一种改善肤色的组合物及其应用的制作方法

本发明涉及一种改善肤色的组合物及其应用，属于化妆品。

背景技术：

1、肤色健康是维持皮肤年轻状态的关键。皮肤颜色分为“构成性肤色”和“选择性肤色”。构成性肤色是指非曝光部位皮肤颜色，主要由遗传决定；而选择性肤色是指曝光部位皮肤颜色，它受多种调节因素影响，如环境中的紫外线、热、毒性物质等，可通过人为干预的方式进行调节。

2、紫外线(ultraviolet，uv)辐射是引起皮肤损伤从而导致皮肤泛红的主要外部因素。uv会刺激皮肤细胞释放大量的ros(活性氧自由基)，造成蛋白质、脂质的氧化，并可以通过启动下游信号级联反应，调控各类细胞因子。而炎性介质和趋化因子作用于毛细血管，会诱导血管内皮细胞大量表达内皮素-1(endothelin 1，et-1)，增加血管通透性，引起组织液外渗，产生红斑、水肿等症状。细胞损伤后会释放一系列损伤相关分子模式，例如热休克蛋白(heat shock protein，hsp)，它保护细胞免受环境中自由基、热、毒性物质等各种应激因素导致的损伤，促进蛋白质的正确折叠、组装和纠正蛋白质的错误结构，促进损伤细胞的自我修复。此外，hsp也参与细胞的增殖、分化及细胞凋亡的转导调节等。hsp27是小分子量的hsp蛋白，在应激反应前期较短时间内，hsp27表达量迅速增加，对细胞进行自我修复，但随着时间延长，hsp27的表达量会减少，造成细胞损伤修复过程失衡。

3、非酶糖基化反应是指在无酶催化的条件下，还原性糖的醛基或酮基与蛋白质等大分子中的游离氨基反应生成不可逆产物—晚期糖基化终末产物(advanced glycationend-products,ages)的过程。ages为棕色或黑色具有荧光特性的大分子物质，存在于表皮层和真皮层中。其可通过直接沉积在皮肤组织上导致皮肤出现暗沉、发黄的现象，也可通过与晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end products，rage)结合，激活色素分泌相关信号通路间接导致皮肤色素沉着。

4、胶原蛋白是一种功能性蛋白，占体内所有蛋白的30％，主要存在于皮肤、软骨、肌腱等组织中，在维持细胞、组织和器官等正常生理功能方面发挥着重要作用。ⅳ型胶原蛋白是真皮-表皮连接处(dej)的主要成分，用于维持基底膜结构和功能的稳定。因动物胶原在生物安全性和免疫原性方面存在一定的风险，近些年具有更高纯度和更低免疫原性的重组胶原蛋白被不断开发出来代替动物胶原使用，生物合成的重组人源化ⅳ型胶原蛋白与人体天然胶原蛋白氨基酸序列高度一致，不仅能提供细胞生长的支架，而且具有多个活性位点，能与细胞表面的特异受体相互识别和作用，进而激活细胞内信号转导通路，参与细胞黏附、迁移、生长、增殖和分化等重要的生理过程，但目前生物合成的重组胶原蛋白成本较高，限制了其广泛应用。

5、薰衣草作为芳香植物，常被提取精油作为香薰、按摩油、香精、化妆品原料等使用；除制备精油外，通过植物外泌体提取方法得到的薰衣草外泌体提取物能够起到抗皮肤老化、抑制皮肤炎症及抗糖化的作用(cn117187156a)。

6、发明人经研究发现，目前对于重组ⅳ型胶原蛋白的功效研究较为单一。专利cn117720638a主要研究了经修饰后的重组ⅳ型胶原蛋白的抗氧化及抗炎功效，专利cn117024572a制备了一种具有抗皱效果的重组ⅳ型胶原蛋白。但并没有关于重组ⅳ型胶原蛋白通过保护细胞免受环境压力损伤，增强细胞自我修复力，抑制内皮素的表达及抗糖化来改善肤色的相关研究。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明提供了一种改善肤色的组合物及其应用。本发明的组合物包括重组人源化ⅳ型胶原蛋白和薰衣草外泌体，该组合物能够增加热休克蛋白的表达，提高热压力胁迫下的细胞活力，抑制内皮素的表达及糖化产物的产生，从而起到改善肤色的作用。

2、本发明的技术方案如下：

3、一种改善肤色的组合物，包括重组人源化ⅳ型胶原蛋白和薰衣草外泌体。

4、根据本发明优选的，所述重组人源化ⅳ型胶原蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

5、进一步优选的，所述重组人源化ⅳ型胶原蛋白的制备方法如下：根据大肠杆菌密码子偏好性对seq id no.1所示的重组人源化ⅳ型胶原蛋白的编码基因进行密码子优化，将密码子优化后的编码基因插入表达载体pet28a上构建重组质粒，将重组质粒转化入大肠杆菌bl21(de3)中构建重组菌株，将重组菌株培养至对数生长期，经iptg诱导后即得重组人源化ⅳ型胶原蛋白。

