包含源于罗斯氏菌属或双歧杆菌属的细胞外囊泡的用于预防、改善或治疗非酒精性脂肪性肝病的组合物的制作方法

本发明涉及一种用于预防、改善或治疗非酒精性脂肪性肝病(nafld)的组合物，其包含罗斯氏菌属(roseburia spp.)菌株、双歧杆菌属(bifidobacterium spp.)菌株或源于它们的细胞外囊泡(ev)。

背景技术：

1、肝脏是在代谢中起核心作用的器官，当肝功能异常时，个体整体的营养代谢就会出现问题。在肝脏疾病中，脂肪肝是指正常细胞中不存在的中性脂肪异常沉积在肝细胞中的现象。正常肝脏包含约5％的脂肪组织，其由中性脂肪、脂肪酸、磷脂、胆固醇和胆固醇酯组成，但当脂肪肝开始发展时，大部分脂肪成分会被中性脂肪取代，并且当中性脂肪的量大于或等于肝脏总重量的5％时，即可诊断为脂肪肝。当脂肪肝恶化并且肝细胞中的脂肪量增加时，重要细胞成分如细胞核会被推向一侧，并且因脂肪堆积而扩张的肝细胞会挤压周围的微血管和淋巴结，导致肝脏内的血液和淋巴循环被扰乱。当这种情况发生时，肝细胞可能无法获得适当的氧气和营养物质供应，从而导致肝功能受损。

2、脂肪肝可分为因过量饮酒引起的酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝。非酒精性脂肪性肝病(nafld)是一种代谢失调导致的代谢性肝病，是由肝脏中的脂肪堆积引起的，而与饮酒无关。nafld包括多种疾病，从单纯的肝脏脂肪变性到伴有炎症的脂肪性肝炎或肝硬化(brunt em,2001)，并且可由由肥胖或胰岛素抵抗、糖尿病和遗传原因导致的肝细胞中脂肪沉积所致。特别是，与临床预后良好的单纯性脂肪肝不同，非酒精性脂肪性肝炎(nash)是一种进行性肝病，其发展为肝硬化和肝癌的风险很高，因此需要及时和适当的治疗(angulop.,hepatology,2010；51:373-375)。

3、随着nafld患者人数的增加，对用于预防、改善和治疗该疾病的药物开发的需求也日益增加。然而，目前尚未有药物被正式批准为nafld的治疗药物，因此需要开发一种能够从根本上治疗nafld的药物。

技术实现思路

1、[技术问题]

2、在寻找一种与传统治疗剂相比对nafld具有更好效果的药物的不懈努力之下，本发明的发明人通过证实罗斯氏菌属菌株、双歧杆菌属菌株或源于它们的细胞外囊泡(ev)对nafld具有优异的预防、改善和治疗效果，从而完成了本发明。

3、因此，本发明的一个目的是提供一种用于预防或治疗nafld的药物组合物，其包含选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

4、本发明的另一个目的是提供一种用于预防或治疗nafld的试剂盒，其包含选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

5、本发明的另一个目的是提供一种预防或治疗nafld的方法，其包括向有此需要的受试者施用选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

6、本发明的另一个目的是提供一种用于预防或改善nafld的食品组合物，其包含选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

7、本发明的另一个目的是提供一种用于预防或改善nafld的饲料组合物，其包含选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

8、然而，本发明所要解决的技术问题并不局限于上述问题，本领域技术人员从下文的描述中可以清楚地理解未提及的其他问题。

9、[技术方案]

10、本发明提供了一种用于预防或治疗nafld的药物组合物，其包含选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

11、此外，本发明提供了一种用于预防或改善nafld的食品组合物，其包含选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

12、此外，本发明提供了一种用于预防或改善nafld的饲料组合物，其包含选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种作为活性成分。

13、此外，本发明提供了一种用于预防、改善或治疗nafld的试剂盒，其包含选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

14、此外，本发明提供了一种预防或治疗nafld的方法，其包括向有此需要的受试者施用选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种。

15、此外，本发明提供了选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种用于预防或治疗nafld的用途。

16、此外，本发明提供了选自由源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev组成的组中的一种或多种用于制备nafld治疗剂的用途。

17、在本发明的一个实施方案中，ev的平均直径可以为30nm至200nm，但不限于此。

18、在本发明的另一个实施方案中，源于罗斯氏菌属菌株的ev可以是由罗斯氏菌属菌株自然或人工分泌的；并且

19、在本发明的另一个实施方案中，源于双歧杆菌属菌株的ev可以是由双歧杆菌属菌株自然或人工分泌的，但不限于此。

20、在本发明的又一个实施方案中，罗斯氏菌属菌株是可以是选自由肠罗斯氏菌(roseburia intestinalis)、粪罗斯氏菌(roseburia faecis)、人罗斯氏菌(roseburiahominis)和食葡糖罗斯氏菌(roseburia inulinivorans)组成的组中的一种或多种，但不限于此。

21、在本发明的又一个实施方案中，双歧杆菌属菌株可以是选自由长双歧杆菌(bifidobacterium longum)、两歧双歧杆菌(bifidobacterium bifidum)、短双歧杆菌(bifidobacterium breve)、乳双歧杆菌(bifidobacterium lactis)和青春双歧杆菌(bifidobacterium adolescentis)组成的组中的一种或多种，但不限于此。

22、在本发明的又一个实施方案中，nafld可以是选自由脂肪变性(steatosis)、纤维化、非酒精性脂肪性肝炎、非酒精性脂肪肝(nafl)和肝硬化组成的组中的一种或多种，但不限于此。

23、在本发明的又一个实施方案中，本发明的药物组合物可以具有选自由以下组成的组中的一种或多种效果：

24、i)降低血清天冬氨酸氨基转移酶(ast)水平或活性；

25、ii)降低血清丙氨酸氨基转移酶(alt)水平或活性；

26、iii)降低血清总胆红素(t-bil)水平；

27、iv)降低肝脂肪变性；

28、v)减少炎症细胞浸润；

29、vi)减少炎症灶的数量；和

30、vii)减少肌成纤维细胞的数量，但不限于此

31、在本发明的又一个实施方案中，食品组合物可以是保健功能食品组合物，但不限于此。

32、[有益效果]

33、已经证实，本发明的源于罗斯氏菌属菌株或双歧杆菌属菌株的ev在nafld动物模型中恢复肝功能，通过减少肝脏中的脂肪堆积改善脂肪变性，并表现出抗炎作用，例如抑制炎症细胞浸润到肝组织中，以及通过降低肌成纤维细胞表达来抑制肝纤维化。此外，还证实，源于属于罗斯氏菌属和双歧杆菌属菌株的同属菌株的所有ev均具有强大的抗炎作用。因此，源于罗斯氏菌属菌株的ev和源于双歧杆菌属菌株的ev能够改善脂肪肝引起的肝损伤和功能障碍，并发挥强效的抗炎和抗纤维化作用，因此可以用作用于预防、改善和/或治疗nafld的组合物。