一种Tazemetostat的合成方法

本发明属于化工和化学医药领域，具体涉及一种tazemetostat的合成方法。

背景技术：

1、tazemetostat是由epizyme公司2012年开发的一种口服ezh2(果蝇zeste基因增强子的人类同源物2)小分子抑制剂，于2020年1月23日经美国fda通过快速通道批准上市，用于治疗16岁及以上患者的不适合完全切除的转移性/局部晚期上皮样肉瘤，商品名为tazverik。

2、该药被fda指定为孤儿药，此次加速批准，基于ⅱ期临床试验中的总缓解率(orr)和缓解持续时间(dor)数据，受试者存在ini1蛋白表达缺失。在接受治疗的62例患者中，总缓解率为15％，1.6％的患者达到完全缓解，13％的患者达到部分缓解。除了上皮样肉瘤，tazemetostat还对滤泡性淋巴瘤患者显现出良好的效果，2020年6月美国fda批准其扩大适应症，治疗既往接受过至少2种系统治疗的反复/难治性滤泡性淋巴瘤成人患者，以及无满意替代治疗选择的反复/难治性滤泡性淋巴瘤成人患者。此次获批是基于他泽司他在临床试验结果：在携带ezh2突变，并且至少接受过2种前期疗法的42名滤泡性淋巴瘤患者中，总缓解率达到69％，完全缓解率为12％，部分缓解率为57％；中位持续持续时间为10.9个月。

3、tazemetostat的化学名是n-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-吗啉甲基-(1,1'-联苯)-3-甲酰胺，英文名是n-[(4,6-dimethyl-2-oxo-1,2-dihydropyridin-3-yl)methyl]-5-[ethyl(tetrahydro-2h-pyran-4-yl)amino]-4-methyl-4'-(morpholinomethyl)-(1,1'-biphenyl)-3-carboxamide；分子式：c34h44n4o4；分子量：572.74；cas号：1403254-99-8

4、

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种tazemetostat的合成方法，该方法反应条件温和，成本低，收率高，对环境污染少，适于工业化生产。

2、为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

3、一种tazemetostat的合成方法，包括以下步骤：

4、1)以5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸(化合物2)为起始主原料，5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸和4-甲酰基苯硼酸在催化剂催化下发生偶联反应，得到4'-甲酰基-4-甲基-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸(化合物3)

5、

6、2)4'-甲酰基-4-甲基-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸在甲醇和催化量的浓硫酸中发生酯化反应，得到4'-甲酰基-4-甲基-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物4)

7、

8、3)4'-甲酰基-4-甲基-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯在酸性条件下，和吗啉还原胺化，得到4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物5)

9、

10、4)4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯、锌粉和氯化铵作用下发生还原反应，得到5-氨基-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物6)

11、

12、5)5-氨基-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯在酸性条件下，和四氢-4h-吡喃-4-酮还原胺化，得到4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-[(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物7)

13、

14、6)4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-[(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯在酸性条件下，和乙醛还原胺化，得到5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物8)

15、

16、7)5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯在碱性条件下水解，得到5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸(化合物9)

17、

18、8)5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸与3-(氨基甲基)-4,6-二甲基吡啶-2(1h)-酮中的氨基反应，得到n-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-吗啉甲基-(1,1'-联苯)-3-甲酰胺，即tazemetostat。

19、其中步骤1)中的起始原料5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸可以通过以下方法制备：

20、合成路线为：

21、

22、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

23、2-甲基-3-硝基苯甲酸：1.0

24、1,3-二溴-5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮：0.55

25、(2)进行苯环的溴代反应：

26、将符合上述配比要求的2-甲基-3-硝基苯甲酸溶解在浓硫酸中，搅拌下分批加1,3-二溴-5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮；1,3-二溴-5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮中的两个溴可以参与反应，实际上它是过量的；反应完毕，1,3-二溴-5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮转化成5,5-二甲基-2,4-咪唑啉二酮，易溶于水，混合物倒入冰水中，产物得到纯化；其中，浓硫酸的用量(体积)为2-甲基-3-硝基苯甲酸用量(质量)的4.0～5.0倍；反应温度为室温，反应时间为4～6h。

27、所述步骤1)中的偶联催化剂为10％钯碳；所述4'-甲酰基-4-甲基-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸(化合物3)的合成路线为：

28、

29、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

30、5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸：1.0

31、4-甲酰基苯硼酸：1.2～1.5

32、碳酸钾：2.0

33、10％钯碳：0.001～0.1

34、(2)进行suzuki偶联

35、将符合上述配比要求的5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸溶解在dmf和h2o中，搅拌下加4-甲酰基苯硼酸，碳酸钾和10％钯碳，氮气氛围下反应；反应温度80～90℃，反应时间8～10h；其中，dmf：h2o＝7：3。

36、所述步骤2)中，4'-甲酰基-4-甲基-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物4)的合成方法为：

