一种降低雷公藤毒性的炮制方法与流程

本发明属于中药，具体涉及一种降低雷公藤毒性的炮制方法。

背景技术：

1、雷公藤( tripterygium wilfordi hook.)为卫矛科植物雷公藤的根。其味辛苦，药性温凉、入肝、脾二经、通十二经络。最早记载于《神农本草经》，其皮有毒，药用其蕊。具有清热解毒、祛风通络、舒筋活血、消肿止痛、杀虫止血等功效。雷公藤在临床上效果显著，但是大量研究表明其临床上的毒副作用不容小视，由于其有效成分也就是其毒性成分，如何在不影响其疗效的基础上降低或者消除其毒性，一直是研究人员广为关注的重要问题。

2、雷公藤是国内外公认具有良好疗效的治疗类风湿性关节炎等自身免疫功能亢进性疾病的中药，其主要有效成分为雷公藤甲素等二萜内酯类成分。临床上以雷公藤为原料的中成药有雷公藤片、雷公藤多苷片等；目前已上市的雷公藤类制剂有雷公藤片、雷公藤多苷片、雷公藤内酯软膏等；原料药有雷公藤多苷、雷公藤内酯和雷公藤提取物等；处方中含有雷公藤属植物的药品有金关片、骨风宁胶囊、昆仙胶囊等。其质量控制标准大多控制雷公藤甲素、雷公藤内酯甲。如雷公藤多苷片每片含雷公藤甲素不得过10 μg；每片含雷公藤内酯甲不得少于10 g。

3、炮制是中医药临床应用中降低有毒药物毒性的有效而且经济的途径之一。目前关于雷公藤的减毒情况如下：1、净制或修制法：雷公藤传统药用须去根皮，现认为应去其根皮及韧皮部两部分，用其木质部，称为净制或修制法（田磊磊,谭鹏,李飞. 炮制对雷公藤毒性影响的研究综述[c]. 中华中医药学会中药炮制分会, 武汉马应龙药业集团股份有限公司.中华中医药学会中药炮制分会2009年学术研讨会论文集. 2009: 3.）。净制法去掉了毒性最大但也是活性最大的根皮，该法虽然降低了毒性但同时降低了雷公藤的治疗效果，这样造成资源大大的浪费。2、煮法：水、甘草汁、莱菔子汁炮制对雷公藤的毒性有不同程度的降低，其中莱菔子汁和甘草汁煮对雷公藤的减毒效果最明显，雷公藤莱菔子炮制品的抗炎作用优于雷公藤生品；采用的药材为去除根皮净制后的雷公藤饮片（肖丽涓,毛泽玲,黄枚等.3种炮制方法对雷公藤肝肾毒性的减毒作用[j]. 福建中医药, 2024, 55(01): 35-37.）。3、炙法：炒炙雷公藤后对雷公藤诱导的小鼠生殖毒性均具有减毒作用（宋玲玲, 王君明, 弓明珠等. 炮制对雷公藤诱导的睾丸生殖毒性的减毒作用机制研究[j]. 时珍国医国药, 2021, 32(11): 2664-2667.）。4、蒸法：取雷公藤厚片置蒸制容器内，蒸制4 h后取出，干燥；其中雷公藤厚片为去皮雷公藤（南丽红,郑燕芳,徐伟等.不同炮制方法对雷公藤的急性毒性和抗炎作用的影响[j]. 时珍国医国药, 2015, 26(08): 1900-1902.）。5、浸泡法：清水浸泡2 d，取出沥干，暴晒2 d或烤干。反复浸泡、暴晒6次，至无原液出现；其中雷公藤需要剥去根茎中的内、外二层皮。

4、中国专利申请cn117338830a公开了一种白芍炮制的雷公藤中药饮片， 由白芍提取物、雷公藤提取物、基质、添加料和包衣液；该中药饮片的制备方法如下：s1、将白芍提取物、雷公藤提取物、添加料和无水乙醇混合，得到混合提取物；s2、将混合提取物加入到融化的基质，得到混合药液；s3、将混合药液滴入到二甲基硅油冷凝液中，冷凝固化成滴丸；s4、将包衣液包裹在滴丸上。该技术方案涉及多种化学试剂，操作步骤复杂，且并非对雷公藤原材料药进行炮制，直接使用雷公藤提取物，其中活性物质可能已经部分损失。

5、中国专利申请cn108904573a公开了一种雷公藤的炮制方法，包括以下步骤：(1)、将雷公藤放在水中浸泡2-3天，盐水洗净捞出沥干；(2)、将雷公藤去除两层皮，制成条状，并对半剖开，清水文火煮至沸腾，沸腾5-10 min取出沥干；(3)、暴晒1-2天获得干制品。该技术方案需要去皮处理，而根皮是毒性最大但也是活性最大的部位，造成活性成分损失，药效降低。

