对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇及其制备方法和应用

本发明涉及一种新化合物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、神经退行性疾病(neurodegenerative diseases)：是由于大脑和脊髓的神经元和/或其髓鞘丧失所致的疾病状态，并随着时间的推移而逐渐恶化。临床上主要包括阿尔兹海默氏症(ad)、帕金森病(pd)、肌萎缩性侧索硬化(als)和亨廷顿病(hd)等。目前，西药仅有少数几个药物可用于一些神经退行性疾病。因此，从天然产物中寻找具有神经保护活性的化合物具有十分重要的意义。

2、玉米须为禾本科玉蜀黍植物玉米(zea mays l.)的花柱和柱头，又名玉麦须、玉蜀黍芯、棒子毛等，全国大部分地均产。有利水消肿，平肝利胆的作用。因为玉米须能加速血液凝固过程，提高血小板数目，能够抗溶血，所以可以作为止血药兼利尿药，应用于膀胱及尿路结石，还可以用于急性溶血性贫血。其化学成分包括黄酮类、萜类、甾醇、皂苷、多糖、氨基酸和有机酸等。且具有广泛的药理作用，如抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗氧化、降血压、神经保护、抗菌、抗炎等。玉米须无毒，可煮茶饮，具有泄热通淋的功效。

技术实现思路

1、本发明目的是为了提供一种具有体外神经保护活性的新化合物对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇。

2、本发明的第二个目的是提供了对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的制备方法。

3、本发明的第三个目的是提供了对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇在神经保护中的应用。

4、对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇(8,10-dihydroxy-7(12)-stigmene)的分子式为c20h34o4，分子量为338.2457，分子结构式为：

5、

6、所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的制备方法如下：

7、(1)将干燥的玉米须剪碎，置于索氏动态提取浓缩机组的提取罐中，用体积浓度为70％的乙醇进行提取3次，合并提取液得到乙醇提取液；

8、(2)将步骤(1)得到的乙醇提取液采用索氏动态提取浓缩机组进行浓缩得到浸膏，所得浸膏用水进行分散得到混悬液，然后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，得到乙酸乙酯萃取物；

9、(3)将步骤(2)得到的乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱色谱分离，用体积比为100:0、100:10、100:30、100:50、100:70、0:100的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂进行梯度洗脱，共收集到9个流份fra、frb、frc、frd、fre、frf、frg、frh和fri；

10、取体积比为100:50二氯甲烷和甲醇的混合溶剂的洗脱物的流份frf进行硅胶柱色谱分离，用体积比为40:1、30:1、20:1、10:1、1:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂进行梯度洗脱，收集得到4个亚流份frf-1、frf-2、frf-3、frf-4；

11、取体积比为10:1二氯甲烷和甲醇的混合溶剂的洗脱物的亚流份frf-3进行反相硅胶柱色谱分离，用质量浓度为10％、20％、30％、50％、70％、80％和100％的甲醇水溶液进行梯度洗脱，收集得到6个亚流份frf-4-1、frf-4-2、frf-4-3、frf-4-4、frf-4-5、frf-4-6；

12、取质量浓度为30％的甲醇水溶液的洗脱物亚流份frf-4-3进行硅胶柱色谱分离，用体积比为20:1、10:1、5:1、3:1、1:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂进行梯度洗脱，取体积比为3:1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂的洗脱物，即得到对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇。

13、步骤(1)所述索氏动态提取浓缩机组压力设定为常压提取，提取温度设定为80℃～90℃。

14、步骤(2)所述索氏动态提取浓缩机组浓缩条件为-0.05mpa～-0.08mpa。

15、步骤(2)所述混悬液密度为2.5g/ml。

16、所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇作为制备抗神经退行性疾病药物的活性成分，用于保护apph诱导的pc-12细胞的活性。

17、所述抗神经退行性疾病药物的剂型包括注射剂、冻干粉针剂、口服制剂。

18、所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、口服液、缓控释制剂。

19、所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇是从禾本科玉蜀黍植物玉米须(stigmamaydis)中分离得到的。

20、对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇白色无定型粉末，uv(meoh)λmax：199nm。质谱数据显示hr-esi-ms:m/z 361.2350[m+na]+(计算值为361.2349)，确定分子式为c20h34o4，计算不饱和度为4。

21、本发明的对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇具有较强的神经保护活性，在25μm浓度下细胞存活率为45.78±0.71％。可将本发明的对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇制成注射剂、冻干粉针、输液剂或口服制剂(包括片剂、颗粒剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、口服液和缓控释制剂)等抗神经退行性疾病药物。

22、有益效果：与现有技术相比，本发明具备以下优点：

23、1、本发明首次获得了新化合物对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇，而且该制备方法获得的对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的纯度高，达98.0％以上。

24、2、本发明对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇具有较强的体外神经保护活性，对apph诱导的pc-12细胞在25μm浓度下细胞存活率为45.78±0.71％。

技术特征：

1.对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇，其特征在于所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的分子式为c20h34o4，分子量为338.2457，分子结构式为：

2.根据权利要求1所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的制备方法，其特征在于所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的制备方法如下：

3.根据权利要求2所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的制备方法，其特征在于步骤(1)所述索氏动态提取浓缩机组压力设定为常压提取，提取温度设定为80℃～90℃。

4.根据权利要求2所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的制备方法，其特征在于步骤(2)所述索氏动态提取浓缩机组浓缩条件为-0.05mpa～-0.08mpa。

5.根据权利要求2所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的制备方法，其特征在于步骤(2)所述混悬液密度为2.5g/ml。

6.权利要求1所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的应用，其特征在于所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇作为制备抗神经退行性疾病药物的活性成分，用于保护apph诱导的pc-12细胞的活性。

7.根据权利要求6所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的应用，其特征在于所述抗神经退行性疾病药物的剂型包括注射剂、冻干粉针剂、口服制剂。

8.根据权利要求6所述对映-贝壳杉-3,16,17,19-四醇的应用，其特征在于所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、软胶囊剂、硬胶囊剂、口服液、缓控释制剂。

技术总结对映‑贝壳杉‑3,16,17,19‑四醇及其制备方法和应用，涉及一种新化合物及其制备方法和应用。本发明提供了一种具有体外神经保护活性的化合物对映‑贝壳杉‑3,16,17,19‑四醇。本发明对映‑贝壳杉‑3,16,17,19‑四醇提取自玉米须，分子式为C20H34O4，分子量为338.2457，制备方法：一、将干燥玉米须用70％乙醇提取；二、回收乙醇的浸膏用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取；三、乙酸乙酯萃取物经硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱方法分离，即得。作为制备抗神经退行性疾病药物的活性成分，用于保护APPH诱导的PC‑12细胞的活性。其具有较好的体外神经保护活性。本发明属于天然药物有效成分提取领域。技术研发人员：刘吉成,张金玲,李宗锴,洪瑜,马玉坤,孙宇,刘琦受保护的技术使用者：齐齐哈尔医学院技术研发日：技术公布日：2024/8/1