野艾蒿内酯I衍生物及其药物组合物和其制备方法与应用

本发明属于药物，具体涉及到野艾蒿内酯i衍生物1-33，以其为活性成分的药物组合物，其制备方法以及该类衍生物及其药物组合物在制备抗肝癌药物中的应用。

背景技术：

1、肝癌分为原发性和继发性两大类，是全球性疾病，2020年全球新增患者为90.5万，死亡人数达83万，而且发病率不断升高，预计到2025年将超过100万。肝细胞癌约占原发性肝癌的90％，发病原因复杂，受较多因素影响，包括非酒精性脂肪肝，乙型肝炎，血色素沉着或原发性胆管炎引起的肝硬化等原因。目前已经上市的用于治疗肝癌的药物有络氨酸激酶抑制剂索拉菲尼、乐伐替尼、瑞戈非尼、卡博替尼、多纳非尼共五种小分子合成药和雷莫芦单抗及pd-1抑制剂帕博利珠单抗和纳武利尤单抗等8种单抗药物。最近，国家药品监督管理局批准了阿可拉定用于肝细胞癌的治疗。治疗肝癌的药物取得了巨大的进展，但存在毒副作用明显，不耐受，价格昂贵等缺点，仍需开发新型的抗肝癌药物。天然产物及其衍生物以其多样的结构和生物活性在新药研发中发挥着重要的作用，近年来，已经有许多报道表明多种倍半萜对肝癌细胞具有细胞毒活性。

2、在本发明人之前的研究中，从野艾蒿中分离得到的野艾蒿内酯i(lavandiolidei)对hepg2、huh7和sk-hep-1三株肝癌细胞具有抑制活性，ic50值分别为12.1±0.9，18.4±1.1，17.6±1.2μm。迄今，现有技术中没有本技术的野艾蒿内酯i衍生物及其药理活性的报道，没有其作为药物组合物的报道，也没有野艾蒿内酯i衍生物和其药物组合物在制备抗肝癌药物中的报道。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一类新的具有药用价值的野艾蒿内酯i衍生物(1-33)，其制备合成方法，以及其作为有效成分的药物组合物，其在治疗肝癌的药物中的应用。本发明对野艾蒿内酯i进行结构修饰合成新衍生物，提供新的抗肝癌活性化合物。

2、为了实现上述的目的，本发明提供了以下的技术方案：

3、结构式(i)所示的野艾蒿内酯i衍生物1-33(化合物1-33)，

4、

5、图1野艾蒿内酯i衍生物1-33的分子结构所述的野艾蒿内酯i衍生物1-33或其药用盐，其中所述的药用盐是指药学上可接受的盐，包括与有机酸或无机酸形成的盐，所述的有机酸为柠檬酸、马来酸、富马酸，所述的无机酸为盐酸、硫酸、磷酸。

6、本发明同时提供了制备野艾蒿内酯i衍生物1-33(化合物1-33)的方法，该方法包括下述步骤：

7、野艾蒿内酯i衍生物1-2的制备：

8、以野艾蒿内酯i为底物，用醋酸钯作为催化剂，碘苯作为苯环来源，实现了苯环与环外双键的偶联得到了野艾蒿内酯i衍生物1；野艾蒿内酯i在四氢呋喃溶液中，次氯酸钠作为氧化剂，与4-甲基苯甲醛肟通过1,3-偶极环加聚得到了野艾蒿内酯i的恶唑啉衍生物2。

9、野艾蒿内酯i衍生物1-2的制备：

10、以野艾蒿内酯i为底物，用醋酸钯催化下与碘苯偶联得到野艾蒿内酯i衍生物1；野艾蒿内酯i与4-甲基苯甲醛肟通过1,3-偶极环加成得到野艾蒿内酯i的恶唑啉衍生物2。

11、野艾蒿内酯i衍生物3-10的制备：

12、以野艾蒿内酯i作为底物，通过酯化得到野艾蒿内酯i衍生物3；以野艾蒿内酯i作为底物，在酸性条件下与醇(甲醇和苯乙醇)反应，分别得到野艾蒿内酯i衍生物4、5和6、7；野艾蒿内酯i在由hf·py作用下脱水得到衍生物8；野艾蒿内酯i在酸性条件下经碳正离子还原得到野艾蒿内酯i衍生物9和10。