6、目前本领域的雷公藤的炮制方法大多步骤复杂，涉及多种化学试剂，或需要去皮处理，造成工艺繁琐，存在一定生物安全风险，而且会造成活性成分损失。

技术实现思路

1、中药发酵技术是现代生物技术和中药传统炮制技术结合的炮制方法。以其在中药以及生物领域中独有的优势，发挥着不可替代的作用。因此，本发明尝试将萝卜炮制与生物发酵结合，从而对雷公藤减毒。

2、为了实现上述技术目的，本发明提供了以下技术方案：

3、在一个方面，本发明提供了一种雷公藤的炮制方法，所述炮制方法包括以下步骤：

4、（1）将萝卜加入到溶剂中进行第一次加热，第一次过滤，收集第一次过滤液；

5、（2）收集第一次过滤液后，再将步骤（1）所述萝卜加入到溶剂中进行第二次加热，第二次过滤，收集第二次过滤液；

6、（3）合并第一次过滤液和第二次过滤液后，浓缩，得浓缩液；

7、（4）向雷公藤粉碎物中加入所述浓缩液和酒曲，发酵；

8、（5）发酵结束后烘干，得到经炮制的雷公藤。

9、在一些实例中，步骤（1）和步骤（2）中所述溶剂为水。

10、本发明所述的“萝卜（ raphanus sativus l.）”，其属于十字花科萝卜属，二年生或一年生草本植物，直根肉质，长圆形或圆锥形，外皮绿色、白色或红色；茎有无毛分枝；叶大头羽状半裂，有钝齿，疏生粗毛；花白色或粉红色，花瓣倒卵形，具紫纹；长角果圆柱形；种子卵形微扁，红棕色，有细网纹；花期4-5月，果期5-6月。

11、本发明所述的“酒曲”，是一种由微生物发酵而成的物质，是酿酒过程中的重要原料。它含有丰富的微生物群落，如酵母菌、霉菌等，这些微生物在适宜的温度和湿度条件下，能将粮食中的淀粉转化为糖分，进而产生酒精和其他风味物质。所述“酒曲”无特殊限制，市售酒曲均可实现本发明的技术效果，故对其来源不作限制。

12、在一些实例中，步骤（1）中所述溶剂与所述萝卜的质量体积比为8：1。

13、在一些实例中，步骤（1）中所述第一次加热的时间为10-15 min。

14、在一些实例中，步骤（2）中所述溶剂与所述萝卜的质量体积比为5：1。

15、在一些实例中，步骤（2）中所述第二次加热的的时间为10-15 min。

16、在一些实例中，所述第一次加热和第二次加热为煎煮。

17、在一些实例中，步骤（3）中所述浓缩液与步骤（4）中所述雷公藤粉碎物的质量体积比为1：1。

18、在一些实例中，步骤（4）中所述雷公藤粉碎物与所述酒曲的质量比为100：0.18。

19、在一些实例中，步骤（4）中所述发酵的条件包括：

20、35-38℃，75-80%rh，发酵时间为2-10天。

21、在一些优选的实例中，所述发酵时间为4-5天。

22、在一些更优选的实例种，所述发酵时间为4天。

23、在一些实例中，步骤（5）中所述烘干的温度为50℃。

24、在一些实例中，步骤（4）中所述雷公藤粉碎物的制备包括以下步骤：

25、将雷公藤原药材切片后粉碎。

26、在一些实例中，所述雷公藤原药材带皮。

27、在另一个方面，本发明提供了前述任一炮制方法得到的雷公藤炮制品。

28、在又一个方面，本发明提供了前述雷公藤炮制品在制备药物或药物原料中的用途。

29、在一些实例中，所述药物或药物原料包括雷公藤炮制品或其药物活性成分。

30、在一些实例中，所述药物为风湿类药物或类风湿类药物。

31、在一些实例中，所述药物还包含至少一种药学上可接受的赋形剂。

32、本发明创造性地发现使用萝卜对雷公藤炮制可以降低毒性，并结合生物发酵筛选出适合发酵减毒的微生物酒曲，最终结果显示毒性成分雷公藤甲和雷公藤红的含量显著下降，活性成分雷公藤内酯甲降低不明显。本发明提供的雷公藤炮制方法，实现了活性成分和毒性成分含量之间的平衡，既降低毒性成分的含量，又保证活性成分含量不下降，而且操作简便，适合工业化流程，由于不涉及化学试剂，生物安全性好，在产业化炮制雷公藤中具备独特的优势。