一种在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料及其制备方法和应用

本发明属于材料原位合成及生物医学，具体涉及一种在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料及其制备方法和应用，尤其涉及以金前驱体在体内原位制备金纳米簇材料，以及该方法用于对多毛症的抑毛中的应用。

背景技术：

1、由于长期反复不当的使用外用激素或广泛使用含激素的护肤品导致激素依赖性皮炎发病呈逐年上升趋势，顽固难治愈；病症具体表现为外用糖皮质激素之后原发皮损消失，但是停用后再次出现炎性损害，需要反复使用糖皮质激素来控制症状并且皮炎逐步加重。长期用药后出现多毛、色素沉着等症状。多毛症是指女性在面部、上下肢和躯干等部位出现男性类型的终(粗)毛，粗毛过分增多而超出正常范围或毳毛部位长出粗黑的毛。研究更为有效的方法来消除激素依赖性皮炎，抑制多毛一直是皮肤科医生的努力方向。

2、目前治疗多毛的方法并不理想。药物治疗，比如依氟鸟氨酸副作用严重，治疗效果不佳。通过光脱毛和电解等物理疗法去除不必要的毛发是痛苦和反复的，这会破坏毛囊并耗尽皮肤干细胞库，不利于伤口愈合。长期来看，这种疾病会给患者造成心理困扰。因此，开发一种更安全、更有效的策略显得尤为重要。

3、当皮肤受损时，正常的毛囊周期就会被打乱。同时，皮肤损伤通常伴随着大量活性氧(ros)的产生，是由吞噬细胞的呼吸爆发和角化细胞、成纤维细胞和内皮细胞的nadph氧化酶所介导的。生物体内ros是细胞在有氧代谢时产生的含氧及其代谢产物的一类高生物活性物质，包括羟自由基、超氧阴离子、过氧化氢，以及单线态氧、激发态的氧、极不稳定的一氧化氮自由基等。正常情况下，体内代谢仅产生少量ros，主要为超氧阴离子(约占总耗氧量的5％)，适量的ros可对机体起保护作用，如吞噬细胞产生ros可清除病毒等外来入侵物；少量ros也可以作为第二信使激活mapk、erk、rac等信号通路，调节细胞增殖、分化及成熟。由于存未配对的电子，ros是不稳定的，很容易与其他分子发生反应。特别是，过量的ros会对细胞膜上的脂质和蛋白质以及细胞核和线粒体中的dna造成氧化损伤。在氧化应激下，细胞需要增加总的抗氧化剂的产量来维持平衡状态。因此，损伤皮肤中存在氧化应激微环境(osm)。表皮干细胞在健康和氧化应激条件下起维持皮肤上皮的作用，它们是皮肤组织适应创伤的关键介质。在炎症胁迫下，毛囊干细胞(hfscs)处于激活状态，在损伤后驱动毛囊新生，导致毛发再生。

4、近年来，研究发现许多体外合成的金属和金属氧化物纳米颗粒已被用于保护皮肤细胞免受ros的侵害，包括金纳米颗粒、银纳米颗粒、氧化铁纳米颗粒、氧化铈纳米颗粒、铂纳米颗粒和硒纳米颗粒。由于这些体外合成的纳米颗粒直径较大，并且在合成过程中引入了稳定剂和还原剂，因此会对生物体产生毒性。金纳米材料，荧光特性稳定，生物相容性好，在生物医学中具有广阔的应用前景：如用于肿瘤成像诊断与治疗；负载药物提高靶向性。金纳米材料在进入靶细胞后可以调节细胞增殖、分化及凋亡等相关生物学效应。金纳米簇具有很好的生理稳定性，容易逃脱网状内皮系统的捕获，在正常组织中代谢而荧光信号逐渐消失，最终通过肾清除过滤以尿液的形式排除体外。尤其是原位生物合成的荧光纳米簇具有良好的生物相容性，在许多研究中被用于癌症成像和治疗。然而，荧光纳米簇能否在正常或受损皮肤细胞中合成尚不清楚。

技术实现思路

1、发明目的：本发明所要解决的第一个技术问题是提供了一种能够抑制损伤皮肤毛囊再生的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法。

2、本发明所要解决的第二个技术问题是提供了一种能够显著抑制多毛症的原位生成的金纳米簇材料。

3、本发明所要解决的第三个技术问题是提供了原位生成的金纳米簇材料在制备损伤皮肤病相关多毛症的抑毛的药物中的应用。

4、技术方案：为了解决上述技术问题，本发明提供了一种在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法，包括以下步骤：将金前驱体溶液处理损伤模型即得原位生成的金纳米簇材料，所述金前驱体溶液包括氯金酸溶液、氯金酸钠溶液、八氯化四金溶液、三氯化金溶液或一氯化金溶液中的一种或几种。

