一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法与流程

本发明涉及水产养殖微生物，特别涉及一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法。

背景技术：

1、随着我国对虾养殖产业的迅速发展，对虾养殖业在全球范围内占有重要地位，但随着养殖规模的扩大，一系列问题逐渐浮现。养殖环境水质的恶化及对虾疾病频发已经成为不容忽视的问题，其中养殖水体氨氮过高以及细菌弧菌病害泛滥影响两大主要问题。为了应对上述问题，微生态制剂逐渐在对虾养殖业中得到了广泛应用。微生态制剂主要通过引入有益微生物来改善养殖环境，提高养殖对象的免疫力，从而减少疾病的发生，目前市面上现有的微生态制剂作用往往比较泛化，专业性较差。微生态制剂的制作、加工工艺手段落后、单一，对微生态制剂生产后处理阶段手段匮乏。这可能导致微生态制剂在与饲料混合的过程中被其他有害菌污染，无法保证其安全稳定性；目前在我国，适宜作对虾专用的微生态制剂的菌种种类相对较少。同时，微生物配伍不理想，可能导致菌株的生长、繁殖条件受到影响，难以发挥其应有的作用；

2、相较于单一微生物制剂，复合微生态制剂具有更多的优势。它可以通过引入多种有益微生物来协同作用，从而更全面地改善养殖环境。此外，复合微生态制剂还可以提高养殖对象的免疫力，增强其对疾病的抵抗力。为此，本发明通过复合微生态制剂的开发，通过筛选、驯化开发复合型功能的微生态制剂，适用于对虾养殖的菌种，并优化微生物的配伍。降低水中氨氮含量，有效抑制弧菌生长，提高对虾免疫功能，进一步提高苗种质量和育苗的稳定性

技术实现思路

1、鉴于此，本发明提出一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，解决上述问题。

2、本发明的技术方案是这样实现的：一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法：包括以下步骤：

3、s1、菌株选择：筛选具有益生作用、环境适应性强的复合有效菌，经活化处理12-24h，使活菌量均达到1.52×109cfu/ml以上；

4、s2、富集培养：将上述活化后的复合有效菌接种至富集培养基中富集培养，接种量为1.2-1.8％，培养过程采用常温和低温培养交替进行的方式进行驯化，常温和低温培养交替进行2-4次为一个周期，连续培养3-5个周期，通过离心收集菌体沉积物；

5、s3、制备混悬液：取上述菌体沉积物与保护液混合，超声搅拌混匀，制成混悬液；

6、s4、调配：取混悬液、抗菌肽、调节剂按照质量体积比为(25-55)ml:(1.5-5.5)g:(3.2-8.5)g进行搅拌混合，用振荡器混匀，置于-4～2℃的冰箱静置20-40min，再转移到-20～-10℃静置50-70min，进行冷冻干燥4-6h，得到复合微生态制剂。

7、进一步的，所述s1中复合有效菌为体积比(4-6):(2-3):(1-3)的丁酸梭菌液、乳酸菌液、枯草芽孢杆菌液，活化后所述丁酸梭菌的活菌数≥1.8×109cfu/ml，乳酸菌的活菌数≥2.2×109cfu/ml，枯草芽孢杆菌的活菌数≥2.5×109cfu/ml。

8、进一步的，所述s1的活化处理是将复合有效菌接种到活化培养基中，接种量为0.5-1.0％，控制活化温度为25-37℃，ph为6-8，湿度80-90％，光照1000-2000lux。

9、进一步的，所述s2常温培养温度为27-35℃，培养时间6-10h，低温培养温度为13-15℃，培养时间14-18h。

10、进一步的，所述s2的富集培养基为ms基础培养基、葡萄糖5-10g/l、蔗糖0.2-0.4g/l、铵盐1.0-1.5mg/l、硫酸盐1.2-2.2mg/l、维生素c6-8g/l、胆盐0.05-0.1mg/l、玫瑰红酸0.03-0.08mg/l。

