一种小儿健脾丸的鉴别及含量测定方法与流程

本发明涉及中成药质量检测方法，特别涉及一种小儿健脾丸的鉴别及含量测定方法，包括鉴别方法和含量测定方法。

背景技术：

1、小儿健脾丸小蜜丸处方来源于《部颁标准中药成方制剂第二十册》；处方由人参、白术（麸炒）、茯苓、甘草（蜜炙）、陈皮、法半夏、白扁豆（去皮）、山药、莲子（去心）、南山楂、桔梗、砂仁、六神曲（麸炒）、麦牙（炒）、玉竹十五味中药材组成；

2、《部颁标准中药成方制剂第二十册》中小儿健脾丸标准中，产品规格为大蜜丸，每丸重3g功能与主治为健脾、和胃、化滞；用于小儿脾胃虚弱引起的消化不良，不思饮食,大便溏泻，体弱无力；

3、由于大蜜丸服用起来不方便，难以吞咽，患者用药依从性较差，临床应用量逐渐减少，而小蜜丸体积小、表面光滑、便于吞服，同时其成分稳定、便于保存；具有服用方便、携方便带、质量可控等优点；故进行了小儿健脾丸小蜜丸规格的研制；制备工艺为：以上十五味，粉碎成细粉，过筛，混匀；每100g粉末加炼蜜110～120g制成小蜜丸，即得；该小儿健脾丸剂型为：小蜜丸，规格为：每10丸重2g；

4、《部颁标准中药成方制剂第二十册》中小儿健脾丸标准规定了以下内容；

5、显微鉴别：

6、不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛液溶化;菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm；草酸钙针晶细小，长10～32μm，不规则地充塞于薄壁细胞中；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；草酸钙方晶成片存在于薄壁组织中；内种皮厚壁细胞黄棕色或棕红色，表面观类多角形，壁厚，胞腔含硅质块；果皮细胞纵列，常有1个长细胞与2个短细胞相间连接，长细胞壁厚，波状弯曲，木化；

7、检查，应符合丸剂项下有关各项规定；

8、但是上述质量标准存在着比较严重的缺陷，该标准对于主要药物未进行有效成分化学鉴别和含量的定量测定，已经不能对药品的质量进行有效控制。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本发明提供一种小儿健脾丸的鉴别及含量测定方法，该小儿健脾丸的处方组成为：人参、白术（麸炒）、茯苓、甘草（蜜炙）、陈皮、法半夏、白扁豆（去皮）、山药、莲子（去心）、南山楂、桔梗、砂仁、六神曲（麸炒）、麦牙（炒）、玉竹；制备工艺为：以上十五味，粉碎成细粉，过筛，混匀；每100g粉末加炼蜜110～120g制成小蜜丸，即得；该小儿健脾丸剂型为：小蜜丸，规格为：每10丸重2g；鉴别及含量测定方法的步骤是：

2、s1：对小儿健脾丸中的人参鉴别；

3、s2：对小儿健脾丸中的法半夏鉴别；

4、s3：对小儿健脾丸中的陈皮鉴别；

5、s4：对小儿健脾丸中的桔梗鉴别；

6、s5：对小儿健脾丸中的甘草鉴别；

7、s6：对小儿健脾丸中的陈皮含量测定。

8、优选地，所述s1：对小儿健脾丸中的人参鉴别步骤为：

9、人参鉴别方法，具体如下：

10、取本品5g，研碎，加三氯甲烷40ml，加热回流1小时，弃去三氯甲烷液，药渣挥干溶剂，加水0.5ml搅拌湿润，加水饱和正丁醇10ml，超声处理30分钟，吸取上清液加3倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

11、另取人参对照药材1g，同法制成对照药材溶液；再取人参皂苷rb1对照品、人参皂苷re对照品、及人参皂苷rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；

12、照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～2μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展至12cm，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视；

13、取处方中不含人参的阴性样品2.5g，同法制备阴性样品溶液；经过对3个不同厂家薄层板，高温（35～40℃）、高湿（70～90%）条件下及低温（4～10℃）、低湿（20～40%）条件下考察；

14、供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。

15、优选地，所述s2：对小儿健脾丸中的法半夏鉴别步骤为：

16、取本品5g，研细，加盐酸2ml，三氯甲烷20ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液；

17、另取半夏对照药材2g，同法制成对照药材溶液；

18、照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl、分别点于同一硅胶gf254薄层板上，以石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯-丙酮-甲酸(30:6:5:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视；

19、供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点。

20、优选地，所述s3：对小儿健脾丸中的陈皮鉴别步骤为：

21、取本品5g，研细，加甲醇10ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液5ml，浓缩至1ml，作为供试品溶液，再取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；

22、再取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；

23、照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一用0.5％氢氧化钠溶液制备的硅胶g薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(100:17:13)为展开剂，展至约3cm，取出，晾干，再以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水(20:10:1:1)的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯(365nm)下检视；

24、供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

25、优选地，所述s4：对小儿健脾丸中的桔梗鉴别步骤为：

26、取本品5g，研细，加7％硫酸乙醇-水(1:3)混合溶液20ml，加热回流3小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，合并三氯甲烷液，加水洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；

27、另取桔梗对照药材1g，同法制成对照药材溶液；

28、照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；

29、供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

30、优选地，所述s5：对小儿健脾丸中的甘草鉴别步骤为：

31、取本品5g，研细，加乙醚40ml，加热回流1小时，滤过，弃去醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；

32、另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液；

33、照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1～2μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶g薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水(15:1:1:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视；

34、供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

35、优选地，所述s6：对小儿健脾丸中的陈皮含量测定步骤如下：

36、色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％醋酸溶液(40:60)为流动相；检测波长为283nm；理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000；

37、对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，即得；

38、供试品溶液的制备：取本品适量，研碎，取1.0g，精密称定；置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

39、测定法：分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

40、本发明的有益效果为：

41、本发明所提供的质量检测方法，药材的鉴别方法专属性强，阴性无干扰，陈皮含量测定方法准确，重现性好，使用本发明方法能够精确、稳定地控制小儿健脾丸的药物质量，以适应药物的工业化稳定生产。