暹罗芽孢杆菌、微生物菌液及其制备方法和应用

本发明属于生物领域，尤其涉及一株暹罗芽孢杆菌(bacillus siamensis)、微生物菌液及其制备方法和应用。

背景技术：

1、微生物防治是指在有益微生物的作用下通过竞争、拮抗、诱导抗性和促生等多种方式达到抑制病原物活性并提高植物抗性的防治方法，具有无毒、无害、无污染和不易产生抗药性等优点，成为近年来替代化学药剂的植物病害生物防治的热点研究领域。

2、植物病害一直是威胁农业健康生产的重要因素。油菜根肿病最早发生于欧洲南部和地中海地区，现已成为油菜世界性病害。据研究报道，油菜根肿病是由芸臺属根肿菌(plasmodiophora brassica)侵染引起的一类土传病害，病原菌主要危害油菜根部，在主根和侧根形成大小不等的手指形或纺锤形的肿瘤。近几年，根肿病在我国长江流域冬油菜主产区四川、湖北、浙江、江苏、安徽等省份逐年加重，导致油菜产量和品质严重下降，严重制约了我国油菜产业的健康发展。

3、暹罗芽孢杆菌(bacillus siamensis)属于革兰氏阳性菌，具有生长速度快、繁殖能力强、抗逆性强、易培养等特点，大量研究表明暹罗芽孢杆菌对多种植物病原微生物具有强大的拮抗能力，其中对尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)具有80.0％以上的抑制作用，对细极链格孢菌(alternaria tenuissima)的抑制效率达到85.3％，同时对辣椒炭疽病菌(colletotrichum capsici)、辣椒白绢病菌(sclerotium rolfsii)、青枯假单胞杆菌(pseudomonas solanacearum)及葡萄座腔菌(botryosphaeria dothidea)等均表现出较好的防治效果，但对于是否适用于防治油菜根肿病还有待研究。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种暹罗芽孢杆菌、微生物菌液及其制备方法和应用。

2、为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为：

3、一株暹罗芽孢杆菌(bacillus siamensis)，所述暹罗芽孢杆菌命名为kd50，于2023年3月10日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为cctcc no:m 2023289。

4、基于一个总的发明构思，本发明还提供一种微生物菌液，包含上述的暹罗芽孢杆菌。

5、基于一个总的发明构思，本发明还提供一种上述的微生物菌液的制备方法，包括以下步骤：

6、(1)将暹罗芽孢杆菌接种于lb固体培养基上，活化处理，得到活化后的暹罗芽孢杆菌；

7、(2)将活化后的暹罗芽孢杆菌接种于种子培养基上培养，得到暹罗芽孢杆菌种子液；

8、(3)将暹罗芽孢杆菌种子液接入发酵培养基中，摇床培养，得到暹罗芽孢杆菌悬浮液，即所述微生物菌液。

9、上述的制备方法，优选的，步骤(1)中，所述活化处理是指在28℃～30℃下恒温培养22～24h。

10、上述的制备方法，优选的，步骤(2)中，所述种子培养基的成分包括：1.5～2.5％豆粕、0.5～1.5％酵母粉和0.5～1.5％七水硫酸镁；

11、将活化后的暹罗芽孢杆菌接种于种子培养基上培养的过程中：装液量为50～60％，接种量为1％～2％，培养温度为35～37℃，在170～190rpm下震荡培养18～22h。

12、上述的制备方法，优选的，步骤(3)中，发酵培养基的成分包括：1.5～2.5％豆粕、0.5～1.5％酵母粉和0.5～1.5％七水硫酸镁；

13、摇床培养的温度为35～37℃，转速为170～190rpm，培养时间为22～24h。

14、基于一个总的发明构思，本发明还提供一种上述的暹罗芽孢杆菌或者上述的微生物菌液或者上述的制备方法制备获得的微生物菌液在抑制植物真菌性病原菌生长中的应用。

15、上述的应用，优选的，所述真菌性病原菌包括芸薹根肿菌(plasmodiophorabrassica)、核盘菌(sclerotinia sclerotiorum)、腐霉菌(pythium aphanidermatum)、苹果盘二孢菌(marssonina mali)、立枯丝核菌(rhizoctonia solani kola)中的至少一种。

16、上述的应用，优选的，所述应用包括向植株土壤中灌施上述的微生物菌液或者灌施上述的制备方法制备获得的微生物菌液。

17、基于一个总的发明构思，本发明还提供一种防治油菜根肿病的方法，向油菜植株土壤中灌施上述的微生物菌液或者灌施上述的制备方法制备获得的微生物菌液。

18、与现有技术相比，本发明的有益效果为：

19、(1)本发明的暹罗芽孢杆菌以及含该菌株的微生物菌液，能够抑制多种植物真菌性病原菌生长，对植物防治真菌性病原菌病害具有显著的效果，为防治植物病害提供一个新的方向。

20、(2)本发明的暹罗芽孢杆菌以及含该菌株的微生物菌液对油菜根肿病具有较好的抑制效果，防治效果达到85.7％以上。

技术特征：

1.一株暹罗芽孢杆菌(bacillus siamensis)，其特征在于，所述暹罗芽孢杆菌命名为kd50，于2023年3月10日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为cctcc no:m2023289。

2.一种微生物菌液，其特征在于，包含如权利要求1所述的暹罗芽孢杆菌。

3.一种如权利要求2所述的微生物菌液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述活化处理是指在28℃～30℃下恒温培养22～24h。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述种子培养基的成分包括：1.5～2.5％豆粕、0.5～1.5％酵母粉和0.5～1.5％七水硫酸镁；

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述发酵培养基的成分包括：1.5～2.5％豆粕、0.5～1.5％酵母粉和0.5～1.5％七水硫酸镁；

7.一种如权利要求1所述的暹罗芽孢杆菌或者如权利要求2所述的微生物菌液或者如权利要求3～6中任一项所述的制备方法制备获得的微生物菌液在抑制植物真菌性病原菌生长中的应用。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述真菌性病原菌包括芸薹根肿菌(plasmodiophora brassica)、核盘菌(sclerotinia sclerotiorum)、腐霉菌(pythiumaphanidermatum)、苹果盘二孢菌(marssonina mali)、立枯丝核菌(rhizoctoniasolanikola)中的至少一种。

9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用包括向植株土壤中灌施权利要求2所述的微生物菌液或者灌施权利要求3～6中任一项所述的制备方法制备获得的微生物菌液。

10.一种防治油菜根肿病的方法，其特征在于，向油菜植株土壤中灌施权利要求2所述的微生物菌液或者灌施权利要求3～6中任一项所述的制备方法制备获得的微生物菌液。

技术总结本发明公开了一株暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)，命名为KD50，于2023年3月10日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO:M 2023289。本发明还公开了含该暹罗芽孢杆菌的微生物菌液及其制备方法，并公开了该生物菌液在抑制植物真菌性病原菌生长中的应用和利用该微生物菌液防治油菜根肿病的方法。本发明的暹罗芽孢杆菌以及含该菌株的微生物菌液，能够抑制多种植物真菌性病原菌生长，对植物防治真菌性病原菌病害具有显著的效果，为防治植物病害提供一个新的方向。本发明的暹罗芽孢杆菌以及含该菌株的微生物菌液对油菜根肿病具有较好的抑制效果，防治效果达到85.7％以上。技术研发人员：欧立军,李鑫,陶禹,周池,李星曦受保护的技术使用者：湖南农业大学技术研发日：技术公布日：2024/9/17