13、野艾蒿内酯i衍生物11-21的制备：

14、分别以倍半萜3α,4α-epoxy-arglabin,3,4-hydro-arglabin,kauniolide,8-deoxyrupicolin b,1-hydroxy-10-methoxy-arglabin,1,10-epi-arglabin,11,13-dehydrodesacetylmatricarin,1β,10β-epoxy-2α-hydroxykauniolide和14-hydroxykauniolide与双烯体作为反应底物，在无溶剂，50℃的条件下通过diels-alder反应和脱除二甲氨基保护基得到野艾蒿内酯i衍生物11-21。

15、野艾蒿内酯i衍生物22-33的制备：

16、以野艾蒿内酯i衍生物21作为反应原料，经过戴斯-马丁试剂氧化得到野艾蒿内酯i衍生物22；野艾蒿内酯i衍生物22以亚氯酸钠作为氧化剂，nah2po4作为反应酸碱缓冲剂，同时加入2-甲基丁-2-烯，得到了野艾蒿内酯i衍生物23；野艾蒿内酯i衍生物23在dcc和dmap作用下与苯酚酯化缩合得到野艾蒿内酯i衍生物24；野艾蒿内酯i衍生物21在dcc和dmap作用下分别与乙酸酐和苯甲酸酐酯化缩合得到野艾蒿内酯i衍生物25和26；以野艾蒿内酯i衍生物21作为底物，加入dppa，dbu，在碱性环境下，通过sn2反应得到了野艾蒿内酯i的叠氮衍生物27；首先使用稍过量的三苯基膦通过施丁格反应(staudinger reaction)还原野艾蒿内酯i衍生物27得到中间体氨基衍生物，再与苯甲酸酐反应得到野艾蒿内酯i的酰胺衍生物28；以中间体氨基衍生物作为底物，在苄醇与cdi的作用下得到了野艾蒿内酯i的氨基甲酸酯衍生29；以中间体氨基衍生物作为底物，与2-苯乙基异氰酸酯在碱性条件下发生加成得到含脲化合物30；以野艾蒿内酯i衍生物21作为反应底物，氢化钠提供碱性环境，与溴化苄通过williamson醚合成反应得到了化合物31；以野艾蒿内酯i衍生物27为底物分别与末端炔基化合物(苯乙炔和4-甲基苯乙炔)在碘化亚铜、三乙胺的反应体系中通过click反应得到野艾蒿内酯i的三氮唑衍生物32和33；然后，分别加入可药用载体。

17、本发明同时提供了野艾蒿内酯i衍生物(1-33)在制备抗肝癌抑制剂中的应用，在制备抗肝癌药物中的应用。

18、此外，本发明提供了一种药物组合物，其中含有治疗有效量的野艾蒿内酯i衍生物(1-33)中的至少一种和药学上可接受的载体。

19、同时提供了制备含野艾蒿内酯i衍生物(1-33)有效成分的药物组合物的方法，以化合物野艾蒿内酯i为反应原料，合成野艾蒿内酯i衍生物(1-33)，分别加入药学上可接受的载体。

20、并提供了上述药物组合物在制备抗肝癌抑制剂中的应用，在制备抗肝癌药物中的应用。

21、本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。该药物组合物含有0.1-99％，优选0.5-90％的本发明化合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的药学上可接受的载体。

22、所述的药学上可接受的载体是一种或多种固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明的药物可经注射(静注、肌注)和口服两种形式给药。

23、与现有技术相比，本发明具备如下的优益性：

24、1.本发明提供了一系列新的野艾蒿内酯i衍生物1-33(化合物1-33)，填补了现有技术的空白。

25、2.本发明提供了制备新化合物1-33的方法，制备原料在植物中含量高，可大量从植物中分离提取，合成路线短，收率高，易于工业化生产。

26、3.本发明提供了新化合物1-33作为有效成分的药物组合物，为新的抗肝癌药物提供了具有较好药用作用的新的药物。

27、4.本发明的化合物1-33对三株肝癌细胞(hepg2,huh7和sk-hep-1)的抑制活性均具有较强活性；13个化合物(4,12,14,22,24,26-33)在三株肝癌细胞上均具有比索拉菲尼和野艾蒿内酯i更强的抑制活性；特别是化合物24，ic50值为5.2(hepg2)、5.4(huh7)和5.8μm(sk-hep-1)，分别较野艾蒿内酯i提高了2.3、3.4和3.0倍，比索拉非尼强2.5、1.6和2.0倍；并且化合物6,22,24,28-33表现出更好的安全性，对正常肝细胞(thle-2)表现出较好的选择性，si值范围在1.3-4.4。

28、5.野艾蒿内酯i衍生物1-33可作为药物用于治疗肝癌相关的疾病。