一种茶多糖复合物、制备方法及应用

本发明涉及黄大茶调控糖代谢稳态，具体涉及一种茶多糖复合物、制备方法及应用。

背景技术：

1、黄大茶因其具有独特风味和多重健康属性，而受到消费者的广泛青睐。例如，黄大茶具有改善胰岛素抵抗，延缓血糖快速上升，改善高脂引起的肥胖和糖代谢紊乱等作用。

2、特别是黄大茶经过其特殊工艺拉老火后，对肥胖小鼠的糖紊乱改善比拉老火前的黄大茶效果更为显著，结果表明，拉老火这一过程提高了黄大茶对糖紊乱的调控作用。

3、虽然黄大茶具有很好的健康效应，但是通过饮用黄大茶的茶水来延缓血糖快速上升、改善高脂引起的肥胖和糖代谢紊乱，需要服用较大剂量的茶水，效率较低。

4、并且黄大茶茶水口感苦涩，包含咖啡碱等刺激神经类物质，会对敏感人群的肠胃产生刺激，影响睡眠。

5、问题在于，黄大茶中有成千上万种活性物质，目前尚不清楚具体是哪些活性物质起主要贡献作用，若是将这些起主要作用的活性成分提取出来，便可以实现目标人群仅需要服用微量的活性物质，就能获得黄大茶最大的健康效应。

6、综上所述，直接饮用黄大茶茶水来获取健康效应的效率过低，并且黄大茶茶水口感苦涩，包含咖啡碱等刺激神经类物质，会对敏感人群的肠胃产生刺激，影响睡眠，急需找到黄大茶中对健康效应起主要作用的活性物质以替代黄大茶茶水。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本发明具体提供一种茶多糖复合物，所述茶多糖复合物由egcg、gcg、ga、pga和茶多糖组成，用于抑制高脂饮食引起的肥胖和糖代谢紊乱。

2、作为本发明的一种优选方案，所述茶多糖复合物中各组分的重量配比为20-60份egcg、5-15份gcg、2-4份ga、3-9份pga和60-180份茶多糖。

3、为解决上述技术问题，本发明还进一步提供一种制备上述茶多糖复合物的方法，包括以下步骤：

4、制备黄大茶提取液的浓缩液；

5、将浓缩液分离制备粗茶多糖和上清液；

6、将粗茶多糖除色除蛋白，制备相对纯净的茶多糖溶液；

7、从上清液中萃取茶多酚溶液；

8、通过液相色谱-质谱联用技术鉴定茶多酚溶液中化合物组成，并分离制备egcg、gcg、ga和pga；

9、将茶多糖溶液与egcg、gcg、ga及pga均质混合，制备茶多糖复合物溶液；

10、将复合物溶液喷雾干燥，制备茶多糖复合物粉末，保存备用。

11、作为本发明的一种优选方案，制备黄大茶浓缩液的方法为：

12、通过超微粉碎技术将适量的黄大茶粉碎，制备黄大茶粉末；

13、将黄大茶粉末与水以1：10的茶水比加入90℃的纯水浸提30min，并过滤收集提取液：

14、重复浸提两次，合并提取液；

15、通过减压旋蒸将提取液浓缩得到浓缩液，提取液与浓缩液的浓缩比为8：1；

16、将浓缩液冻干备用。

17、作为本发明的一种优选方案，从浓缩液中制备粗茶多糖和上清液的方法为：

18、将浓缩液置于玻璃烧杯中，加入无水乙醇至乙醇浓度为75％，浓缩液与无水乙醇的比例为1：3；

19、通过无水乙醇沉淀出粗茶多糖，并进行离心分离，沉淀物即为粗茶多糖，留存的浓缩液即为上清液。

20、作为本发明的一种优选方案，以粗茶多糖为基础制备相对纯净的茶多糖溶液的方法为：

21、向粗茶多糖内加入适量的无水乙醇，并进行过滤，以对粗茶多糖脱色；

22、重复加入无水乙醇并过滤三次，以使粗茶多糖尽可能完全脱色；

23、在烧杯中置入适量的脱色后的粗茶多糖溶液，并加入相同体积的正丁醇-三氯甲烷溶液，在磁力搅拌下作用30min，搅拌结束后，离心，保存上层粗茶多糖溶液，弃掉下层有机层，以去除蛋白质；

