一种用于疤痕修复的负载AS-PNS纳米晶的可溶性微针的制备及应用

本发明涉及生物医用材料领域。更具体地，涉及用于疤痕修复的负载as-pns纳米晶的可溶性微针的制备及应用。

背景技术：

1、瘢痕增生(hypertrophic scars,hs),是伤口愈合过程中产生的病理状态，主要表现为表皮层和真皮层增厚，角质细胞、成纤维细胞、血管、胶原蛋白等过度增殖、紊乱排列。导致患者皮肤功能下降，造成了严重的心理障碍如自卑和焦虑。目前预防或治疗增生性瘢痕的方式主要包括手术疗法和非手术疗法。单纯采用手术疗法的复发率达到了50-100％，因此常与其它治疗手段联用应用。非手术疗法包含药物注射、压迫疗法、冷冻疗法、激光疗法、放射疗法、紫外线照射等。病灶部位药物注射治疗一直以来都是治疗增生性瘢痕的主要手段之一，如注射皮质类固醇激素、5-氟尿嘧啶(5-fu)可下调tgf-β、vegf等细胞因子的表达促进成纤维细胞凋亡，抑制成纤维细胞的过度增殖及合成，减少胶原纤维等细胞外基质的合成及沉淀，促进机体瘢痕内胶原合成和降解的平衡。但皮下药物注射可引起疼痛、全身副作用如月经功能障碍、白内障和青光眼及局部副作用如皮肤变薄和萎缩、类固醇痤疮、毛细血管扩张、色素沉着不足等。迄今为止，治疗瘢痕增生的方式相对有限。因此，开发一种能够兼具高效性及顺应性的经皮给药方式是很有必要的。

2、可溶性微针(dissolvable microneedles，dmns)是指由各种可穿透皮肤角质层的材料制备而成，是一种新型的经皮给药制剂，由多酚微米大小的针尖及底座组成，能够穿透皮肤角质层，不触及皮肤痛觉神经末梢，无痛给药。相较于传统的药膏、皮肤贴剂、注射给药，可溶性微针给药技术更高效、药物种类更丰富。可溶性微针因其自身优势，有望成为抗瘢痕增生药物经皮递送的治疗策略。

3、有学者尝试制备含积雪草苷的脂质体、聚合物纳米粒、纳米纤维、纳米乳等。纳米制剂因其较低的粒径更易被细胞内化生物利用度较高。然而，复杂的制备过程及纳米载体往往导致药物损失和载药量低，纳米晶是一种尺寸小于1μm、无载体、含少量稳定剂的晶态或无定型态药物，具有载药量高，易于产业化的优势。因此本发明

技术实现思路

1、积雪草苷(asiaticoside,as)一种从积雪草中提取的三萜类活性成分，在创伤修复中具有双向调节作用，如抗炎、抗纤维化、成骨分化，促进伤口愈合炎症期的血管生成，及成纤维细胞增殖，也能在瘢痕增生阶段削弱血管生成，促进伤口的无瘢痕修复。积雪草苷可以通过多条信号通路调节炎症反应，发挥生物学作用，治疗相关疾病，具有高效的生物活性和人体安全性。但是，as水溶性差(250ug/ml)、高分子量(959.2g/mol)，严重限制了其药理活性。三七总皂苷(panax notoginseng saponins,pns)是从五加科植物三七中提取得到，主要含有人参皂苷rg1、rb1、rd、re和三七皂苷r1等。具有活血祛瘀、通脉活络的功效，能够抑制炎症反应、改善血脂、舒张血管降低血压、抗血小板聚集、抑制血栓形成改善微循环等。常用于治疗心血管疾病，在促进伤口愈合及治疗瘢痕增生中也具有良好的疗效。选用三七总皂苷(pns)还具有天然表面活性剂的作用，在消肿祛瘀的同时，还能作为稳定剂制备as-pns纳米晶，借助微针的物理促渗作用，进一步将as-pns纳米晶载入可溶性微针中，提高药物的经皮给药效率，用更有效地治疗瘢痕增生。

2、因此，本研究提供了一种负载as-pns纳米晶可溶性微针，包括可溶性微针针体等，可溶性微针针体包含负载as-pns纳米晶；其中，负载as-pns纳米晶由包含积雪草苷、三七皂苷两种活性成分。所述三七皂苷包括三七总皂苷总提物、三七皂苷rb1、人参皂苷rg1、人参皂苷re、人参皂苷rd、三七皂苷r1中的一种或几种混合物。所述负载as-pns纳米晶活性成分的含量以质量百分数计，积雪草苷的占比为0.1％-1.0％、三七皂苷的占比为0.1％-1.0％。

