一种藜麦苗菜酸性多糖及改性酸性多糖、制备方法及用途

本发明涉及一种藜麦苗菜酸性多糖及改性酸性多糖、制备方法及用途。

背景技术：

1、免疫是帮助机体消灭病原体(细菌、病毒等)和肿瘤细胞，保持机体健康的生理过程，对人体正常的生理健康有不可或缺的重要意义。多糖因其具有显著的免疫刺激活性被认为是天然的免疫调节剂或免疫增强剂。多糖可以通过各种方式发挥免疫调节作用来改善或提高宿主免疫力。一方面，多糖可以增强免疫器官功能，激活免疫细胞相关信号通路，促进免疫相关细胞因子产生，从而增强机体的免疫功能发挥免疫调节作用。另一方面，多糖可以通过调节肠道菌群，增加肠道益生菌的数量和种类以及代谢产物，间接发挥免疫调节作用，提高机体免疫力。

2、藜麦(chenopodium quinoa willd.)是一种苋科藜属一年生双子叶的植物，原产于南美洲安第斯山区，是古印加人的传统主粮之一，古印加人称其为“谷物之母”。藜麦因其营养价值和生物活性成分而被认为是功能性食品和营养保健品。苗菜被定义为可在栽培后几周或10天内收获的鲜嫩未成熟蔬菜。苗菜作为一类新兴的农产品，因其具有高价值的活性化成分而受到越来越多的关注。目前针对藜麦的研究主要针对藜麦籽粒、藜麦叶，对于藜麦苗菜的研究，有文献报道藜麦芽苗具有抗氧化活性，且藜麦芽苗的多酚、黄酮含量与抗氧化活性存在一定相关性(张琴萍，藜麦芽苗菜营养功能品质特性研究，成都大学，2020年论文)，目前对于藜麦苗菜中的多糖类成分的研究还鲜有文献报道。

技术实现思路

1、本发明提供了一种藜麦苗菜酸性多糖及改性酸性多糖、制备方法及用途。

2、本发明提供了一种藜麦苗菜酸性多糖，它是藜麦(chenopodium quinoa willd.)苗菜的水提取藜麦苗菜酸性多糖，含有总多糖89.76±3.24mg/100mg，糖醛酸39.69±1.20mg/100mg，总蛋白质1.56±0.09mg/100mg，酯化度为28.49％±0.41％；

3、进一步地，多糖的分子量mw×104为：4.533±0.142da，分散系数mw/mn为：1.895-1.927；

4、含有以下摩尔比的单糖：

5、鼠李糖1、甘露糖0.51-0.56、葡萄糖醛酸0.49-0.55、半乳糖醛酸2.44-2.53、葡萄糖0.16-0.19、半乳糖2.07-2.33、木糖0.14-0.16、阿拉伯糖1.34-1.39。

6、本发明提供了一种所述的藜麦苗菜酸性多糖的制备方法，它包括如下步骤：

7、a、采摘后的藜麦苗菜，冷冻干燥后打粉过筛；

8、b、脱脂：用80％乙醇对藜麦苗菜粉进行脱脂，离心后倒掉上清液，得沉淀；

9、c、水提取：用超纯水提取，离心，上清液备用；

10、d、除淀粉和蛋白质：依次使用α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和胰蛋白酶消化酶去除上清液中的淀粉和蛋白质；

11、e、醇沉：使用75％v/v乙醇进行分馏沉淀，然后离心，收集沉淀；

12、d、超滤：将e步骤的沉淀用超纯水复溶，超滤膜收集分子量在3kda和100kda之间的馏分、冷冻干燥，即得。

13、本发明还提供了一种改性藜麦苗菜酸性多糖，它是采用低温碱脱脂技术处理藜麦苗菜酸性多糖，其中，含有总多糖84.8-89.32mg/100mg，糖醛酸38-43mg/100mg，总蛋白质1.3-1.65mg/100mg，酯化度4.22％-17.1％。

14、其中，含有总多糖87.06±2.26mg/100mg，糖醛酸40.90±1.77mg/100mg，总蛋白质1.51±0.14mg/100mg，酯化度为16.80％±0.30％；

15、或，

16、含有总多糖86.67±1.12mg/100mg，糖醛酸39.99±1.31mg/100mg，总蛋白质1.42±0.09mg/100mg，酯化度为4.40％±0.18％。

17、进一步优选地，多糖的分子量mw×104为：4.27-4.789da，分散系数mw/mn为：1.973-2.071；

18、含有以下摩尔比的单糖：

19、鼠李糖1、甘露糖0.55-0.57、葡萄糖醛酸0.52-0.55、半乳糖醛酸2.49-2.56、葡萄糖0.17-0.19、半乳糖2.17-2.19、木糖0.15 -0.17、阿拉伯糖1.39-1.41。

20、本发还提供了所述的改性藜麦苗菜酸性多糖的制备方法，它包括如下步骤：

21、a、取所述的藜麦苗菜酸性多糖分别加入到ph值为10.0和12.0的naoh溶液中，在4℃下搅拌；

22、b、向a步骤的溶液中加入盐酸(1m)，直至ph值为6.0，经分子量限量为3.5kda的透析和冷冻干燥，分别得到中酯化度(qm-mde)和低酯化度(qm-lde)的改性藜麦苗菜酸性多糖。其中，ph值为10.0的条件下，制备的是中酯化度藜麦苗酸性多糖qm-mde；ph值为12.0的条件下，制备的是低酯化度藜麦苗菜酸性多糖qm-lde。

