一种AIE-DSS荧光探针及其制备方法和在早期龋检测中的应用

本发明涉及荧光检测，特别是涉及一种aie-dss荧光探针及其制备方法和在早期龋检测中的应用。

背景技术：

1、龋病是人类常见与多发疾病，是关系着人类健康的重要慢性疾病之一。研究表明龋病引起的牙体缺损严重影响人类生活质量，此外，龋病病灶引起的菌血症与许多全身疾病密切相关。近年来，随着人们生活水平的不断提高，龋病作为严重危害人类生活品质和身心健康的疾病，越来越受到社会关注。由于龋病发病早期比较隐匿，常被忽略，等到出现不适症状,已经发展到很深的程度，需要进行复杂的诊疗，耗费大量的人力、物力，造成严重的疾病负担。因此，龋病治疗的关键在于早发现、早诊断和早干预。

2、寻找一种无创、快速、灵敏的早期龋检测方法非常重要。目前龋病的检测手段包括：基于散射效应原理的检测技术，基于双折射效应的检测技术，例如偏振光检测、光学相干层析技术、拉曼光谱技术等，其他基于光热效应的频域光热辐射检测技术，例如光热锁相成像技术等。上述方法都具有一定的局限性。

3、除此之外，目前龋病的早期干预主要为再矿化治疗，常用的再矿化物质包括氟化物、无定形磷酸钙、生物活性玻璃、硅酸钙、纳米羟基磷灰石、多肽等物质。上述物质在牙釉质再矿化过程中均能发挥一定的作用，但仍存在局限性，如氟化物在口内停留时间过长，或未清除干净，可能会引起氟斑牙或氟骨症；钙制剂穿透性差，对深层龋齿的修复效果不佳等。

4、一种既可以检测早期龋由具有干预作用的材料亟待进一步研究和开发。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，而提供一种aie-dss荧光探针。

2、本发明的另一个目的是提供所述一种aie-dss荧光探针的制备方法。

3、本发明的另一个目的是提供所述一种aie-dss荧光探针在早期龋检测中的应用

4、为实现本发明的目的所采用的技术方案是：

5、一种aie-dss荧光探针，包括dspe-peg2000-mal-aie材料构成核壳结构，其中dspe-peg2000-mal为外壳，aie材料被包覆在内形成内核，8dss外接于dspe-peg2000-mal外壳上。

6、一种aie-dss荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

7、步骤1，制备由8个天冬氨酸-丝氨酸-丝氨酸重复序列组成的多肽8dss；

8、步骤2，制备aie荧光纳米微粒溶液：将质量比为1：(2-4)的aie材料与dspe-peg2000-mal溶解于溶剂中，混合均匀后在超声条件下逐滴加入蒸馏水中，超声反应5-10min，然后除去溶液中的溶剂，置于透析袋中在蒸馏水中透析，接着离心浓缩，得到aie荧光纳米微粒溶液；

9、步骤3，将步骤1得到的多肽8dss溶解于步骤2得到的aie荧光纳米微粒溶液中反应12-14h，将反应后的溶液置于透析袋中在蒸馏水中透析，接着离心浓缩，得到aie-dss荧光探针。

10、在上述技术方案中，步骤1中多肽8dss与步骤2中aie材料的质量比为1：(4-8)。

11、在上述技术方案中，所述步骤2中，溶剂为四氢呋喃。

12、在上述技术方案中，所述步骤2中，除去溶液中的溶剂时，利用空气泵去除。

13、在上述技术方案中，所述步骤2中，超声反应的温度为20～30℃，超声反应的超声功率为65-75w。

14、在上述技术方案中，所述步骤3中的反应在摇床上进行。

15、在上述技术方案中，所述步骤2和步骤3中，透析时间均为24-36h。

16、本发明的另一方面，还包括所述的aie-dss荧光探针在制备早期龋脱矿区域定位检测试剂中的应用。

17、本发明的另一方面，还包括所述的aie-dss荧光探针在制备干预早期龋材料中的应用。

18、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

19、1.8dss是一种人工合成的由8个dss重复序列组成的多肽，8dss有很强的结合钙离子的能力，将其与聚集诱导发光材料(aie)结合可以直接靶向牙釉质，具有精确定位的作用。

20、2.本发明的aie-dss荧光探针可以在局部诱导钙磷结合，促进脱矿区域的钙磷重新聚集，从而达到加快脱矿区域再矿化的作用，因此既可以检测早期龋齿又可以对早期龋进行干预，还可以进一步应用于牙齿隐裂、牙本质小管敏感等。

21、3.利用本发明的aie-dss荧光探针在应用到早期龋和干预时，只需将材料涂抹在牙齿表面，即可上机检测，因此可以做到无创性且简单易操作。

22、4.本发明的aie-dss荧光探针灵敏性高，能够在水中聚集，不易淬灭，具有良好的抗菌性和生物安全性，同时荧光成像具有高的灵敏性、低廉的成本、可操作性强和几乎无副作用产生等优点。

技术特征：

1.一种aie-dss荧光探针，其特征在于，包括dspe-peg2000-mal-aie材料构成核壳结构，其中dspe-peg2000-mal为外壳，aie材料被包覆在内形成内核，8dss外接于dspe-peg2000-mal外壳上。

2.一种aie-dss荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的aie-dss荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤1中多肽8dss与步骤2中aie材料的质量比为1：(4-8)。

4.如权利要求2所述的aie-dss荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，溶剂为四氢呋喃。

5.如权利要求2所述的aie-dss荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，除去溶液中的溶剂时，利用空气泵去除。

6.如权利要求2所述的aie-dss荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤2中，超声反应的温度为20～30℃，超声反应的超声功率为65-75w。

7.如权利要求2所述的aie-dss荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤3中的反应在摇床上进行。

8.如权利要求2所述的aie-dss荧光探针的制备方法，其特征在于，所述步骤2和步骤3中，透析时间均为24-36h。

9.如权利要求1所述的aie-dss荧光探针在制备早期龋脱矿区域定位检测试剂中的应用。

10.如权利要求1所述的aie-dss荧光探针在制备干预早期龋材料中的应用。

技术总结本发明公开了一种AIE‑DSS荧光探针及其制备方法和在早期龋检测中的应用，AIE‑DSS荧光探针包括DSPE‑PEG<subgt;2000</subgt;‑Mal‑AIE材料构成核壳结构，其中DSPE‑PEG<subgt;2000</subgt;‑Mal为外壳，AIE材料被包覆在内形成内核，8DSS外接于DSPE‑PEG<subgt;2000</subgt;‑Mal外壳上。本发明的AIE‑DSS荧光探针可应用于早期龋脱矿区域定位检测和早期龋的干预，具有灵敏度高、成本低的优点，具有良好的抗菌性和生物安全性。技术研发人员：王冠华,张晓燕,邹慧儒,丁丹受保护的技术使用者：天津市口腔医院（天津市整形外科医院、南开大学口腔医院）技术研发日：技术公布日：2024/9/12