一种用于血液净化的吸附剂及其制备方法与流程

本发明属于生物医用高分子材料，具体涉及一种具有新聚合物配基的用于血液净化的吸附剂及其制备方法。

背景技术：

1、血液净化是直接将血液引出体外，利用吸附剂清除血液中的有害物质的一种血液净化技术，其对于动脉粥样硬化等心血管疾病具有优异的临床引用价值，目前也是临床使用较多的一项技术。人体血液中成分复杂，其中低密度脂蛋白(ldl)、极低密度脂蛋白(vldl)以及总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)等含量过高是引发动脉粥样硬化以及高血脂性胰腺炎的主要因素，是血液净化需要除去的成分。但血液中存在的其他类似成分，例如高密度脂蛋白则是有益脂蛋白，需要吸附剂在清除有害物质的同时尽量保留有益物质，这就对吸附剂的选择性提出了较高的要求。

2、cn109092261a提出了一种用于清除血液中低密度脂蛋白的吸附清除剂及其制备方法，包括作为载体的多糖微球，及固载在载体表面的多糖配基，所述多糖配基上偶联有疏水链和阴离子基团，从环糊精与ldl选择性吸附、疏水链与脂质的亲和吸附、阴离子基团与ldl静电吸附三个方面来共同提高配基对ldl的选择性吸附效果。

3、cn109092262 b公开了一种低密度脂蛋白吸附微球，在微球上偶联类肝素以及能够与ldl疏水区域发生吸附作用的δ-生育酚或者α-生育酚作为疏水功能基，显著提高了对ldl的吸附选择性。

4、肝素是一类拥有磺酸基、羟基、羧基的物质，cn118002097a、cn104525155a均使用了肝素作为配基与树脂类载体结合制备得到吸附剂，用于血液中脂蛋白的吸附。

5、如何开发具有更广泛的吸附效果和更好的选择性的吸附剂，成为亟待解决的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种新的具有优异选择性的、能选择性地除去血液中的低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白，而对血液中的有益成分如高密度脂蛋白等无明显吸附作用的血液净化用吸附剂及其制备方法。

2、本发明解决上述技术问题所采用的方案是：

3、一种用于清除血液中低密度脂蛋白的吸附剂，包括作为载体的聚合物微球，及固载在所述载体表面的配基；所述配基为偶联有亚胺基二乙磺酸、羟基、羧基的链状高分子。

4、进一步地，所述聚合物微球选自纤维素微球、琼脂糖微球、葡聚糖微球、聚乙烯醇微球、聚丙烯酸酯微球、聚苯乙烯微球、聚丙烯酸微球中的一种。

5、进一步地，所述配基为共聚物，包含三种结构单元，结构式为：

6、

7、其中，m、n、p均为正整数，m：n＝(1～10)：1，例如2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1；p＜m；所述配基共聚物总的平均分子量为1000-100000。

8、进一步地，所述聚合物微球与所固载的配基的质量比为1：(0.1～1)，例如1：0.1、1：0.3、1：0.6、1：0.9。

9、本发明还提供上述用于清除血液中低密度脂蛋白的吸附剂的制备方法，包括如下步骤：

10、将聚合物微球、溶剂、环氧氯丙烷、偶联有亚氨基二乙磺酸、羟基、羧基的配基、氢氧化钠混合均匀，于25～75℃条件下反应2～12h，得到偶联有配基的纤维素微球，即所述低密度脂蛋白的吸附剂。

11、进一步地，所述聚合物微球与配基的质量比为1：(0.1～1)，例如1：0.3、1：0.5、1：0.8、1：0.9；所述环氧氯丙烷与配基的质量比为1：(2～10)，例如1:3、1:8。

