黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用的制作方法

本发明涉及生物学和医药学领域，更具体的是涉及一种复方制剂黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用。

背景技术：

1、黄连上清片，散风清热，泻火止痛。用于风热上攻、肺胃热盛所致的头晕目眩、暴发火眼、牙齿疼痛、口舌生疮、咽喉肿痛、耳痛耳鸣、大便秘结、小便短赤。主要成分包括黄连、栀子、连翘、炒蔓荆子、防风、荆芥穗、白芷、黄芩、菊花、薄荷、大黄、黄柏、桔梗、川芎、石膏、旋覆花、甘草共17味药材。糖衣片，除去包衣后显黄棕色至棕褐色；气香，味苦。

2、白血病(leukemia)是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。主要分为急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,all)、急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,aml)、慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,cml)和慢性淋巴细胞白血病(chroniclymphocytic leukemia,cll)。目前，白血病主要治疗方案为化学治疗、靶向治疗、免疫治疗和干细胞移植等。急性淋巴细胞白血病主要治疗手段为化学治疗，主要化疗治疗的基本药物为泼尼松(prednisone,pred)、地塞米松(dexamethasone,dex)等糖皮质激素(gcs)，但是，在急性淋巴细胞白血病复发的患者中，对糖皮质激素的耐药性比其他化疗药物更常见。因此，挖掘逆转耐药性和高效低毒的治疗药物，优化治疗手段，是治疗和提高白血病患者生存率及改善患者愈后生活质量的关键途径。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对抵抗白血病糖皮质激素耐药性的困难，寻找出高效低毒和逆转耐药的天然药物资源，提高白血病患者生存率及改善患者愈后生活质量。

2、针对上述目的，本发明提供了黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用，试验证明，在体外，黄连上清片联合糖皮质激素对急性淋巴细胞白血病耐糖皮质激素细胞株jurkat具有很好的抑制作用；在体内，黄连上清片联合泼尼松能有效治疗白血病小鼠，并能提高白血病小鼠的生存率。黄连上清片联合糖皮质激素可制备逆转白血病耐糖皮质激素药物。

3、进一步，上述黄连上清片是由包括黄连、栀子、连翘、炒蔓荆子、防风、荆芥穗、白芷、黄芩、菊花、薄荷、大黄、黄柏、桔梗、川芎、石膏、旋覆花、甘草共17味药材制备而成的复方制剂。

4、进一步，上述糖皮质激素包括泼尼松、地塞米松。

5、进一步，上述白血病为急性淋巴细胞白血病。

6、进一步，上述治疗白血病药物采用药剂学上允许的任何口服剂，任何注射剂型，或利用现代技术制成的剂型。

7、本发明还提供了黄连上清片在制备逆转糖皮质激素耐药的白血病药物中的应用。

8、目前淋巴系统肿瘤化疗方案中最常选用的糖皮质激素是地塞米松(dex)和泼尼松(pred)。pred需经肝脏代谢为泼尼松龙后才具有生物学活性。前期动物预实验发现连续腹腔注射dex的scid小鼠死亡率明显高于其他组甚至model组，所以本发明体外细胞实验部分选用dex，而体内动物实验部分则选用pred进行实验。由长春新碱(vcr)和泼尼松(pred)组成的vp方案是急性淋巴细胞白血病诱导缓解治疗的基础骨架方案，所以本发明动物实验选择pred+vcr作为阳性用药。

9、据文献报道，cem-c1和jurkat均为对地塞米松(dex)耐药的急性淋巴细胞白血病细胞系，在多篇文献中作为逆转糖皮质激素耐药的实验细胞株进行研究。在体外，利用mtt法筛选出对地塞米松(dex)不敏感细胞株jurkat；在体外检测黄连上清片(y4)联合糖皮质激素对急性淋巴细胞白血病jurkat细胞具有显著的抑制作用；通过流式细胞术检测联用组可显著诱导细胞凋亡，体现了其可作为抵抗白血病耐药性药物的重要潜力。在体内，f-mulv诱导的白血病小鼠模型(balb/c)和jurkat细胞异种移植的scid小鼠模型结果显示，y4+pred联用可增加小鼠的存活率，减轻小鼠脾脏负担，增加血容比，减少骨髓中白血病细胞的比例，减少小鼠脾脏内白血病细胞的浸润，治疗效果显著优于单用组pred或y4，未观察到明显毒副作用。

10、本发明的有益效果如下：

11、1、本发明将黄连上清片和糖皮质激素联合用药，能抑制jurkat细胞的活力，并且具有浓度依赖性；能抑制jurkat细胞的增殖，且呈浓度和时间依赖性；能明显诱导人急性淋巴细胞白血病细胞系jurkat凋亡；动物实验中，与模型组相比，黄连上清片联用糖皮质激素能升高白血病小鼠血容比，降低小鼠脾脏负担，无明显毒副作用，并提高白血病小鼠的存活率，且黄连上清片已用于临床，可有效缩短临床前期研究，具有很好的应用前景。

12、2、与黄连上清片的现有用途相比，本发明发现了黄连上清片与糖皮质激素联合抗急性淋巴细胞白血病的新功效，其有成为逆转急性淋巴细胞白血病耐糖皮质激素药物的潜力，或从其中分离出能高效增敏的化合物，且该药为已上市的药物，可有效缩短临床前期研究，具有很好的应用前景。该药物治疗效果显著，毒副作用小，同时体现了黄连上清片的新功效，老药新用的重要作用。

技术特征：

1.黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于：所述黄连上清片是由包括黄连、栀子、连翘、炒蔓荆子、防风、荆芥穗、白芷、黄芩、菊花、薄荷、大黄、黄柏、桔梗、川芎、石膏、旋覆花、甘草共17味药材制备而成的复方制剂。

3.根据权利要求1所述的黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于：所述糖皮质激素包括泼尼松、地塞米松。

4.根据权利要求1所述的黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于：所述白血病为急性淋巴细胞白血病。

5.根据权利要求1所述的黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于：所述药物采用药剂学上允许的任何口服剂型或注射剂型。

6.黄连上清片在制备逆转糖皮质激素耐药的白血病药物中的应用。

技术总结本发明公开了黄连上清片联合糖皮质激素在制备治疗白血病药物中的应用，所述黄连上清片联用糖皮质激素能抑制Jurkat细胞的活力，并且具有浓度依赖性；能抑制Jurkat细胞的增殖，且呈浓度和时间依赖性；能明显诱导人急性淋巴细胞白血病细胞系Jurkat凋亡；动物实验中，与模型组相比，黄连上清片联用糖皮质激素能升高白血病小鼠血容比，降低小鼠脾脏负担，无明显毒副作用，并提高白血病小鼠的存活率，因此，黄连上清片联合糖皮质激素具有发展为制备逆转白血病耐糖皮质激素药物的潜在价值。且黄连上清片已用于临床，可有效缩短临床前期研究，具有很好的应用前景。技术研发人员：陈启清,李艳梅,秦川霞,宋晶睿,黄裕兵,黄磊,饶青受保护的技术使用者：贵州省天然产物研究中心技术研发日：技术公布日：2024/8/16