一种含枯草芽孢杆菌和干酪乳杆菌的组合及其在豆粕发酵上的应用的制作方法

本发明涉及生物，具体而言，涉及一种含枯草芽孢杆菌和干酪乳杆菌的组合及其在豆粕发酵上的应用。

背景技术：

1、豆粕是一种营养价值较高的植物性蛋白质原料，粗蛋白含量一般在43％～46％，广泛应用于畜禽饲料中。由于豆粕中存在大豆抗原蛋白、胰蛋白酶抑制因子、寡糖和植酸等多种抗营养因子，因此影响了动物肠道对营养物质的吸收利用，破坏肠道形态结构，容易引发幼畜腹泻。

2、发酵豆粕是针对豆粕存在的上述问题提出的常见工艺手段，是指在人为可控的条件下，通过接种特定的益生菌及酶制剂，使其在菌酶协同的作用下将高分子量的蛋白转化为低分子量的小肽，同时在一定程度上消减抗原蛋白(如大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋)和不良寡糖(如水苏糖和棉子糖)的含量，改性升值、促进畜禽胃肠道的消化吸收。

3、高含量的酸溶蛋白是衡量发酵程度的重要指标，但现有发酵豆粕的技术在酸溶蛋白的积累量上普遍较低，因此对抗原蛋白的消除的贡献十分有限；此外高水分酶解豆粕虽然可以实现高含量的酸溶蛋白积累，但是会暴露释放出大量n末端为疏水氨基酸残基的肽(分子量在500-1000da之间)，这些疏水性氨基酸带有不同程度的苦味，影响了产品的适口性。

4、因此，提供可以实现高酸溶蛋白、低苦味肽、低抗原蛋白和低不良寡糖含量的豆粕发酵菌株及其组合方案，是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

1、本发明首先提供了一种干酪乳杆菌，所述干酪乳杆菌为干酪乳杆菌(lactobacillus casei)，其菌株号为td01，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctcc no:m 2022104。

2、本发明还提供了一种复方制剂，所述复方制剂含有枯草芽孢杆菌和上述的干酪乳杆菌；

3、在某些实施例中，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)，其菌株号为yb-10，其保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：cgmcc no.21103(参见cn 113151032a)。

4、在某些实施例中，所述枯草芽孢杆菌的活菌数为0.5～1亿cfu/g；干酪乳杆菌活菌数为0.1～0.5亿cfu/g。

5、在某些实施例中，所述复方制剂还含有酿酒酵母。

6、在某些实施例中，所述酿酒酵母购自安琪酵母股份有限公司的耐高温酿酒高活性干酵母。

7、在某些实施例中，所述酿酒酵母活菌数为0.01～0.05亿cfu/g。

8、本发明还提供了上述的复方制剂在豆粕发酵上的应用。

9、本发明最后提供了一种豆粕的发酵方法，所述发酵方法包括接种上述的复方制剂的步骤。

10、在某些实施例中，所述豆粕发酵采用固态发酵方式，在接种上述复方制剂后，控制水分50％～60％，温度35℃～42℃，进行静置发酵3～5天。

11、本发明与现有技术相比，至少具有如下有益效果：

12、1、枯草芽孢杆菌yb-10，对豆粕中的抗原蛋白具有很高的降解率，并且能够在固态发酵的条件下积累高含量的酸溶蛋白；

13、2、干酪乳杆菌td01，对豆粕中的水苏糖、棉子糖具有很好的降解效果；干酪乳杆菌td01细胞自溶后的胞内代谢产物含有较高的氨肽酶活性，能够有效脱除高酸溶蛋白积累带来的苦味。

14、保藏说明

15、所述枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)yb-10，从棉田土壤中分离得到，于2020年11月04日送至中国普通微生物菌种保藏管理中心保藏，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：cgmcc no.21103，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

16、所述干酪乳杆菌(lactobacillus casei)td01，从天然奶酪中分离得到，于2022年01月28日送至中国典型培养物保藏中心保藏，分类命名为：干酪乳杆菌(lactobacilluscasei)td01，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctcc no:m 2022104，地址：中国湖北武汉武汉大学。

技术特征：

1.一种干酪乳杆菌，其特征在于，所述干酪乳杆菌为干酪乳杆菌(lactobacilluscasei)，其菌株号为td01，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctcc no:m2022104。

2.一种复方制剂，其特征在于，所述复方制剂含有权利要求1所述的干酪乳杆菌和枯草芽孢杆菌，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)，其菌株号为yb-10，其保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：cgmcc no.21103。

3.根据权利要求2所述的复方制剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的活菌数为0.5～1亿cfu/g；干酪乳杆菌活菌数为0.1～0.5亿cfu/g。

4.根据权利要求2所述的复方制剂，其特征在于，所述复方制剂还含有酿酒酵母。

5.根据权利要求4所述的复方制剂，其特征在于，所述酿酒酵母购自安琪酵母股份有限公司的耐高温酿酒高活性干酵母。

6.根据权利要求5所述的复方制剂，其特征在于，所述酿酒酵母活菌数为0.01～0.05亿cfu/g。

7.权利要求2-6任一所述的复方制剂在豆粕发酵上的应用。

8.一种豆粕的发酵方法，其特征在于，所述发酵方法包括接种权利要求2-6任一所述的复方制剂的步骤。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述豆粕发酵采用固态发酵方式，在接种权利要求2-6任一所述复方制剂后，控制水分50％～60％，温度35℃～42℃，进行静置发酵3～5天。

技术总结本发明公开了一种复方制剂，所述复方制剂含有枯草芽孢杆菌和干酪乳杆菌，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，其菌株号为YB‑10，其保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC NO.21103；所述干酪乳杆菌为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)，其菌株号为TD01，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:M 2022104。本发明的枯草芽孢杆菌YB‑10，对豆粕中的抗原蛋白具有很高的降解率，并且能够在固态发酵的条件下积累高含量的酸溶蛋白；本发明的干酪乳杆菌TD01，对豆粕中的水苏糖、棉子糖具有很好的降解效果；干酪乳杆菌TD01细胞自溶后的胞内代谢产物含有较高的氨肽酶活性，能够有效脱除高酸溶蛋白积累带来的苦味。技术研发人员：梁运祥,张遨然,蔡学敏,查宇,肖雷,孙香雪,张传良受保护的技术使用者：湖北蓝谷中微生物技术有限公司技术研发日：技术公布日：2025/1/6