一种复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法与流程

本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种复方阿莫西林克拉维酸的色谱检测方法。

背景技术：

1、阿莫西林为广谱青霉素类抗生素，克拉维酸钾本身只有微弱的抗菌活性，但具有β内酰胺酶抑制作用，两者合用，可以保护阿莫西林免遭β内酰胺酶水解。由于阿莫西林和克拉维酸联合使用的情况非常常见，能够用一种方法同时检测阿莫西林和克拉维酸显得尤为重要，但由于克拉维酸的酸不稳定性，阿莫西林和克拉维酸的理化性质差异等情况，使得阿莫西林和克拉维酸同时检测更为困难和复杂。

2、cn114689720a公开了一种阿莫西林克拉维酸钾片中阿莫西林和克拉维酸钾含量的测定方法，色谱条件为：以十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱，以水为溶剂，以0.05mol/l磷酸二氢钠(ph4.4)-甲醇(95:5)为流动相，等度洗脱，检测波长为梯度。该方法通过检测波长为梯度的方法，克服克拉维酸钾拖尾的问题，而本技术方案磷酸盐缓冲液的ph6.0，试验1结果表明，当磷酸盐-甲醇的整体比例为95:5时，磷酸盐的比例不同，检测出阿莫西林和克拉维酸的含量不同，可见流动相中磷酸盐的比例影响阿莫西林和克拉维酸含量的检测，且当磷酸盐缓冲液的ph为6.0，磷酸盐-甲醇的整体比例为95:5时，检测出阿莫西林和克拉维酸的含量与真实值有偏差，因此，该现有技术对本发明没有启示。

3、cn2020116234052a公开了一种同时测定阿莫西林克拉维酸钾血药浓度的方法，色谱条件为：色谱柱为ymc-pack ods-aq 250×4.6mm，5μm，以磷酸二氢钠缓冲液为流动相a，用磷酸调节ph值至3.64；以磷酸二氢钠缓冲液和甲醇的混合液为流动相b，磷酸二氢钠缓冲液与甲醇的体积比为10:90。其中，磷酸二氢钠缓冲液中，磷酸二氢钠的浓度为0.065mol/l。该方法采用梯度洗脱，且分析时间长。

4、现有技术中上述方法普遍存在峰型不好、色谱柱适用范围窄等缺点。

技术实现思路

1、针对以上技术现状，本发明提供一种复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法，所述方法包括：色谱柱为c18柱；流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液-水的比例为，10:5-15:85-75作为实施方案之一，优选比例为10：10：80。

2、本发明方法中，作为实施方案之一，所述复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法包括：色谱柱为岛津c18柱、hypersil(依利特)c18柱或waters c18柱。

3、本发明方法中，作为实施方案之一，所述复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法包括：所述磷酸盐缓冲液ph值为6.0。

4、本发明方法中，作为实施方案之一，所述复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法包括：所述高效液相色谱法的检测波长为210-220nm，优选为215nm。

5、本发明方法中，作为实施方案之一，所述复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法包括：所述色谱柱的柱温设定为25℃。

6、本发明方法中，作为实施方案之一，所述复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法包括：进样体积为10μl。

7、本发明方法中，作为实施方案之一，所述复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法包括：流动相的流速为1.0ml/min。

8、本发明方法中，作为实施方案之一，所述复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法包括：磷酸盐缓冲液中磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵中的一种，优选为磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。

9、本发明方法中，作为实施方案之一，所述复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法包括：复方阿莫西林克拉维酸的产品形式为粉剂(名称复方阿莫西林粉)，可用于阿莫西林克拉维酸钾原料药及制剂。

10、本发明提供一种复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法，其检测条件为：

11、所述色谱柱为岛津c18柱、hypersil(依利特)c18柱或waters c18柱；

12、流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液-水的比例为10：10：80；

13、磷酸盐缓冲液ph为6.0；

14、柱温：25℃；

15、进样量：10μl；

16、流速：1.0ml/min；

17、洗脱梯度：等度洗脱；

18、波长：215nm

19、上述阿莫西林克拉维酸的检测方法，所述磷酸盐缓冲液中磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢铵或磷酸氢二铵中，或其中的两种或两种以上的组合；优选磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。

20、称取适量磷酸盐，加水使溶解成1000ml，调ph值至6.0。

21、有益效果

22、1、通过筛选，流动相甲醇-磷酸盐缓冲液(ph6.0)-水的比例为10：5-15：85-75时，阿莫西林和克拉维酸的峰型良好，含量检测结果更准确，色谱柱的适用范围广。

23、2、通过筛选，甲醇-磷酸盐缓冲液(ph6.0)-水的比例为10:10:80，阿莫西林和克拉维酸钾含量检测结果更准确。

技术特征：

1.一种复方阿莫西林克拉维酸的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述方法包括：色谱柱为c18柱；流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液-水的比例为10:5-15:85-75，优选比例为10：10：80。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括：色谱柱为岛津c18柱、hypersil(依利特)c18柱或waters c18柱。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括：磷酸盐缓冲液ph为6.0。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括：高效液相色谱法的检测波长为210-220nm，优选为215nm。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括：色谱柱的柱温设定为25℃。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括：进样体积为10μl。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括：流动相的流速为1.0ml/min。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液中磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸二氢铵或磷酸氢二铵，或其中的两种或两种以上的组合，优选为磷酸二氢钾或磷酸氢二钾。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述复方阿莫西林克拉维酸为粉剂。

10.根据权利要求1～9任一所述的检测方法，其特征在于，所述方法包括：

技术总结本发明涉及一种复方阿莫西林克拉维酸的检测方法，所述方法为高效液相色谱法，其中，流动相为甲醇‑磷酸盐缓冲液‑水的比例为10:5‑15:85‑75磷酸盐缓冲液pH值为6.0，本发明所述方法检测结果更准确，色谱柱的适用范围更广。技术研发人员：刘红池,李艳敏,司玉莹,师玉洁,胡宪明,杨冬梅受保护的技术使用者：内蒙古联邦动保药品有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/1