23、本发明还提供了所述的藜麦苗菜酸性多糖在制备具有免疫增强的药物或保健食品中的用途。

24、本发明还提供了所述的藜麦苗菜酸性多糖在制备有助于调节肠道菌群的药物或保健食品中的用途。

25、本发明还提供了所述的藜麦苗菜酸性多糖在制备改善肝损伤、抗氧化的药物中的用途。

26、酸性多糖是指含有羧基或硫酸根等酸性基团的多糖，是一种重要的生命物质。其来源广泛，具有多种生物活性，如抗氧化、免疫调节、降血糖和抗肿瘤等活性，具有巨大的发展潜力，已经受到越来越多的关注和研究。植物酸性多糖主要为果胶多糖，果胶多糖的主要结构域为聚半乳糖醛酸(hg)和鼠李半乳糖醛酸(rg-i)。hg和rg-i的甲基化和乙酰化酯化程度不同，导致其功能特性和健康益处存在一定差异。对酸性多糖进行适当的修饰，可以改变其空间结构、单糖组成、分子量以及取代基的类型、位置和数量等，从而达到增强生物活性的目的。

27、本发明藜麦苗菜酸性多糖具有增加免疫作用，对藜麦苗菜酸性多糖进行结构改性，采用低温碱脱酯技术将天然藜麦苗菜酸性多糖(qm-hde)制备成改性藜麦苗菜酸性多糖(中酯化度多糖：qm-mde；低酯化度多糖：qm-lde)，并分析不同酯化度藜麦苗菜酸性多糖(qm-hde、qm-mde和qm-lde)的结构特征，并进一步探究其对rwa264.7细胞的免疫刺激作用和潜在机制，以及对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠肠道菌群的改善作用和免疫增强的作用。本发明制备的藜麦苗菜酸性多糖分子量低，富含hg和rg-i，溶解性好，具有显著的免疫调节活性和调节肠道菌群的作用，尤其是经过改性后的低酯化度藜麦苗菜酸性多糖，药效更好。

技术特征：

1.一种藜麦苗菜酸性多糖，其特征在于：它是藜麦(chenopodium quinoa willd.)苗菜的水提取藜麦苗菜酸性多糖，含有总多糖89.76±3.24mg/100mg，糖醛酸39.69±1.20mg/100mg，总蛋白质1.56±0.09mg/100mg，酯化度28.49％±0.41％。

2.根据权利要求1所述的藜麦苗菜酸性多糖，其特征在于：多糖的分子量mw为：4.643±0.142×104da，分散系数mw/mn为：1.895-1.927；

3.一种权利要求1或2所述的藜麦苗菜酸性多糖的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：

4.一种改性藜麦苗菜酸性多糖，其特征在于：它是采用低温碱脱酯技术处理权利要求1或2所述的藜麦苗菜酸性多糖，其中，含有总多糖84.8-89.32mg/100mg，糖醛酸38-43mg/100mg，总蛋白质1.3-1.65mg/100mg，酯化度4.22％-17.1％。

5.根据权利要求4所述的改性藜麦苗菜酸性多糖，其特征在于：含有总多糖87.0±2.26mg/100mg，糖醛酸40.90±1.77mg/100mg，总蛋白质1.51±0.14mg/100mg，酯化度16.80％±0.30％；

6.根据权利要求4或5所述的改性藜麦苗菜酸性多糖，其特征在于：多糖的分子量mw为：4.27-4.789×104da，分散系数mw/mn为：1.973-2.071；

7.权利要求4-6任意一项所述的改性藜麦苗菜酸性多糖的制备方法，其特征在于：它包括如下步骤：

8.权利要求1、2、4、5、6任意一项所述的藜麦苗菜酸性多糖在制备具有免疫增强的药物或保健食品中的用途。

9.权利要求1、2、4、5、6任意一项所述的藜麦苗菜酸性多糖在制备有助于调节肠道菌群的药物或保健食品中的用途。

10.权利要求1、2、4、5、6任意一项所述的藜麦苗菜酸性多糖在制备改善肝损伤、抗氧化的药物中的用途。

技术总结本发明提供了一种藜麦苗菜酸性多糖，本发明还提供了该藜麦苗菜酸性多糖的制备方法。本发明提供了一种改性藜麦苗菜酸性多糖以及制备方法和在制备具有免疫增强、调节肠道菌群的药物或保健食品中的用途。本发明制备的藜麦苗菜多糖分子量低，富含聚半乳糖醛酸(HG)和鼠李半乳糖醛酸(RG‑I)型果胶结构域，溶解性好，具有显著的免疫调节活性和调节肠道菌群的作用，尤其是经过改性后的低酯化度藜麦苗菜酸性多糖，药效更好。技术研发人员：吴定涛,李洁,万佳佳,冯静,李波,胡一晨,邹亮受保护的技术使用者：成都大学技术研发日：技术公布日：2024/6/13