11、进一步的，所述s3菌体沉积物与保护液的质量体积比g/ml为10-18:2。

12、进一步的，所述s3保护液包括质量体积比g/ml为(3-10):(2-7):18的络蛋白、麦芽糖、甘油。

13、进一步的，所述s3的超声搅拌功率为0.5-1.2kw/m3，超声频率为15-85khz，超声处理时间0.5-1.5h。

14、进一步的，所述s4的抗菌肽为天蚕素、防御素、蜂毒素、铃蟾肽、杆菌肽、短杆菌肽s中任意一种。

15、进一步的，所述s4的调节剂包括以下重量份原料：褐藻多糖12-25份、芦笋多糖20-80份、黄柏提取物10-15份、紫苏提取物5-8份、桃金娘叶2-5份。

16、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

17、本项目通过复合微生态制剂的开发，通过筛选、驯化开发复合型功能的微生态制剂，复合微生态制剂中的有益菌进入水体后，可以发挥其氧化、反硝化、解磷、硫化、固氮等作用，迅速分解养殖动物的排泄物、残存饲料、动植物残骸等有机物，有效降低了水体氨氮和亚硝酸盐浓度。这有助于维持水体的清洁和稳定，为对虾提供一个良好的生长环境，促进水体中有益微生物的生长和繁殖，如单细胞藻类。这些微生物的光合作用可以提高水体的溶氧量，为对虾提供更多的氧气，有助于其健康生长；通过对水质的改善和有益微生物的促进，复合微生态制剂可以提高南美白对虾的养殖产量。同时，由于对虾生长环境的改善，也可以减少疾病的发生，进一步提高苗种质量和育苗的稳定性。

18、与传统的养殖方法相比，使用复合微生态制剂进行南美白对虾养殖可以减少化学药物的使用，降低对环境的污染。这有助于实现环保和可持续的养殖方式，符合现代农业的发展趋势；具有改善水质、促进有益微生物生长、提高养殖产量和环保可持续等多种有益效果。这为南美白对虾的养殖提供了一种新的、更加环保和高效的养殖方式。

技术特征：

1.一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s1中复合有效菌为体积比(4-6):(2-3):(1-3)的丁酸梭菌液、乳酸菌液、枯草芽孢杆菌液，活化后所述丁酸梭菌的活菌数≥1.8×109cfu/ml，乳酸菌的活菌数≥2.2×109cfu/ml，枯草芽孢杆菌的活菌数≥2.5×109cfu/ml。

3.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s1的活化处理是将复合有效菌接种到活化培养基中，接种量为0.5-1.0％，控制活化温度为25-37℃，ph为6-8，湿度80-90％，光照1000-2000lux。

4.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s2常温培养温度为27-35℃，培养时间6-10h，低温培养温度为13-15℃，培养时间14-18h。

5.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s2的富集培养基为ms基础培养基、葡萄糖5-10g/l、蔗糖0.2-0.4g/l、铵盐1.0-1.5mg/l、硫酸盐1.2-2.2mg/l、维生素c6-8g/l、胆盐0.05-0.1mg/l、玫瑰红酸0.03-0.08mg/l。

6.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s3菌体沉积物与保护液的质量体积比g/ml为10-18:2。

7.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s3保护液包括质量体积比g/ml为(3-10):(2-7):18的络蛋白、麦芽糖、甘油。

8.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s3的超声搅拌功率为0.5-1.2kw/m3，超声频率为15-85khz，超声处理时间0.5-1.5h。

9.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s4的抗菌肽为天蚕素、防御素、蜂毒素、铃蟾肽、杆菌肽、短杆菌肽s中任意一种。

10.如权利要求1所述的一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述s4的调节剂包括以下重量份原料：褐藻多糖12-25份、芦笋多糖20-80份、黄柏提取物10-15份、紫苏提取物5-8份、桃金娘叶2-5份。

技术总结本发明提供一种南美白对虾养殖复合微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：S1菌株选择、S2富集培养、S3制备混悬液、S4调配等步骤，筛选具有益生作用、环境适应性强的复合有效菌，接种到活化培养基中，形成的微生物群落有助于形成良性循环生态系统，通过富集培养，提高菌株的生长速度和代谢活性、促进菌株的适应性、增加菌株的多样性、提高菌株的酶活性；加入抗菌肽和调节剂，抑制细菌和藻类的生长，清除水中的有害细菌和藻类来改善水质。这有助于减少水体中的氨态氮、亚硝酸盐等有毒物质，植物多糖等可以作为微生物的碳源和能源，促进有益微生物的生长和繁殖，增强水体的自净能力，提高水体的溶解氧含量，改善对虾的生长环境，减少疾病的发生。技术研发人员：司周旋,劳斌,胡志国受保护的技术使用者：海南海兴农海洋生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/9/2