一种皂荚茎段组培快繁方法

本发明涉及生物，特别是涉及一种皂荚茎段组培快繁方法。

背景技术：

1、皂荚是我国分布广泛的乡土树种，在经济、生态、景观等方面都有相应的运用价值，是一种值得保护、开发和利用的优良树种。皂荚树既可作为生态造林树种，又可作为果树和木本中药材种植。皂荚树可广泛用于碳汇林、生态林、经济林的种植。皂荚树种子中含有丰富的植物胶，内胚乳中含胶量高达68.6％，植物胶能迅速溶于水，形成高粘度的稳定溶液，可作为增稠剂、稳定剂或粘合剂，广泛用于石油、天然气、纺织、造纸等行业。目前，国内对皂荚的研究主要集中在药用成分、化学成分分析、主要利用价值等，而关于皂荚茎段组织培养少有报道。近年在皂荚的组培过程中，大多选择未成熟或成熟的胚、子叶、幼嫩的茎段或腋芽诱导芽的萌发、增殖和生根，但成功的例子很少，主要原因是其褐化问题比较严重。以皂荚茎段为外植体培养不定芽产生的频率低，茎容易变黑褐化，存活率低。木本植物在组培中的褐化主要是由于酚污染，因外植体的伤口处从液泡中分泌的酚类化合物与细胞质中的多酚氧化酶接触，在多酚氧化酶的作用下发生氧化反应后会形成醌类化合物，在酪氨酸酶的作用下，同蛋白质发生聚合，导致其他酶系统的代谢紊乱，从而影响植物生长；其次是由于不利环境条件(如温度、ph值等)。如何在解决皂荚茎段组培褐化率高的问题，成为目前研究和开发的重要方向。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种皂荚茎段组培快繁方法，以解决上述现有技术存在的问题。该方法可以解决皂荚茎段组培中的褐化问题，并且还具有较高的丛生芽诱导率、生根率以及幼苗成活率等优势。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

3、本发明提供一种皂荚茎段组培快繁方法，包括以下步骤：

4、将皂荚茎段进行消毒处理后，得到消毒后的外植体；

5、将所述消毒后的外植体接种于初代培养基中进行丛生芽诱导培养；

6、将所述丛生芽诱导培养得到丛生芽接种到继代增殖培养基中，进行继代增殖培养；

7、将所述继代增殖培养中获得的不定芽接种至生根培养基中进行生根培养；

8、将经过所述生根培养得到的幼苗接种到壮苗培养基中，进行壮苗培养，得到皂荚组培幼苗；

9、所述初代培养基为ms+6-ba 1.0mg/l+naa0.1mg/l+iba 0.5mg/l；

10、所述继代增殖培养基为ms+6-ba 1.0mg/l+naa0.1mg/l+ga30.8mg/l；

11、所述生根培养基为1/2ms+iba 1.2mg/l+玉米素0.15mg/l。

12、进一步地，所述壮苗培养基为ms+6-ba 1.5mg/l+iba 0.1mg/l。

13、进一步地，所述皂荚茎段为带腋芽的皂荚茎段。

14、进一步地，所述消毒处理的方法包括用0.1％升汞溶液消毒10min的步骤。

15、进一步地，所述丛生芽诱导培养的培养温度为25℃，光照时间为15h/d，培养时间为30d。

16、进一步地，所述继代增殖培养的培养温度为25℃，光照时间为15h/d，培养时间为30d。

17、进一步地，所述生根培养的培养温度为25℃，光照时间为15h/d，培养时间为35d。

18、进一步地，所述壮苗培养的培养温度为25℃，光照时间为15h/d，培养时间为30d。

19、本发明公开了以下技术效果：

20、本发明以皂荚茎段为外植体，通过不同的培养基、不同激素种类及组合以及不同浓度植物生长调节剂的试验，筛选出皂荚茎段组培的最佳组合(培养基+琼脂+蔗糖+激素)，解决了皂荚茎段组培中的褐化问题。本发明的方法还具有较高的丛生芽诱导率、生根率以及幼苗成活率等优势。

21、本发明对促进和加快优良皂荚新品种的推广与应用，开展对皂荚树种的种质资源保护、开发与利用以及丰富我国园林绿化树种具有重要意义。

技术特征：

1.一种皂荚茎段组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的皂荚茎段组培快繁方法，其特征在于，所述壮苗培养基为ms+6-ba 1.5mg/l+iba0.1mg/l。

3.根据权利要求1所述的皂荚茎段组培快繁方法，其特征在于，所述皂荚茎段为带腋芽的皂荚茎段。

4.根据权利要求1所述的皂荚茎段组培快繁方法，其特征在于，所述消毒处理的方法包括用0.1％升汞溶液消毒10min的步骤。

5.根据权利要求1所述的皂荚茎段组培快繁方法，其特征在于，所述丛生芽诱导培养的培养温度为25℃，光照时间为15h/d，培养时间为30d。

6.根据权利要求1所述的皂荚茎段组培快繁方法，其特征在于，所述继代增殖培养的培养温度为25℃，光照时间为15h/d，培养时间为30d。

7.根据权利要求1所述的皂荚茎段组培快繁方法，其特征在于，所述生根培养的培养温度为25℃，光照时间为15h/d，培养时间为35d。

8.根据权利要求1所述的皂荚茎段组培快繁方法，其特征在于，所述壮苗培养的培养温度为25℃，光照时间为15h/d，培养时间为30d。

技术总结本发明公开了一种皂荚茎段组培快繁方法，涉及生物技术领域。该皂荚茎段组培快繁方法包括以下步骤：将皂荚茎段进行消毒处理后，得到消毒后的外植体；将所述消毒后的外植体接种于初代培养基中进行丛生芽诱导培养；将所述丛生芽诱导培养得到丛生芽接种到继代增殖培养基中，进行继代增殖培养；将所述继代增殖培养中获得的不定芽接种至生根培养基中进行生根培养；将经过所述生根培养得到的幼苗接种到壮苗培养基中，进行壮苗培养，得到皂荚组培幼苗。该方法可以解决皂荚茎段组培中的褐化问题，并且还具有较高的丛生芽诱导率、生根率以及幼苗成活率等优势。技术研发人员：李保会,宋立君,张洁,张芹,郑建伟,齐梦楠,秦佳乐受保护的技术使用者：河北农业大学技术研发日：技术公布日：2024/12/2