多肽P12在制备CXCR4拮抗剂和治疗胰腺癌的药物中的应用

本发明属于生物，具体涉及多肽p12在制备治疗胰腺癌的药物、cxcr4拮抗剂中的应用。

背景技术：

1、胰腺癌是一种恶性程度极高的消化系统肿瘤，发病率和死亡率一直在持续增加。胰腺癌的治疗手段主要有手术切除、化学治疗、放射治疗等。其中，化学治疗是最常用的，主要药物包括吉西他滨(gem)、5-氟尿嘧啶、卡培他滨、白蛋白结合型紫杉醇、奥沙利铂等，但疗效十分有限，由于缺乏有效治疗药物而导致高致死率，5年生存率仅为7％。

2、肿瘤细胞表面会表达多种功能蛋白，当这些蛋白与它们各自对应的特异性配体相结合时，就会激活下游的一系列信号通路，从而增强细胞的相应功能。所谓“拮抗”，即使用可以与细胞表面功能蛋白特异性结合的分子来阻止该蛋白与其特异性配体的结合，从而抑制两者相互作用所导致的细胞活化。

3、肿瘤组织中不仅有肿瘤细胞，还有大量的肿瘤相关基质细胞，它们共同构成肿瘤组织。胰腺癌肿瘤的病理特点是肿瘤细胞被致密的基质细胞所包裹，基质细胞形成的致密屏障阻碍了药物向肿瘤组织内部的有效渗透，这是导致化疗效果很低的重要原因之一；与此同时，胰腺癌是“冷”肿瘤，即肿瘤微环境中杀伤性淋巴细胞很少，对肿瘤的杀伤能力也较低。上述病理特点与肿瘤细胞和基质细胞均高表达cxc趋化因子受体4(cxcr4)有密切关系。

4、cxcr4在胰腺癌细胞中高表达，其特异性配体为cxcl12，由多种肿瘤相关基质细胞分泌，两者组成生物轴cxcr4/cxcl12，通过相互作用而激活cxcr4下游信号通路，提高肿瘤细胞的存活和迁移能力，并促进其与成纤维细胞和巨噬细胞的粘附。与此同时，肿瘤组织中的成纤维细胞和巨噬细胞也表达cxcr4，可通过自分泌的cxcl12而自我激活，从而分泌更多的细胞外基质和招募更多的成纤维细胞来包裹胰腺癌肿瘤细胞，由此形成胰腺癌肿瘤特有的紧密基质屏障，进而导致耐药的发生。此外，骨髓、淋巴结等肿瘤外组织中的基质细胞也分泌cxcl12，胰腺癌肿瘤细胞会通过cxcr4/cxcl12生物轴而向这些组织和器官浸润和迁移，最终导致在这些器官或组织形成新的肿瘤组织。cxcr4/cxcl12轴还通过介导胰腺癌肿瘤细胞与巨噬细胞相互作用，间接抑制杀伤性淋巴细胞进入肿瘤组织和对肿瘤细胞进行有效杀伤。

5、目前已有少数几个cxcr4多肽拮抗剂进入胰腺癌治疗临床试验阶段，如美国礼来公司的产品ly2510924，其是由7个氨基酸组成的环肽，但具有比较显著的血小板毒性。迄今还没有理想的cxcr4拮抗药物用于胰腺癌治疗。

技术实现思路

1、本发明提供一种可有效拮抗cxcr4的新型多肽拮抗剂(命名为多肽p12)，以及该多肽p12在制备用于治疗胰腺癌的药物中的应用。

2、所述多肽p12的氨基酸序列为：qgcrrrntvddwisrrral，或x1-gx2g-qgcrrrntvddwisrrral，其中：x1为空、或为生物素biotin、或为荧光分子；x2为空、或为氨基酸残基c。

3、在一些实施方式中，所述多肽p12还与化疗药联合应用，其中多肽p12与化疗药可分开顺次给药，以提高胰腺癌治疗效率。

4、在一些实施方式中，所述化疗药包括吉西他滨(gem)、5-氟尿嘧啶、白蛋白紫杉醇、卡培他滨和奥沙利铂。

5、在一些实施方式中，所述药物通过抑制cxcr4/cxcl12生物轴介导的胰腺癌细胞、胰腺癌肿瘤组织中基质细胞的下游信号通路(如erk、p38等)的磷酸化，来治疗胰腺癌。

