Delta阿片受体偏向激动化合物的合成与应用和镇痛药物

本发明涉及新药发现领域，更具体而言，涉及一种二苯醚取代的四氢异喹啉化合物的合成方法及在制备镇痛药物中应用。

背景技术：

1、疼痛是指真正存在或潜在的身体组织损伤所引起的不舒服知觉和心理感觉，是所有疾病中最常见的症状之一，同时慢性疼痛也是一种疾病。目前临床治疗镇痛药物主要为阿片类药物和非甾体类抗炎药，这些药物在缓解患者疼痛中发挥了极大作用，但反复使用会引起耐受、便秘、呼吸抑制、成瘾及胃肠道溃疡等严重不良反应。因此，开展低副作用镇痛药物研究是新药领域的共识目标，也是临床的迫切需求。

2、阿片受体是疼痛信号传递及镇痛过程中最重要的蛋白，也是阿片类药物的治疗靶点。阿片受体是一类g蛋白偶联受体，主要包括mu、delta和kappa三个亚型，其调节机制如下：外源性阿片物质或内源性阿片肽激动感觉神经突触前后膜上的阿片受体，通过与gi蛋白偶联，抑制腺苷酸环化酶(ac)降解腺嘌呤核苷三磷酸(atp)生成环磷酸腺苷(camp)，从而抑制突触前膜神经递质的释放，同时促进k+外流、减少ca2+内流，最终减弱或阻滞痛觉信号的传递，产生镇痛作用。目前研究表明，激动剂受体亚型选择性差是导致药物产生副作用的主要原因，因此发现亚型选择好的激动剂是低副作用镇痛新药的研究方向。

3、中药具有很好的镇痛临床疗效，且副作用小，其含有的化合物结构多样，是镇痛药物发现的重要源泉。蝙蝠葛(menispermum dauricum dc.)为防己科蝙蝠葛属植物，它的根茎是一种传统的中药，又名北豆根。临床上常用于治疗扁桃体炎，风湿性关节炎，肠胃炎等疾病。蝙蝠葛根的主要成分是异喹啉生物碱，且表现出广泛的生物活性，异喹啉生物碱主要包括双苄基异喹啉类、苄基异喹啉类、啊朴啡类和原小檗碱类等多种亚类。我们前期的研究中发现结构式i具有delta亚型受体的激动活性，从北豆根中分离纯化的制备方法已申请发明专利(专利号：202210357329.8)。尚未有报道涉及该化合物的化学合成方法，且未报道该化合物偏向激动活性的研究及在急性与慢性疼痛的应用。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种二苯醚取代的四氢异喹啉化合物的合成方法及在制备镇痛药物中应用。具体地，本发明的目的之一是提供其结构式如式ⅰ所示的化合物的合成方法；本发明的目的之二是提供化合物的应用，即通过细胞实验表明该化合物是delta阿片受体的偏向激动剂，通过动物实验表明该化合物在急性和慢性疼痛具有显著的镇痛效果且无耐药、便秘、抽搐、兴奋性运动等副作用，为镇痛药物开发提供基础。

2、

3、化合物i，白色粉末，分子式c26h29no5，分子量435.2。

4、本发明提供一种化合物i的合成方法，其合成路线如下：

5、

6、以3,4-二羟基苯甲醛为起始原料通过方法a进行苄基保护反应，柱层析纯化后得到中间体1；中间体1与4-溴苯乙酸乙酯通过方法b进行缩合反应，旋蒸除去溶剂后柱层析纯化得到中间体2；中间体2通过方法c水解，减压浓缩除去溶剂，中和至酸性后柱层析纯化得到中间体3；中间体3与3,4-二甲氧基苯乙胺通过方法d进行缩合反应，加水淬灭后二氯甲烷提取柱层析纯化得到中间体4；中间体4通过方法e关环得到中间体5减压浓缩后直接进行下一步反应；中间体5通过方法f进一步还原后减压浓缩除去溶剂柱层析纯化得到中间体6；中间体6通过方法g甲基化后中和溶液至碱性二氯甲烷提取柱层析纯化得到中间体7；中间体7通过方法h还原脱去苄基抽滤除去催化剂减压浓缩得到中间体8；消旋的中间体8使用高效液相手性色谱分离得到r构型的权利要求1所述化合物i。每个中间体的制备方法如下：

7、(1)中间体1与4-溴苯乙酸乙酯通过方法b得到中间体2，方法b优选反应溶剂为吡啶，优选反应试剂为碳酸钾(1-4当量)和氧化亚铜(0.01-1当量)，优选反应条件为80-140摄氏度反应3-40小时。

8、(2)中间体2通过方法c水解得到中间体3，方法c优选反应溶剂为四氢呋喃/甲醇/水任意比例溶液，优选反应试剂为碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾(1-10当量)，优选反应条件为40-90摄氏度反应5-30小时。

