一种盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠含量的检测方法与流程

本发明属于药物分析领域，尤其涉及一种盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠含量的检测方法。

背景技术：

1、盐酸西替利嗪是一种组胺h1受体拮抗剂，临床上用于季节性和常年性过敏鼻炎，鼻结膜炎，荨麻疹等症状，具有在水中易溶，在甲醇或乙醇中溶解，在三氯甲烷或丙酮中几乎不溶的特性，其化学结构式如下所示：。

2、依地酸二钠因其具备金属螯合剂的特性常常被用于制剂中，而在仿制药研发过程中，为保证仿制药与参比制剂的辅料用量一致，需对参比制剂中的依地酸二钠的用量进行逆向解析以及对自研制剂中的依地酸二钠的含量进行测定。目前常用的制剂中依地酸二钠含量的检测方法是采用三氯化铁或硫酸铜等络合剂对制剂进行络合处理，再用紫外检测器进行含量测定，如cn111398443a公开了一种他氟前列素滴眼液中乙二胺四乙酸二钠的测定方法，是采用氯化铜对对照品溶液和供试品溶液进行络合前处理，再进行乙二胺四乙酸二钠的含量测定；cn114487192a公开了一种地氯雷他定口服溶液中依地酸二钠的含量测定方法，是采用三氯化铁对对照品溶液和供试品溶液进行络合前处理，再进行依地酸二钠的含量测定；cn116482259a公开一种测定甲硝唑凝胶中依地酸二钠含量的方法，是采用六水合三氯化铁对对照品溶液和供试品溶液进行络合前处理，再进行依地酸二钠的含量测定。该系列方法都是对对照品溶液和供试品溶液进行了一系列络合前处理再进行依地酸二钠的含量测定，易产生检测误差，而且盐酸西替利嗪滴眼液中辅料较多，样品络合处理时会导致各辅料之间的干扰，从而导致检测方法专属性差，准确度低，无法准确定量检测该产品中依地酸二钠的含量。

3、因此本领域需要提供一种不需要对对照品溶液和供试品溶液进行络合前处理且专属性强、重复性好、简单快速的检测盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠含量的方法。

技术实现思路

1、本发明旨在提供一种不需要对对照品溶液和供试品溶液进行络合前处理且专属性强、重复性好、简单快速的检测盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠含量的方法。

2、一方面，本发明提供了一种盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠含量的检测方法，通过高效液相色谱分析方法对所述盐酸西替利嗪滴眼液进行分析，以便获得色谱图，以及基于所述色谱图，确定所述盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠的含量，其中，所述高效液相色谱采用的流动相a为0.8-0.9g/l四丁基硫酸氢铵溶液。

3、在一些实施方式中，所述流动相a的ph值为9.5-10.5。

4、在一些实施方式中，所述流动相a的ph值是使用氨水调节的。

5、可以理解，申请人通过大量的创造性劳动筛选出合适的流动相a和流动相a的ph值，在该流动相和流动相的ph值条件下，不需要对盐酸西替利嗪滴眼液对照品溶液和供试品溶液进行络合前处理，就能准确的检测出盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠的含量。

6、在一些实施方式中，所述高效液相色谱采用的色谱柱为poroshell hph－c18，3.0mm×100mm，2.7μm。

7、在一些实施方式中，所述盐酸西替利嗪滴眼液是以供试品溶液的形式提供的，其中，所述供试品溶液为盐酸西替利嗪滴眼液水溶液，并且基于每毫升供试品溶液，其中依地酸二钠的浓度为25μg/ml。

8、在一些实施方式中，所述盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠含量的检测还需要提供对照品溶液，所述对照品溶液为依地酸二钠水溶液，并且基于每毫升对照品溶液，其中依地酸二钠的浓度为25μg/ml。

9、可以理解，所述供试品溶液为盐酸西替利嗪滴眼液水溶液，所述对照品溶液为依地酸二钠水溶液，不需要像现有技术一样对样品进行络合前处理，简化了供试品溶液和对照品溶液的配制方式，减少了络合剂对供试品溶液中各辅料的干扰，减少了误差产生的可能性，能更加准确的定量检测供试品溶液中依地酸二钠的含量。

10、在一些实施方式中，所述高效液相色谱采用的检测波长为214nm。

11、在一些实施方式中，所述高效液相色谱采用的柱温为20℃。

12、在一些实施方式中，所述高效液相色谱采用的洗脱梯度为：

13、。

14、在一些实施方式中，基于色谱图，确定所述盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠的含量是通过峰面积外标法计算的，计算公式如下所示：

15、，

16、as：供试品溶液中依地酸二钠的峰面积、 mr1：对照品的取样量/mg、cr：对照品的含量、ns：供试品溶液稀释倍数、 ar1：对照品溶液连续进样5针的依地酸二钠平均峰面积、ms：供试品的取样量/ml、nr：对照品溶液稀释倍数。

17、在本发明的第二方面，更为具体的提出了一种盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠含量的检测方法，包括：

18、（1）色谱条件

19、色谱柱：poroshell hph－c18，3.0mm×100mm，2.7μm，

20、检测器：dad，

21、检测波长：214nm，

22、柱温：20℃，

23、流动相a：0.8-0.9g/l四丁基硫酸氢铵，所述四丁基硫酸氢铵的ph值为9.5-10.5，

24、流动相b：乙腈，

25、流速：0.3ml/min，

26、进样量：5μl，

27、运行时间：25min；

28、洗脱梯度为：

29、；

30、（2）空白溶液的配制

31、空白溶液：水；

32、（3）对照品溶液的配制

33、精密称取依地酸二钠对照品12.5mg，置50ml量瓶中，用水溶解稀释至刻度，再精密量取上述溶液5ml，置50ml量瓶中，用水溶解稀释至刻度，摇匀，即得；

34、（4）供试品溶液的配制

35、精密量取盐酸西替利嗪滴眼液1ml，置10ml量瓶中，用水溶解稀释至刻度，摇匀，即得；

36、（5）进样

37、精密量取空白溶液、对照品溶液、供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；

38、（6）含量计算

39、所述盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠的含量是通过峰面积外标法计算的，计算公式如下所示：

40、，

41、as：供试品溶液中依地酸二钠的峰面积、 mr1：对照品的取样量/mg、cr：对照品的含量、ns：供试品溶液稀释倍数、 ar1：对照品溶液连续进样5针的依地酸二钠平均峰面积、ms：供试品的取样量/ml、nr：对照品溶液稀释倍数。

42、利用本发明所述的方法检测盐酸西替利嗪滴眼液中依地酸二钠含量具有如下优势：

43、1、不需要对对照品溶液和供试品溶液进行络合前处理，简化了供试品溶液和对照品溶液的配制方式，减少了络合剂对供试品溶液中各辅料的干扰，检测方法的准确度得到了提升，有利于盐酸西替利嗪滴眼液的质量控制；

44、2、该方法专属性强、重复性好、运行时间短，检测方法可靠并节约了检测成本。