或1。

7、专利文献2中记载了下式所示的化合物或其盐等。

8、

9、式中，w表示式-nr1r2或式-n+r3r4r5(z-)，r1和r2各自独立地表示c1-4烷基或氢原子，r3、r4和r5各自独立地表示c1-4烷基，z-表示阴离子，x表示可被取代的c1-6亚烷基，ya、yb和yc各自独立地表示可被取代的次甲基，la、lb和lc各自独立地表示可被取代的亚甲基或连接建，ra1、ra2、rb1、rb2、rc1和rc2各自独立地表示可被取代的c4-10烷基。

10、专利文献3中记载了下式所示的化合物或其盐等。

11、

12、式中，n表示2～5的整数，r表示直链状c1-5烷基、直链状c7-11链烯基或直链状c11链二烯基，波浪线各自独立地表示顺式或反式的键。

13、专利文献4记载了下式所示的化合物或其盐等。

14、

15、式中，n1表示2～6的整数，n2表示0～2的整数，n3表示0～2的整数，l表示-c(o)o-或-nhc(o)o-，ra表示直链状c5-13烷基、直链状c13-17链烯基或直链状c17链二烯基，rb表示直链状c2-9烷基，rc表示氢原子或直链状c2-9烷基，rd表示氢原子或直链状c2-9烷基，re表示直链状c2-9烷基，rf表示直链状c2-9烷基。

16、现有技术文献

17、专利文献

18、专利文献1：wo2003/102150号小册子

19、专利文献2：wo2016/021683号小册子

20、专利文献3：wo2019/131839号小册子

21、专利文献4：wo2020/032184号小册子

技术实现思路

1、发明所要解决的问题

2、能够将核酸高效地导入到细胞中的阳离子性脂质可期待对研发在药效表现、安全性(低毒性)等方面优良且治疗上具有优良效果的核酸药物作出贡献。另外，能够将核酸导入到各种细胞中的阳离子性脂质可期待能够研发出针对各种组织中发生的各种疾病的核酸药物。专利文献3和4中记载的阳离子性脂质的发明虽然对于能够将核酸以优良的效率导入到细胞中、将核酸导入到各种细胞中可发挥一定效果，但是在面向作为核酸药物的用途、例如生物体内的分解性的提高(即，作为药物的安全性的提高)等方面存在进一步改善的余地。

3、本发明的目的在于，提供用于能够将核酸以优良的效率导入到细胞中且提高生物体内的分解性(作为药物的安全性)的技术、和其中使用的阳离子性脂质等。另外，从另一观点而言，本发明的目的在于，提供用于能够将核酸导入到各种细胞中且提高生物体内的分解性(作为药物的安全性)的技术、和其中使用的化合物等。

4、用于解决问题的方法

5、本发明人为了解决上述课题进行了深入研究，结果发现，通过使用下述式(i)所示的化合物、即在3条侧链中的至少1条侧链中具有2个酯键的阳离子性脂质或其盐，能够解决上述课题，从而完成了本发明。

6、即，本发明至少涉及以下发明。

7、[1]

8、下述式(i)所示的化合物或其盐。

9、

10、[式(i)中，

11、w表示-nr1r2或-n+r11r12r13(z-)，

12、r1和r2各自独立地表示h或可被取代的c1～5烷基，

13、r11、r12和r13各自独立地表示可被取代的c1～5烷基，

14、z-表示阴离子，

15、x表示可被取代的c2～6亚烷基，

16、ra和rb各自独立地表示可被取代的c1～17烷基、可被取代的c3～17链烯基、可被取代的c15～17链二烯基、或者-r3-c(o)o-r4或-r3-oc(o)-r4，

17、rc表示-r3-c(o)o-r4或-r3-oc(o)-r4，

18、r3表示可被取代的c1～16亚烷基、可被取代的c4～16亚链烯基或可被取代的c7～16亚链二烯基，

19、r4表示h、可被取代的c1～18烷基、可被取代的c3～18链烯基或可被取代的c15～18链二烯基。]

20、[2]

21、根据[1]所述的化合物或其盐，其如下述式(ii)所示。

22、

23、[式(ii)中，

24、w表示-nr1r2或-n+r11r12r13(z-)，

25、r1和r2各自独立地表示h或可被取代的c1～5烷基，

26、r11、r12和r13各自独立地表示可被取代的c1～5烷基，

27、z-表示阴离子，

28、x表示可被取代的c2～6亚烷基，

29、ra1和rb1各自独立地表示可被取代的c1～17烷基、可被取代的c3～17链烯基或可被取代的c15～17链二烯基，

30、rc表示-r3-c(o)o-r4或-r3-oc(o)-r4，

31、r3表示可被取代的c1～16亚烷基、可被取代的c4～16亚链烯基或可被取代的c7～16亚链二烯基，

32、r4表示h、可被取代的c1～18烷基、可被取代的c3～18链烯基或可被取代的c15～18链二烯基。]