12、进一步地，氢氧化钠在混合体系中的浓度为0.1～1mol/l。

13、进一步地，所述偶联有亚胺基二乙磺酸、羟基、羧基的配基的制备方法包括如下步骤：

14、s1：将乙酸乙烯酯单体、丙烯酸单体、引发剂、溶剂混合均匀，50-80℃条件下引发自由基聚合，聚合反应终止即得到乙酸乙烯酯-丙烯酸共聚物溶液；

15、s2：冰浴条件下向步骤s1所得共聚物溶液中加入氯化亚砜，得到部分酰氯化的乙酸乙烯酯-丙烯酸共聚物溶液；

16、s3：向步骤s2所得共聚物溶液中加入n-(2-氨基乙基)-2-亚氨基二乙磺酸，0～30℃条件下反应1～3h，得乙酸乙烯酯-丙烯酸-二乙磺酸丙烯酰胺共聚物溶液；

17、s4：向步骤s3所得共聚物溶液中加入氢氧化钠溶液，40～90℃条件下反应过夜，得聚乙烯醇-丙烯酸-二乙磺酸丙烯酰胺共聚物溶液；

18、s5：向步骤s4所得共聚物溶液中加入反溶剂，使聚乙烯醇-丙烯酸-二乙磺酸丙烯酰胺共聚物沉淀析出，干燥得到聚乙烯醇-丙烯酸-二乙磺酸丙烯酰胺共聚物粉末，即偶联有亚胺基二乙磺酸、羟基、羧基的配基。

19、所述偶联有亚胺基二乙磺酸、羟基、羧基的配基的制备过程中涉及的反应产物变化如下所示：

20、

21、进一步地，s1中丙烯酸单体与乙酸乙烯酯单体的摩尔比为(1～10)：1，例如2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1。

22、进一步地，s2中加入的氯化亚砜与丙烯酸单体的摩尔比为(0.1～1):1，例如0.3：1、0.5：1、0.8：1、0.9：1。

23、进一步地，s3中加入的n-(2-氨基乙基)-2-亚氨基二乙磺酸摩尔量为s2加入的氯化亚砜摩尔量的1～1.2倍，优选与氯化亚砜等摩尔量。

24、进一步地，s4中加入的氢氧化钠溶液浓度为0.1～2mol/l，加入的氢氧化钠溶液体积为乙酸乙烯酯-丙烯酸-二乙磺酸丙烯酰胺共聚物溶液体积的10％～50％。

25、对于自由基聚合反应，链终止分为偶合终止和歧化终止，引发剂的用量与所得聚合物的最终聚合度有一定关系。本技术引发剂用量为单体总质量的0.1％～1％。

26、进一步地，s1中所述的引发剂为aibn。

27、进一步地，s1中所述的溶剂为四氢呋喃，s5所使用的反溶剂为甲醇。

28、进一步地，s5使用的温度低于5℃的反溶剂对共聚物进行沉淀处理。

29、本发明所制备得到的吸附剂表面带有大量的负电荷，有利于和表面带正电荷的ldl和vldl通过静电吸引力而产生吸附作用，同时对血液中的有益成分如高密度脂蛋白等无明显吸附作用。ldl和vldl的载脂蛋白主要是apob，在apob中含有的大量赖氨酸、精氨酸和组氨酸等碱性氨基酸残基暴露于载脂蛋白表面。这些氨基酸残基在正常生理ph值环境下显正电荷，故带有负电荷的配基和ldl、vldl之间可由于静电作用发生特异性吸附作用。本发明中的配基和肝素化学成分类似，具有磺酸基、羟基和羧基，具有和肝素类似的生理学性能，比如抗凝、与脂蛋白特异性结合等。本发明引入的n-(2-氨基乙基)-2-亚氨基二乙磺酸一个单体结构单元中有两个磺酸基，同时由于新配基有较长的侧链结构，磺酸基在侧链的最外端，和血液相互作用的时候有利于捕获血液中的脂蛋白，因此在较少的配基添加量的情况下吸附ldl、vldl效果优于肝素。

30、本发明通过将类肝素配基偶联高分子微球表面制成ldl、vldl吸附剂，可实现清除人体血液中70％以上低密度脂蛋白和60％以上的极低密度脂蛋白的效果，同时对高密度脂蛋白hdl非特异性吸附率低于20％。