一种毛叶山桐子雌株离体扩繁的方法

本发明涉及植物组织培养，具体来说为一种毛叶山桐子一年生带腋芽的幼嫩茎段雌株离体扩繁育苗的方法。

背景技术：

1、毛叶山桐子别名水冬瓜、油葡萄、椅桐等，是大风子科(flacourtiaceae)、山桐子属(idesia maxim.)落叶乔木。经济价值较高，木材松软，可供建筑、家具、等的用材；该树种花多芳香，有蜜腺，为养蜂业的蜜源资源植物；其树形优美，多为山地、园林的观赏树种；毛叶山桐子果实、种子均含油，是高产优质的木本油料树种，被称为“树上的油库”，且果实含有“血管清道夫”之称的不饱和脂肪酸高达80-90％，其中亚油酸和亚麻酸的比例也接近中国营养学会的推荐比例。目前，我国毛叶山桐子现阶段以种子繁育技术为主，在实际推广种植时大多使用实生苗，由于实生苗经过了有性生殖过程，无法保持母株的优良性状，一般需生长4-5年开花结果才能分辨雌雄株，无法合理安排雌雄比例造林，且种子实生苗性状分化差异大，直接影响到后期经济效益。因此，毛叶山桐子优良品种的选育应主要基于无性系构建。组织培养技术可以针对优良雌性植株进行繁育，扩速获得优良雌性苗木，缩短育苗时间、降低成本，因此本发明提出一种毛叶山桐子离体扩繁育苗的方法。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对毛叶山桐子实生苗实际推广中的不足，提供一种利用组培快速繁育的方式扩大种苗的数量并保持母本优良性状的无性繁殖方式。

2、本发明的目的通过以下技术方案予以实现。

3、为克服相关技术中已存在的不足，本发明提供一种毛叶山桐子雌株离体扩繁的方法。

4、一种毛叶山桐子雌株离体扩繁的方法，包括以下步骤：

5、(1)于4月中下旬采集毛叶山桐子雌性树种的茎段，剪取生长态势良好的、一年生带腋芽的幼嫩茎段，用75％酒精和0.1％升汞溶液进行消毒处理，对茎段进行表面消杀处理；

6、(2)将消杀处理后的带腋芽茎段切割成2cm左右的小段，接入ms培养基中，培养10d；

7、(3)将存活的茎段接入诱导萌发培养基中，培养30d，腋芽萌发成长为单芽苗；

8、(4)将腋芽萌发长成的单芽苗切下，接入增殖培养基中，培养30天，得到增殖芽苗；

9、(5)将健壮的增殖芽苗切除愈伤和根部，接入ms培养基中，复壮培养30天，得到复壮苗；

10、(6)将复壮苗切除愈伤和根部，接入生根培养基中，培养30天，得到生根苗。

11、上述步骤(1)具体包括：

12、将毛叶山桐子茎段置于流水下冲洗2小时，后转至无菌条件下，再分别用75％酒精和0.1％升汞溶液灭菌处理，后用无菌水清洗5-6次，用无菌滤纸吸干材料表面水分，将消毒后的带腋芽茎段用已消毒的接种刀切除暴露在消毒处理中的两端，将材料接种到ms培养基中，培养10天。

13、上述步骤(3)具体包括：

14、无菌条件下，取带腋芽的茎段接入诱导培养基中，培养30天，茎段的腋芽萌发生长为单芽苗。

15、上述步骤(4)具体包括：

16、无菌条件下，将健壮、无菌的生长至2cm左右的单芽苗接入增殖培养基中，培养30天，得到增殖芽苗。

17、所述培养基成分配比包括：

18、上述步骤(2)(3)(4)(5)培养基配方为ms基本培养基4.74g/l，蔗糖30g/l，琼脂粉7.5g/l，ph调至5.8-6.0；

19、上述步骤(6)培养基配方为1/2ms基本培养基2.47g/l，蔗糖25g/l，琼脂粉7.3g/l，ph调至5.8-6.0。

20、上述各阶段培养基添加植物生长调节剂具体包括：

21、上述步骤(3)诱导培养基和步骤(4)增殖培养基：添加不同浓度的外源活力剂6-ba、naa、tdz浓度组合，上述步骤(6)生根培养基：添加不同浓度的iaa和naa浓度组合。

22、本发明相对于现有技术具有的优点在于：本发明提供了一种建立毛叶山桐子雌株离体扩繁的方法，可以针对优良雌性植株进行繁育。此方法操作简单，从采集茎段到获取完整生根植株只需130d,且保留母本优良性状，能缩短育种周期，快速进行生产应用，节约生产成本。现实际生产多用种子实生苗，该方法需4-5年才能分辨雌雄株，无法提前安排造林。该发明首次用雌株茎段实现植株再生，腋芽分化诱导率可达100％，增殖系数可达5.6，生根率100％。利用组织培养技术能够实现多次、快速地获得大量无菌种苗，在一定程度上能有效避免品种退化等问题。

技术特征：

1.一种毛叶山桐子雌株离体扩繁的方法，包括步骤：

2.根据权利要求1所述的毛叶山桐子雌株离体扩繁育苗的方法，其特征在于：步骤(1)所述的将毛叶山桐子优良雌株茎段流水处理2h后转至无污染环境下，再用酒精和升汞溶液做杀菌剂消毒处理，无菌水洗后接入培养基中。

3.据权利要求1所述的毛叶山桐子雌株离体扩繁育苗的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的诱导萌发培养基为ms基本培养基，添加外源活力剂6-ba、naa、tdz浓度组合。

4.据权利要求1所述的毛叶山桐子雌株离体扩繁育苗的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的诱导增殖培养基为ms基本培养基，添加外源活力剂6-ba、naa、tdz浓度组合。

5.据权利要求1所述的毛叶山桐子雌株离体扩繁育苗的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的诱导增殖培养后，将单芽小苗培养为健壮植株。

6.据权利要求1所述的毛叶山桐子雌株离体扩繁育苗的方法，其特征在于：步骤(4)所述的诱导生根培养基为1/2ms基本培养基，添加外源活力剂iaa、naa浓度组合。

技术总结本发明公开了一种毛叶山桐子(Idesiapolycarpa var.vestita)雌株离体扩繁的方法，属于组织培养技术领域，此方法可以扩速获得无菌种苗，保持优良性状，大幅度提高毛叶山桐子的种苗数量。技术研发人员：谢婷,李杰,汪国兰受保护的技术使用者：西南科技大学技术研发日：技术公布日：2024/11/4