6、在一些实施方式中，所述药物通过抑制cxcr4/cxcl12生物轴介导的胰腺癌细胞的迁移来治疗胰腺癌。

7、在一些实施方式中，所述药物通过抑制cxcr4/cxcl12生物轴介导的胰腺癌细胞与胰腺癌肿瘤组织中基质细胞的粘附，来治疗胰腺癌。

8、在一些实施方式中，所述药物通过克服cxcr4/cxcl12生物轴介导的免疫耐受，提高淋巴细胞对胰腺癌细胞的杀伤作用，来治疗胰腺癌。

9、在一些实施方式中，所述药物的剂型包括液体制剂、冻干粉制剂。

10、本发明将具有拮抗cxcr4功能的多肽p12制备成治疗胰腺癌的药物，其可抑制cxcr4/cxcl12生物轴介导的胰腺癌细胞、胰腺癌肿瘤组织中基质细胞的下游信号通路(如erk、p38等)的磷酸化、胰腺癌细胞的迁移、胰腺癌细胞与胰腺癌肿瘤组织中基质细胞的粘附、和/或克服cxcr4/cxcl12生物轴介导的免疫耐受以提高淋巴细胞对胰腺癌细胞的杀伤作用，实施例结果证明该多肽p12还能够抑制胰腺癌细胞增殖、以及延长胰腺癌小鼠的生存期，表现出抗胰腺癌治疗功效，并且不影响循环血液中血小板数量，即无明显血小板毒性。实施例结果还证明当该多肽p12与化疗药联合应用时，还能够增加肿瘤对化疗的敏感性，提高化疗效果，进一步延长胰腺癌动物的生存期。与现有多肽拮抗剂(例如ly2510924)相比，多肽p12不仅具有显著的抗胰腺癌肿瘤活性，而且在用于胰腺癌治疗时无血小板毒性。因此，利用多肽p12制备治疗胰腺癌的药物将大有裨益。

技术特征：

1.多肽p12在制备cxcr4拮抗剂中的应用。

2.多肽p12在制备治疗胰腺癌的药物中的应用。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述多肽p12的氨基酸序列为：qgcrrrntvddwisrrral，或x1-gx2g-qgcrrrntvddwisrrral，其中：x1为空、或为生物素biotin、或为荧光分子；x2为空、或为氨基酸c。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其中所述多肽p12还与化疗药联合应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其中所述化疗药包括吉西他滨(gem)、5-氟尿嘧啶、卡培他滨、紫杉醇和奥沙利铂。

6.根据权利要求2-5中任一项所述的应用，其中所述药物通过抑制cxcr4/cxcl12生物轴介导的胰腺癌细胞、胰腺癌肿瘤组织中基质细胞的下游信号通路(如erk、p38等)的磷酸化，来治疗胰腺癌。

7.根据权利要求2-5中任一项所述的应用，其中所述药物通过抑制cxcr4/cxcl12生物轴介导的胰腺癌细胞的迁移来治疗胰腺癌。

8.根据权利要求2-5中任一项所述的应用，其中所述药物通过抑制cxcr4/cxcl12生物轴介导的胰腺癌细胞与胰腺癌肿瘤组织中基质细胞的粘附，来治疗胰腺癌。

9.根据权利要求2-5中任一项所述的应用，其中所述药物通过克服cxcr4/cxcl12生物轴介导的免疫耐受，提高淋巴细胞对胰腺癌细胞的杀伤作用，来治疗胰腺癌。

10.根据权利要求2-9中任一项所述的应用，其中所述药物的剂型包括液体制剂、冻干粉制剂。

技术总结本发明公开了多肽P12在制备CXCR4拮抗剂和治疗胰腺癌的药物中的应用，属于生物技术领域。多肽P12作为CXCR4拮抗剂可抑制CXCR4/CXCL12生物轴介导的胰腺癌细胞和基质细胞的迁移、胰腺癌细胞与胰腺癌肿瘤组织中基质细胞的粘附、以及下游信号通路的磷酸化，可作为单药或与化疗药联合应用，具有抗胰腺癌功效或增加胰腺癌对化疗的敏感性功效，均可以延长胰腺癌小鼠生存期。技术研发人员：许海燕,王琛,孟洁,刘健,杨延莲,温涛,方小翠受保护的技术使用者：中国医学科学院基础医学研究所技术研发日：技术公布日：2024/6/13