24、重复上述除蛋白质步骤五次，得到相对纯净的茶多糖。

25、作为本发明的一种优选方案，从上清液中分离制备茶多酚的方法为：

26、将上清液减压浓缩旋蒸，去除残留的有机试剂乙醇；

27、取50ml去乙醇后的上清液置于分液漏斗中，加入50ml二氯甲烷并剧烈摇晃，静止15min后保留下层有机相；

28、重复向上层茶水添加50ml二氯甲烷三次，得到150ml二氯甲烷萃取组分，通过二氯甲烷萃取出上清液中的咖啡碱，以避免因咖啡碱引起的精神异常兴奋，入眠困难等症状；

29、将去除咖啡碱后的茶水用乙酸乙酯萃取三次，保留上层乙酸乙酯相，乙酸乙酯可萃取出茶汤中大部分的茶多酚；

30、将150ml乙酸乙酯萃取溶液通过减压浓缩旋蒸除去残留的有机试剂，得到茶多酚溶液。

31、作为本发明的一种优选方案，使用1260infinityⅱ高效液相色谱仪，从茶多酚溶液中制备分离制备egcg、gcg、ga和pga的方法为：

32、样品制备方法：将乙酸乙酯层的母液稀释100倍，过0.22μm滤膜后进液相检测；

33、制备液相方法：液相条件：使用agilent 1260infinity二元泵液相；

34、色谱柱：agilent sb-aq c18(250×4.6mm,5μm；agilent technologies,paloalto,ca,usa)；

35、流动相a：0.2％甲酸水；

36、流动相b：甲醇；

37、洗脱梯度：0-5min,5-20％ b；5-18min,20-25％ b；18-25min,25-42％ b；25-32min,42％ b；32-40min,42-100％ b；40-42min,100％-5％ b；42-55min,5％b；进样体积：60μl；柱温：30℃，流速：1ml/min；

38、接100针后将每个组分通过减压浓缩蒸干，再加入纯水复溶定容至10ml。

39、作为本发明的一种优选方案，在均质混合步骤中，先将egcg、gcg、ga及pga均质混合，再将均质混合后的egcg、gcg、ga及pga与茶多糖均质混合。

40、一种茶多糖复合物的应用，所述茶多糖复合物用于改善胰岛素抵抗、延缓餐后血糖快速上升和/或改善高脂引起的肥胖和糖代谢紊乱。

41、本发明与现有技术相比较具有如下有益效果：

42、egcg、gcg、ga、pga和茶多糖以其在黄大茶水提取物中的原始比例混合后，其健康效应，即抑制高脂饮食引起的肥胖和糖代谢紊乱的效果，可以达到黄大茶整茶的80％。

43、目标人群通过直接口服该茶多糖复合物，即可直接获得黄大茶的大部分健康效应；相比于饮用黄大茶茶水来说，减少了茶叶中咖啡碱带来的神经兴奋和口感苦涩，具有成分简单，剂量低，安全性高等优点。

技术特征：

1.一种茶多糖复合物，其特征在于，

2.根据权利要求1所述的茶多糖复合物，其特征在于，

3.一种制备权利要求1或2所述的茶多糖复合物的方法，其特征在于，

4.根据权利要求3所述的制备茶多糖复合物的方法，其特征在于，

5.根据权利要求4所述的制备茶多糖复合物的方法，其特征在于，

6.根据权利要求5所述的制备茶多糖复合物的方法，其特征在于，

7.根据权利要求5所述的制备茶多糖复合物的方法，其特征在于，

8.根据权利要求7所述的制备茶多糖复合物的方法，其特征在于，

9.根据权利要求3所述的制备茶多糖复合物的方法，其特征在于，

10.一种权利要求1或2所述的茶多糖复合物的应用，其特征在于，

技术总结本发明公开了黄大茶调控糖代谢稳态技术领域的一种茶多糖复合物、制备方法及应用，该茶多糖复合物由EGCG、GCG、GA、PGA和茶多糖组成，以其在黄大茶水提取物中的原始比例混合后，其健康效应，即抑制高脂饮食引起的肥胖和糖代谢紊乱的效果，可以达到黄大茶水提取物的80％。重要的是，本茶多糖复合物成分简单，含量仅为黄大茶原茶的15％。此外，本茶多糖复合物不包含咖啡碱等刺激神经类物质，减少对敏感人群肠胃的刺激和睡眠的影响。目标人群通过直接口服该茶多糖复合物，即可直接获得黄大茶原茶的大部分健康效应。总的来说，口服本茶多糖复合物更加直接高效，并且极具便利性。技术研发人员：许娜,杨倩楠,王一君,宛晓春,彭甜甜受保护的技术使用者：安徽农业大学技术研发日：技术公布日：2024/5/19