33、[3]

34、根据[1]所述的化合物或其盐，其如下述式(iii)所示。

35、

36、[式(iii)中，

37、w表示-nr1r2或-n+r11r12r13(z-)，

38、r1和r2各自独立地表示h或可被取代的c1～5烷基，

39、r11、r12和r13各自独立地表示可被取代的c1～5烷基，

40、z-表示阴离子，

41、x表示可被取代的c2～6亚烷基，

42、ra1表示可被取代的c1～17烷基、可被取代的c3～17链烯基或可被取代的c15～17链二烯基，

43、rb2和rc各自独立地表示-r3-c(o)o-r4或-r3-oc(o)-r4，

44、r3表示可被取代的c1～16亚烷基、可被取代的c4～16亚链烯基或可被取代的c7～16亚链二烯基，

45、r4表示h、可被取代的c1～18烷基、可被取代的c3～18链烯基或可被取代的c15～18链二烯基。]

46、[4]

47、根据[1]所述的化合物或其盐，其如下述式(iv)所示。

48、

49、[式(iv)中，

50、w表示-nr1r2或-n+r11r12r13(z-)，

51、r1和r2各自独立地表示h或可被取代的c1～5烷基，

52、r11、r12和r13各自独立地表示可被取代的c1～5烷基，

53、z-表示阴离子，

54、x表示可被取代的c2～6亚烷基，

55、ra2、rb2和rc各自独立地表示-r3-c(o)o-r4或-r3-oc(o)-r4，

56、r3表示可被取代的c1～16亚烷基、可被取代的c4～16亚链烯基或可被取代的c7～16亚链二烯基，

57、r4表示h、可被取代的c1～18烷基、可被取代的c3～18链烯基或可被取代的c15～18链二烯基。]

58、[5]

59、1,1'-[2-({[4-(二甲基氨基)丁酰基]氧基}甲基)-2-{[(3-戊基辛酰基)氧基]甲基}丙烷-1,3-二基]6,6'-二庚基二己二酸二酯。

60、[6]

61、1,1'-{2-({[4-(二甲基氨基)丁酰基]氧基}甲基)-2-[({4-氧代-4-[(十一烷-6-基)氧基]丁酰基}氧基)甲基]丙烷-1,3-二基}4,4'-二(十一烷-6-基)二丁二酸二酯。

62、[7]

63、癸基2-({[4-(二甲基氨基)丁酰基]氧基}甲基)-3-[(3-戊基辛酰基)氧基]-2-{[(3-戊基辛酰基)氧基]甲基}丙基己二酸二酯。

64、[8]

65、1,1'-[2-({[4-(二甲基氨基)丁酰基]氧基}甲基)-2-{[(3-戊基辛酰基)氧基]甲基}丙烷-1,3-二基]6,6'-双(2-丙基戊基)二己二酸二酯。

66、[9]

67、1,1'-{2-({[4-(二甲基氨基)丁酰基]氧基}甲基)-2-[({3-氧代-3-[(2-戊基庚基)氧基]丙酰基}氧基)甲基]丙烷-1,3-二基}3,3'-双(2-戊基庚基)二丙二酸二酯。

68、[10]

69、1,1'-[2-({[4-(二甲基氨基)丁酰基]氧基}甲基)-2-{[(3-戊基辛酰基)氧基]甲基}丙烷-1,3-二基]3,3'-二己基双(己基丙二酸二酯)。

70、[11]

71、一种脂质粒子，其含有[1]所述的化合物或其盐。

72、[12]

73、一种核酸导入用组合物，其含有核酸和[11]所述的脂质粒子。

74、[13]

75、根据[12]所述的组合物，其中，核酸为dna或rna。

76、[14]

77、根据[13]所述的组合物，其中，dna为纳米质粒。

78、[15]

79、根据[13]所述的组合物，其中，dna受cag启动子或cmv启动子控制。

80、需要说明的是，本说明书中，有时将式(i)～(iv)所示的化合物记作“化合物(i)”～“化合物(iv)”。另外，有时将“式(i)所示的化合物或其盐”称为“本发明的化合物”。有时将“含有式(i)所示的化合物或其盐(本发明的化合物)的脂质粒子”称为“本发明的脂质粒子”。有时将“含有核酸和本发明的脂质粒子的核酸导入用组合物”称为“本发明的组合物”。

81、发明效果

82、通过本发明，能够以优良的效率对细胞、组织或器官导入核酸，并且能够提高生物体内的分解性(作为药物的安全性)。另外，通过本发明，能够将核酸导入到多种细胞、组织或器官(例如癌细胞)中，并且能够提高生物体内的分解性(作为药物的安全性)。通过本发明，能够得到可将核酸导入到多种细胞、组织或器官中的药物或研究用试剂。进而，通过本发明，在将核酸导入到细胞、组织或器官时，该核酸所具有的活性(例如药效)的表现效率高。