5、其中，所述金前驱体溶液是将金前驱体溶于ph缓冲液中制备得到。

6、其中，所述ph缓冲液包括磷酸盐缓冲液。

7、其中，所述金前驱体溶液的浓度为1.5～2.0mmol/l。

8、其中，所述损伤模型包括小鼠拔毛损伤模型或小鼠全层皮肤缺失模型。

9、其中，所述小鼠拔毛损伤模型的构建方法包括：选取处于毛囊静止期的小鼠，无皮肤病且无抓痕损伤，采用松蜡合剂拔去背毛，形成拔毛损伤模型。

10、其中，所述小鼠全层皮肤缺失模型的构建方法如下：选取处于毛囊静止期的小鼠，无皮肤病且无抓痕损伤，造模器在小鼠背部皮肤形成一个直径3～5mm的圆形全层皮肤缺损。

11、本技术实现要素：还包括所述的制备方法制备得到的原位生成的金纳米簇材料。

12、本发明内容还包括所述的原位生成的金纳米簇材料在损伤皮肤成像鉴别中的应用，所述应用不涉及疾病的治疗和诊断目的。

13、本发明内容还包括所述的原位生成的金纳米簇材料或金纳米簇材料在制备针对皮肤损伤相关的多毛症的抑毛药物中的应用。

14、有益效果：与现有技术相比，本发明用金离子作为前驱体，利用受损皮肤中的osm原位合成金纳米簇，实现对正常皮肤与受损皮肤的成像鉴别；在损伤模型中原位合成的金纳米簇进一步还可抑制毛囊再生，对皮肤损伤相关多毛症起抑毛作用。这种简便、安全、无毒的原位生物合成方法在未来应用于抑制皮肤损伤相关的多毛症具有很大的潜力。

技术特征：

1.一种在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将金前驱体溶液处理损伤模型即得原位生成的金纳米簇材料，所述金前驱体溶液包括氯金酸溶液、氯金酸钠溶液、八氯化四金溶液、三氯化金溶液或一氯化金溶液中的一种或几种。

2.根据权利要求1所述的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法，其特征在于，所述金前驱体溶液是将金前驱体溶于ph缓冲液中制备得到。

3.根据权利要求2所述的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法，其特征在于，所述ph缓冲液包括磷酸盐缓冲液。

4.根据权利要求2所述的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法，其特征在于，所述金前驱体溶液的浓度为1.5~2.0 mmol/l。

5.根据权利要求1所述的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法，其特征在于，所述损伤模型包括小鼠拔毛损伤模型或小鼠全层皮肤缺失模型。

6.根据权利要求1所述的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法，其特征在于，所述小鼠拔毛损伤模型的构建方法包括：选取处于毛囊静止期的小鼠，无皮肤病且无抓痕损伤，采用松蜡合剂拔去背毛，形成拔毛损伤模型。

7.根据权利要求1所述的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料的制备方法，其特征在于，所述小鼠全层皮肤缺失模型的构建方法如下：选取处于毛囊静止期的小鼠，无皮肤病且无抓痕损伤，造模器在小鼠背部皮肤形成直径3~5mm的圆形全层皮肤缺损。

8.权利要求1~7任一项所述的制备方法制备得到的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料。

9.权利要求8所述的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料在损伤皮肤成像鉴别中的应用，所述应用不涉及疾病的治疗和诊断目的。

10.权利要求9所述的在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料或金纳米簇材料在制备针对皮肤损伤相关的多毛症的抑毛药物中的应用。

技术总结本发明公开了一种在损伤模型中原位生成的金纳米簇材料及其制备方法和应用，包括以下步骤：将金前驱体溶液处理损伤模型即得原位生成的金纳米簇材料，所述金前驱体溶液包括氯金酸溶液、氯金酸钠溶液、八氯化四金溶液、三氯化金溶液或一氯化金溶液中的一种或几种。本发明以前驱体原位合成金纳米材料，该纳米材料生物相容性良好、荧光特性稳定，可以实现对正常皮肤与损伤皮肤的成像鉴别；本发明的方法可对皮肤损伤相关多毛症起抑毛作用。技术研发人员：王雪梅,赖向东,姜晖,刘晓辉受保护的技术使用者：东南大学技术研发日：技术公布日：2024/6/2