37、合成路线为：

38、

39、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

40、化合物3：1

41、浓硫酸：1％～10％

42、(2)发生酯化反应

43、将化合物3溶在甲醇中，冰浴条件下滴加浓h2so4。滴毕，撤去冰浴，升温至60～80℃进行反应，反应时间8～10h。

44、所述步骤3)中，4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物5)的合成方法为：

45、合成路线为：

46、

47、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

48、4'-甲酰基-4-甲基-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯：1

49、吗啉：1.0～1.5

50、冰醋酸：5.0

51、氰基硼氢化钠：2.0～5.0

52、(2)发生还原胺化反应

53、首先4'-甲酰基-4-甲基-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯中的醛基和吗啉在冰醋酸作用下，发生亲核加成反应，再脱去一分子水得到亚胺，然后亚胺被氰基硼氢化钠还原成产物。其中，吗啉是过量的，溶剂无水甲醇；还原氨化反应在室温进行，反应时间8～10h。

54、所述化合物5的另一种合成路线，以5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯(化合物10)为原料，合成路线具体为：

55、

56、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

57、5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯：1.0

58、4-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二恶硼烷-2-基)苄基]吗啉：1.2

59、磷酸钾：2.0

60、四三苯基膦钯：0.1

61、(2)进行suzuki偶联

62、将符合上述配比要求的5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸甲酯溶解在二氧六环和水中，搅拌下加4-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二恶硼烷-2-基)苄基]吗啉、磷酸钾和四三苯基膦钯，氮气氛围下反应。反应温度80～90℃，反应时间4～8h。

63、其中，原料化合物10的合成路线为：

64、

65、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

66、5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸：1.0

67、浓硫酸：1％～10％

68、(2)发生酯化反应

69、甲醇和5-溴-2-甲基-3-硝基苯甲酸发生酯化反应得到产物。甲醇既是试剂又是溶剂，浓硫酸是催化剂。其中，反应温度是回流，反应时间6～8h。

70、将化合物2溶在甲醇中，冰浴条件下滴加浓h2so4。滴毕，撤去冰浴，升温回流，反应时间8～10h。

71、所述步骤4)中，5-氨基-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物6)的合成路线为：

72、

73、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

74、4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯：1.0

75、锌粉：4.0～8.0

76、氯化铵：3.0～5.0

77、(2)进行还原反应

78、将符合上述配比要求的4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-硝基-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯溶解在工业乙醇中，搅拌下加还原剂锌粉和氯化铵；反应温度60～80℃，反应时间2～4h。

79、所述步骤5)中，4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-[(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物7)的合成路线为：

80、

81、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

82、5-氨基-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯：1.0

83、四氢-4h-吡喃-4-酮：1.0～3.0

84、冰醋酸：5.0

85、氰基硼氢化钠：2.0～5.0

86、(2)发生还原胺化反应

87、首先5-氨基-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯和四氢-4h-吡喃-4-酮在冰醋酸作用下，发生亲核加成反应，再脱去一分子水得到亚胺，然后亚胺被还原剂氰基硼氢化钠还原成产物。其中，四氢-4h-吡喃-4-酮是过量的，溶剂无水甲醇；还原氨化反应在室温进行，反应时间8～10h。

88、所述步骤6)中，5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯(化合物8)的合成路线为：

89、

90、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

91、4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-[(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯：1.0

92、乙醛：1.0～3.0

93、冰醋酸：5.0

94、氰基硼氢化钠：2.0～5.0

95、(2)发生还原胺化反应

96、首先4-甲基-4'-(吗啉甲基)-5-[(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯和乙醛在冰醋酸作用下，发生亲核加成反应，再脱去一分子水得到亚胺，然后亚胺被还原剂氰基硼氢化钠还原成产物。其中，乙醛是过量的，溶剂无水甲醇；还原氨化反应在室温进行，反应时间3～5h。

97、所述步骤7)中，制备5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸(化合物9)的合成路线为：

98、

99、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

100、水解液：1.5mol/l氢氧化钠溶液

101、工业乙醇

102、(2)发生水解反应

103、5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸甲酯溶解在水解液/工业乙醇＝1:1(v/v)中，反应升温至70～80℃，反应时间3～5h。

104、所述步骤8)中，酰胺缩合所用的缩合剂是2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n’,n’-四甲基脲六氟磷酸酯(hatu)、1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑(hoat)、1-羟基苯并三唑(hobt)、o-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸盐(hbtu)、6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯(hctu)、o-苯并三氮唑-n,n,n’,n’-四甲基脲四氟硼酸(tbtu)、2-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(tstu)、2-(5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸季铵盐(tntu)、二环己基碳二亚胺(dcc)、n,n’-二异丙基碳二亚胺(dic)、1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edci)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(pybop)、叠氮磷酸二苯酯(dppa)中的一种；

105、n-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]-5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-吗啉甲基-(1,1'-联苯)-3-甲酰胺，即tazemetostat的合成路线为：

106、

107、(1)按照下述摩尔比称取各原料：

108、5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸：1.0

109、3-(氨基甲基)-4,6-二甲基吡啶-2(1h)-酮：1.2～2

110、缩合剂：1.2～2

111、dipea：3

112、(2)发生酰胺缩合

113、5-[乙基(四氢-2h-吡喃-4-基)氨基]-4-甲基-4'-(吗啉甲基)-(1,1'-联苯)-3-羧酸溶解在dmf/thf＝1：1(v/v)中，边搅拌边加入hatu，随后滴加dipea，加入3-(氨基甲基)-4,6-二甲基吡啶-2(1h)-酮，室温搅拌，反应时间6～8h。

114、本发明的有益效果是：本发明提供的一种全新tazemetostat的合成方法，该方法反应成本低，条件温和，收率高(由30.1％提高至49.1％)，对环境污染少，适于工业化生产。