9、(3)中间体3与与3,4-二甲氧基苯乙胺通过方法d缩合得到中间体4，方法d优选反应溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃或dmf，优选条件为1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(edci)、1,3-二环己基碳二亚胺(dcc)、n,n-二异丙基碳二亚胺(dic)(1-4当量)在三乙胺或n，n-二异丙基乙胺(dipea)(1-4当量)作用下缩合；优选反应条件为10-60摄氏度反应5-30小时。

10、(4)中间体4通过方法e关环得到中间体5，方法e优选反应溶剂为乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、二氧六环，优选试剂为三氯氧磷、三氯化铝、三氟化硼(1-5当量)，优选反应条件为30-100摄氏度反应2-24小时。

11、(5)中间体5通过方法f进一步还原得到中间体6，方法f优选反应溶剂为乙腈、四氢呋喃、甲醇，优选试剂为硼氢化钠或氰基硼氢化钠(2-10当量)；优选反应条件为-10-40摄氏度反应0.1-3小时。

12、(6)中间体6通过方法g甲基化后得到中间体7，方法g优选反应溶剂为乙腈、四氢呋喃、甲醇，优选甲基化试剂为多聚甲醛或甲醛溶液(2-50当量)，优选催化剂为甲酸、乙酸、三氟乙酸、盐酸(2-50当量)；优选反应条件为30-80摄氏度反应5-30小时。

13、(7)中间体7通过方法h还原去苄基后得到中间体8，方法h优选反应溶剂为乙腈、四氢呋喃、甲醇，优选去苄基试剂为钯碳或海绵钯黑(0.05-1当量)与氢气作用，优选反应条件为30-100摄氏度反应5-40小时。

14、(8)中间体8使用高效液相手性色谱进行r和s构型手性产物的分离纯化，从而得到权利要求1所述的化合物i；手性分离方法优选固相手性填料法，洗脱剂优选正己烷/乙醇/二乙胺、正己烷/乙醇/三乙胺、正己烷/甲醇/二乙胺、正己烷/甲醇/三乙胺、正己烷/异丙醇/二乙胺、正己烷/异丙醇/三乙胺任意比例混合溶液、制备得到手性化合物，其对映体过量百分率大于95％。

15、所述的偏向激动为delta阿片受体gi蛋白偏向激动，所述疼痛包括急性、慢性、神经性疼痛、炎症性疼痛及癌痛等疾病。所述的神经性疼痛主要为带状疱疹疼痛，炎症性疼痛包括风湿性关节炎和膝骨关节炎。所述的化合物在制备镇痛药物中的应用，其特征在于该药物由结构式i作为活性成分与常规药用载体制成的药物组合物。所述的药物组合物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、注射剂或气雾剂。

16、本发明化合物i的应用具体体现在该化合物在小鼠热板实验、福尔马林诱导的炎症模型及完全弗氏佐剂诱导的慢性炎症模型中均体现了较好的镇痛效果，且无明显耐药性以及便秘、抽搐、兴奋性运动等副作用、并且急性毒性实验表明其安全性良好，具有一定的血脑屏障透过率。此分子的发现为低副作用镇痛药物的研发提供了候选分子。

17、细胞实验表明该化合物是阿片受体delta亚型的偏向激动剂；动物实验表明该化合物在急性和慢性疼痛模型上具有显著的镇痛作用，无耐药、便秘、抽搐、兴奋性运动等副作用，并且急性毒性实验表明其安全性良好；药代动力学相关实验表明该化合物能够透过血脑屏障。该化合物可用于急性疼痛、慢性疼痛、炎症性疼痛和神经性疼痛等相关疾病的治疗。

18、本发明的有益效果

19、本发明公开了一种二苯醚取代的四氢异喹啉化合物的合成方法与应用，该化合物在急性疼痛和慢性疼痛上都具有显著的镇痛作用，且无耐药、便秘、抽搐、兴奋性运动等副作用。该化合物在急性疼痛、慢性疼痛、炎症性疼痛和神经性疼痛等相关疾病的治疗中具有较好的开发前景。

20、说明附图

21、图1为化合物i的结构式。

22、图2为化合物i的gi偏向活性测定

23、图3为化合物i的β-arrestin2活性测定

24、图4为化合物i在小鼠热板模型上的镇痛作用

25、图5为化合物i在小鼠福尔马林致痛实验中的镇痛效果。

26、图6为化合物i在完全弗氏佐剂诱发的炎症模型上的镇痛效果。

27、图7为化合物i的耐药性评价。

28、图8为化合物i的便秘副作用评价。

29、图9为化合物i的抽搐副作用评价。

30、图10为化合物i的兴奋性运动副作用评价。

31、图11为化合物i的小鼠急性毒性测试结果。

32、图12为化合物i的血脑屏障透过性评价。