一种拮抗草果萎蔫病原菌的复合微生物发酵菌肥及应用

本发明属于生物防控微生物、生物菌肥，特别涉及一种拮抗草果萎蔫病原菌的复合微生物发酵菌肥及应用。

背景技术：

1、草果在植物分类学中为姜科豆蔻属多年生草本植物，可作为药材起到燥湿化痰、温中健胃、消食顺气等功效，是上好的药食两用的辛香佐料。福贡县以发展草果产业成功入选云南省“一县一业”特色县，草果产业成为当地带动力最强、辐射面最广、贡献率最大的支柱产业。随着种植面积的扩大和配套管理不完善，其病害呈现局部蔓延趋势，尤以萎焉病严重，是由芒果畸形病镰刀菌为主的真菌引起的一类土传病害，草果在处于幼期阶段，遭受萎蔫性病害的可能性相对较高，主要表现在幼苗到开花结果偶尔会出现单株萎蔫的情况。目前草果萎焉病的主要防控方式为化学药剂，但是化学药剂的使用会造成环境污染，且容易产生抗药性。因此，开发安全、环保、高效的生物防治方法迫在眉睫。

2、微生物肥料可使土壤中无效营养有效化，预防和控制农作物病害，减少农药和化肥的使用，是解决土壤、水源和食品污染的根本途径，被普遍认为是一种环境友好、经济有效的提高作物产量的方法，在农业生产中得到广泛应用。然而，目前市场上缺少草果病害专用复合型微生物发酵菌肥，且普通微生物发酵肥对草果病害防治效果不佳，难以满足草果种植的实际需求。

技术实现思路

1、鉴于现有技术的不足，本发明提出了一种拮抗草果萎蔫病原菌的复合微生物发酵菌肥及应用，该菌肥兼具病害防治、改善土壤环境的作用。

2、本发明的技术方案如下：

3、一种拮抗草果萎蔫病原菌的复合微生物发酵菌肥，所述复合微生物发酵菌肥含有以下(1)～(3)中的成分：

4、(1)多粘芽孢杆菌和/或多粘芽孢杆菌发酵液；

5、(2)中华根瘤菌和/或中华根瘤菌发酵液；

6、(3)睾丸酮丛毛单胞菌和/或睾丸酮丛毛单胞菌发酵液。

7、进一步的，所述多粘芽孢杆菌的拉丁名为paenibacillus polymyxa，其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号gdmcc no:64948，保藏时间2024年04月19日，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

8、进一步的，所述中华根瘤菌的拉丁名为sinorhizobium，其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号gdmcc no:64949，保藏时间2024年04月19日，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

9、进一步的，所述睾丸酮丛毛单胞菌的拉丁名为comamonas testosteroni，其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏时间2024年04月19日，保藏编号gdmcc no:64950，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

10、进一步的，所述发酵液为将菌株接种于发酵培养基中培养而得，所述发酵培养基的配方为配方一或配方二：

11、配方一：红糖23.0g/l，豆粕24.0g/l，kh2po4 1.0g/l，caco3 10.0g/l，超纯水1.0l，1wt％氨基酸粉；

12、配方二：玉米粉20.0g/l，豆粕20.0g/l，k2hpo4 5.0g/l，cacl2 5g/l，mgso4·7h2o0.5g/l，超纯水1.0l，1wt％氨基酸粉。

13、进一步的，所述发酵液的制备方法包括以下步骤：

14、制备多粘芽孢杆菌、中华根瘤菌、睾丸酮丛毛单胞菌菌株的种子液；将多粘芽孢杆菌种子液接种于发酵培养基中，摇瓶培养，再接种中华根瘤菌种子液和睾丸酮丛毛单胞菌种子液，继续摇瓶培养，获得发酵液。

15、进一步的，所述发酵液的制备方法包括以下步骤：

16、制备多粘芽孢杆菌、中华根瘤菌、睾丸酮丛毛单胞菌菌株的种子液；将多粘芽孢杆菌种子液接种于发酵培养基中，摇瓶培养至少2天，再接种中华根瘤菌种子液和睾丸酮丛毛单胞菌种子液，继续摇瓶培养至少7天，获得发酵液。