3、负载as-pns纳米晶可溶性微针的制备方法具体为：

4、1)as-pns纳米晶制备：将积雪草苷(as)溶解在乙醇与二甲基亚砜混合有机溶剂中，制得a相；将三七总皂苷(pns)溶解在去离子水中，制得b相。将含as的有机相缓慢滴入含pns的水相中，磁力搅拌或超声制备as-pns纳米晶；

5、2)可溶性微针制备：可溶性微针基质在水中溶胀，pdms微针阴模放入微针基质中离心填充，室温通风处干燥后脱模即得；

6、3)负载as-pns纳米晶可溶性微针的制备：配置as-pns纳米晶混悬液，将可溶性微针基质溶解于as-pns纳米晶混悬液，超声混匀除去气泡。将微针pdms阴模置于溶液中，离心填充，干燥，脱模即得as-pns纳米晶可溶性微针贴片。

7、本发明的有益技术效果是：

8、1)发挥了as-pns的药对优势，将as促进伤口愈合炎症期的血管生成，及成纤维细胞增殖、在瘢痕增生阶段削弱血管生成、促进伤口的无瘢痕修复与pns活血祛瘀、通脉活络、抑制血小板聚集的活性形成药对效应。有效提升制剂的活性。

9、2、利用pns具有天然表面活性剂的作用，制备as-pns纳米晶混悬液，实现辅料与药物同时发挥促进伤口无瘢痕修复的药效。

10、3、利用可溶性微针在经皮给药中的优势，将as-pns纳米晶载入可溶性微针中，借助可溶性微针的物理机械性能，穿刺皮肤屏障，实现局部快速给药。

技术特征：

1.一种用于疤痕修复的负载as-pns纳米晶可溶性微针贴片，包括可溶性微针针体，其特征在于：所述可溶性微针针体包含的负载as-pns纳米晶；其中，负载as-pns纳米晶由包含积雪草苷、三七皂苷两种活性成分。

2.根据权利要求1所述的一种负载as-pns纳米晶可溶性微针，其特征在于：所述三七皂苷包括三七总皂苷总提物、三七皂苷rb1、人参皂苷rg1、人参皂苷re、人参皂苷rd、三七皂苷r1中的一种或几种混合物。

3.根据权利要1所述的纳米晶制剂，其特征在于，所述负载as-pns纳米晶活性成分的含量以质量百分数计，积雪草苷的占比为0.1％-1.0％、三七皂苷的占比为0.1％-1.0％。

4.根据权利要求1所述的纳米晶制剂，其特征在于，所述as-pns纳米晶除活性成分外包括还包括有机溶剂和水；其中，有机溶剂包括乙醇、甲醇、乙腈、丙酮、二甲基亚砜中的一种或多种混合物。

5.根据权利要求7中所述的一种负载as-pns纳米晶可溶性微针，其特征在于as-pns纳米晶混悬液浓度可以在1-18mg/ml。

6.负载as-pns纳米晶的制备方法,包括负载as-pns纳米晶，其特征在于:负载as-pns纳米晶的制备包括以下步骤：

7.负载as-pns纳米晶的可溶性微针在制备疤痕修复药物中的应用。

技术总结本发明属于生物医用材料技术领域，具体为一种负载AS‑PNS纳米晶可溶性微针的制备及应用。一种负载AS‑PNS纳米晶可溶性微针的制备方法，包括以下步骤：(1)AS‑PNS纳米晶的制备：将积雪草苷(AS)溶解在有机溶剂中制备成有机相，将PNS溶解在水中制备成水相，有机相缓慢滴入水相磁力搅拌或超声获得AS‑PNS纳米晶；(2)负载AS‑PNS纳米晶可溶性微针的制备：可溶性微针基质聚乙烯吡咯烷酮PVP‑K90溶解于AS‑PNS纳米晶混悬液，充分溶胀混匀，排除气泡后，加入十二甲氧基硅烷(PDMS)微针阴模，离心填充后室温干燥，脱模即得。技术研发人员：杨荣平,黄寒梅受保护的技术使用者：西南大学技术研发日：技术公布日：2024/8/16