6、进一步优选的，所述密码子优化后的编码基因核苷酸序列如seq id no.2所示。

7、本发明中，所述薰衣草外泌体可按照专利申请cn117187156a中实施例1记载的方法制备得到。

8、根据本发明优选的，在含有组合物的体系中，所述重组人源化ⅳ型胶原蛋白的终浓度为0.001～0.5wt％，所述薰衣草外泌体的终浓度为0.0001～0.5wt％。

9、本发明中，上述组合物能够通过增加热休克蛋白的表达，提高热压力胁迫下的细胞活力，抑制内皮素的表达及糖化产物的产生，从而达到改善肤色的作用。

10、本发明中，所述含有组合物的体系中，除含有重组人源化ⅳ型胶原蛋白和薰衣草外泌体外，还可以包含任意化妆品领域允许添加的其他原料成分，包括但不限于乳化剂、润肤剂、保湿剂和增稠剂等。

11、上述组合物在制备化妆品或护肤品中的应用。

12、根据本发明优选的，所述化妆品或护肤品能够通过增加热休克蛋白的表达、提高热压力胁迫下的细胞活力、抑制内皮素的表达及糖化产物的产生，从而达到改善肤色的作用。

13、一种含有上述组合物的化妆品或护肤品。

14、根据本发明优选的，所述化妆品或护肤品可以制备不同剂型，如精华水、精华乳、精华霜、面膜或者冻干粉等。

15、本发明中，所述化妆品或护肤品中还包含化妆品领域允许添加的其他原料成分，包括但不限于乳化剂、润肤剂、保湿剂和增稠剂等。

16、本发明中，所述化妆品或护肤品可用于皮肤表面，通过增加热休克蛋白的表达、提高热压力胁迫下的细胞活力、抑制内皮素的表达及糖化产物的产生，从而达到改善肤色的作用。

17、有益效果：

18、1、本发明提供了一种组合物，所述组合物包括重组人源化ⅳ型胶原蛋白和薰衣草外泌体，所述重组人源化ⅳ型胶原蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示，二者复配使用，能够增加热休克蛋白的表达、提高热压力胁迫下的细胞活力、抑制内皮素的表达及糖化产物的产生，从而起到改善皮肤肤色的作用，且二者具有协同增效的效果。

19、2、本发明的组合物在达到相似效果的前提下，通过薰衣草外泌体的使用，减少了重组人源化ⅳ型胶原蛋白的用量，大幅度降低了重组人源化ⅳ型胶原蛋白的应用成本。

技术特征：

1.一种改善肤色的组合物，其特征在于，包括重组人源化ⅳ型胶原蛋白和薰衣草外泌体。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述重组人源化ⅳ型胶原蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。

3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述重组人源化ⅳ型胶原蛋白的制备方法如下：根据大肠杆菌密码子偏好性对seq id no.1所示的重组人源化ⅳ型胶原蛋白的编码基因进行密码子优化，将密码子优化后的编码基因插入表达载体pet28a上构建重组质粒，将重组质粒转化入大肠杆菌bl21(de3)中构建重组菌株，将重组菌株培养至对数生长期，经iptg诱导后即得重组人源化ⅳ型胶原蛋白。

4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述密码子优化后的编码基因核苷酸序列如seq id no.2所示。

5.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，在含有组合物的体系中，所述重组人源化ⅳ型胶原蛋白的终浓度为0.001～0.5wt％，所述薰衣草外泌体的终浓度为0.0001～0.5wt％。

6.权利要求1所述的组合物在制备化妆品或护肤品中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述化妆品或护肤品能够通过增加热休克蛋白的表达、提高热压力胁迫下的细胞活力、抑制内皮素的表达及糖化产物的产生，从而达到改善肤色的作用。

8.一种含有权利要求1所述的组合物的化妆品或护肤品。

9.如权利要求8所述的化妆品或护肤品，其特征在于，所述化妆品或护肤品可以制备不同剂型，包括精华水、精华乳、精华霜、面膜或者冻干粉。

技术总结本发明涉及一种改善肤色的组合物及其应用，属于化妆品技术领域。本发明提供了一种组合物，所述组合物包括重组人源化Ⅳ型胶原蛋白和薰衣草外泌体，所述重组人源化Ⅳ型胶原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，二者复配使用，能够增加热休克蛋白的表达、提高热压力胁迫下的细胞活力、抑制内皮素的表达及糖化产物的产生，从而起到改善皮肤肤色的作用，且二者具有协同增效的效果。本发明的组合物在达到相似效果的前提下，通过薰衣草外泌体的使用，减少了重组人源化Ⅳ型胶原蛋白的用量，大幅度降低了重组人源化Ⅳ型胶原蛋白的应用成本。技术研发人员：刘菲,刘慧,杨素珍,王倩,黄伟,徐佩佩,武涛,陈玉荣受保护的技术使用者：山东福瑞达生物股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/9/9