17、本发明的目的之二是提供所述的复合微生物发酵菌肥在草果种植中的应用。

18、本发明的目的之三是提供所述的复合微生物发酵菌肥在抑制植物病原菌中的应用。

19、进一步的，所述植物病原菌为芒果畸形病镰刀菌(fusarium mangiferae)。

20、本发明的有益效果：

21、该复合微生物里的菌株均分离自中国云南省怒江州贡山县独龙江乡龙元村的草果根际土壤，保证了该菌肥回施到草果地后菌株可以有效定植和存活，为未来开发菌肥的实用性奠定基础。

22、本发明的复合微生物菌肥中的菌株包括多粘芽孢杆菌、中华根瘤菌和睾丸酮丛毛单胞菌，三者对草果萎焉病相关镰刀属病原真菌具有协同抑制作用，且中华根瘤菌和睾丸酮丛毛单胞菌为已知的具有固氮和解磷作用功能菌，因此三种菌株的组合使用不仅能达到防治病害的效果而且能改善土壤环境。

23、该复合微生物菌肥的发酵培养基可以不用灭菌直接使用，配方中材料常见，所以该复合菌肥具有易操作、节省成本、适宜大批量生产菌肥等特点。

技术特征：

1.一种拮抗草果萎蔫病原菌的复合微生物发酵菌肥，其特征在于，所述复合微生物发酵菌肥含有以下(1)～(3)中的成分：

2.根据权利要求1所述的复合微生物发酵菌肥，其特征在于，所述多粘芽孢杆菌的拉丁名为paenibacillus polymyxa，其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号gdmccno:64948。

3.根据权利要求1所述的复合微生物发酵菌肥，其特征在于，所述中华根瘤菌的拉丁名为sinorhizobium，其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号gdmcc no:64949。

4.根据权利要求1所述的复合微生物发酵菌肥，其特征在于，所述睾丸酮丛毛单胞菌的拉丁名为comamonas testosteroni，其保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号gdmccno:64950。

5.根据权利要求1所述的复合微生物发酵菌肥，其特征在于，所述发酵液为将菌株接种于发酵培养基中培养而得，所述发酵培养基的配方为配方一或配方二：

6.根据权利要求1所述的复合微生物发酵菌肥，其特征在于，所述发酵液的制备方法包括以下步骤：

7.根据权利要求6所述的复合微生物发酵菌肥，其特征在于，所述发酵液的制备方法包括以下步骤：

8.权利要求1～7任一项所述的复合微生物发酵菌肥在草果种植中的应用。

9.权利要求1～7任一项所述的复合微生物发酵菌肥在抑制植物病原菌中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述植物病原菌为芒果畸形病镰刀菌(fusarium mangiferae)。

技术总结本发明公开了一种拮抗草果萎蔫病原菌的复合微生物发酵菌肥及应用。所述复合微生物发酵菌肥含有多粘芽孢杆菌和/或多粘芽孢杆菌发酵液；中华根瘤菌和/或中华根瘤菌发酵液；睾丸酮丛毛单胞菌和/或睾丸酮丛毛单胞菌发酵液。本发明的复合微生物菌肥中的菌株包括多粘芽孢杆菌、中华根瘤菌和睾丸酮丛毛单胞菌，三者对草果萎焉病相关镰刀属病原真菌具有协同抑制作用，且中华根瘤菌和睾丸酮丛毛单胞菌为已知的具有固氮和解磷作用功能菌，因此三种菌株的组合使用不仅能达到防治病害的效果而且能改善土壤环境。此外，该复合微生物菌肥的制备方法易操作，成本低，适于大批量的产业化生产。技术研发人员：元超,郭玉华,杨晓宇,吴莲张,杨毅,于福来,陈晓鹭,江芊,杨昌彦受保护的技术使用者：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所技术研发日：技术公布日：2025/1/6